Биоорганическая химия, 2024, № 1

Р осс и йс к а я а к а де м и я н ау к
Б И О О Р Г А Н И Ч Е С К А Я 
Х И М И Я
Т о м 5 0     № 1     2 0 2 4     Я н в а р ь – Ф е в р а л ь
Жу р н а л о с н о в а н в я н в а р е 1 9 7 5 г.
В ы х о д ит 6 р аз в г о д 
I S S N 0 13 2- 3 4 2 3
Жу р н а л из д ае тс я п о д ру ко в о дс т в о м 
О т де ле н и я б и о л ог и чес к и х н ау к Р А Н
Гл а в н ы й ре д а к т о р
С. Н. К о ч ет к о в
М е ж д у н а р о д н ы й   р е д а к ц и о н н ы й   с о в е т
А. А. Б ог д а н о в, А. Н. Гр е ч к и н, М. П. К и р п и ч н и к о в, 
И. А. М и х а й л о п у л о, Н. Ф. М я с о е д о в,
Ш. И. С а л и х о в, В. А. Ст о н и к, М. С. Ю н у с о в, 
Mi c h a el G. Bl a c k b ur n ( U K), Ji n H a n ( S o ut h K or e a),
A m eli a Pil ar R a ut er ( P ort u g al), C h a u Va n Mi n h ( Vi et n a m), 
A n dr ei V. Zv y a gi n ( A ustr ali a)
Р е д а к ц и о н н а я   к о л л е г и я
А. С. А р с е н ь е в, С. О. Б а ч у р и н, В. В. В е с е л о в с к и й, В. В. В л а с о в, 
А. Г. Га б и б о в, Т. Г и а н и к, С. М. Д е е в, Н. Л. Е р е м е е в, Р. Г. Е ф р е м о в, 
В. М. Л и п к и н, С. А. Л у к ь я н о в (з а м. г л а в н ог о р е д а кт о р а),
И. В. М и х у р а ( от в ет ст в е н н ы й с е к р ет а р ь), А. Р. Х о м ут о в, 
Н. Э. Н и ф а нт ь е в, Т. В. О в ч и н н и к о в а (з а м. г л а в н ог о р е д а кт о р а),
Т. С. О р е ц к а я, П. М. Р у б ц о в, Л. Д. Р у м ш, Е. Д. С в е р д л о в, 
В. Г. Ту м а н я н, А. И. Ус о в, Y uri V. K ot el e vts e v ( S c otl a n d), 
Vl a dl e n Z. Sl e p a k ( U S A), K o nst a nti n E. Petr u k hi n ( U S A), 
L e T hi Hi e n ( Vi et n a m), R a o D esir az u N ar asi m h a (I n di a)
З а ве ду ю щ и й ре д а к ц ие й Н. И. К о р о л е н к о 
Н ау ч н ы й ре д а к т о р М. Е. С у б б от и н а 
Ре д а к т о р Е. А. П а нт е л е е в а
Ве рс т к а Н. И. К о р о л е н к о
А д рес ре д а к ц и и : 117 9 9 7 Г С П, М о с к в а, В- 4 3 7,
у л. М и к л у х о- М а к л а я, 1 6/ 1 0, к о р п. 3 2, к о м н. 5 0 9
Теле ф о н : + 7 ( 4 9 5) 3 3 0- 7 7- 8 3
Э л е кт р о н н а я п о чт а: rj b c @i b c h.r u; 
k or ol e n k oi b c h @ y a n d e x.r u
А д р е с с а йт а: htt ps:// w w w.rj b c. o nli n e
М о с к в а
Ф Г Б У « Из д а те л ь ст в о « Н ау к а »
© Р о с с и й с к а я а к а д е м и я н а у к, 2 0 2 4
© Р е д к о л л ег и я ж у р н а л а 
     “ Б и о о рг а н и ч е с к а я х и м и я ” 
     ( с о ст а в ит е л ь), 2 0 2 4

СОДЕРЖАНИЕ
Том 50, номер 1, 2024
Новый подход к получению аналога КЭП-структуры с правильной ориентацией (Anti-Reverse Cap Analog, 
3
ARCA) 2mGpppG
А. Л. Каюшин, К. В. Антонов, Е. В. Дорофеева, М. Я. Берзина, А. О. Арнаутова, И. А. Прохоренко, 
А. И. Мирошников, И. Д. Константинова
Поверхностно-активные вещества как средства доставки репортерной генетической конструкции на основе 
суицидного гена биназы в опухолевые клетки
11
Е. В. Дудкина, Э. А. Васильева, В. В. Ульянова, Л. Я. Захарова, О. Н. Ильинская
Участие транскрипционного фактора СREB1 в регуляции работы гена Mdh2, кодирующего малатдегидрогеназу, в печени крыс при аллоксановом диабете
26
А. Т. Епринцев, К. Р. Романенко, Н. В. Селиванова
Рактеристики и определение острой токсичности водорастворимых полисахаридов из базидиального гриба 
Ganoderma lucidum
37
С. Б. Хайтметова, А. С. Тураев, Г. А. Халилова, Б. И. Мухитдинов
Синтез стероидных трейсеров методом оксимного лигирования и их использование в поляризационном 
51
флуоресцентном иммуноанализе
И. А. Прохоренко, Д. А. Глущенко, Е. Л. Гуляк, И. В. Михура, В. А. Коршун, Л. И. Мухаметова, 
С. А. Еремин
ПИСЬМА РЕДАКТОРУ
Аминокумараноны как хемилюминесцентные индикаторы активности уреазы и перекиси водорода
65
А. Ю. Смирнов, Н. С. Балеева, А. С. Мишин, Ю. А. Богданова, М. С. Баранов
Флуорогенные красители белка NanoLuc на основе арилиден-имидазолонов
77
Э. Р. Зайцева, Ю. А. Богданова, Н. С. Балеева, А. Ю. Смирнов, М. С. Баранов
2,5-Диметоксибензилиденроданин и его ациклические аналоги как селективные флуорогенные красители 
липидных капель живых клеток
87
С. А. Краснова, Ю. А. Богданова, А. И. Соколов, И. Н. Мяснянко, А. Ю. Смирнов, М. С. Баранов
98
Правила для авторов журнала “Биоорганическая химия” 2024


	 , 2024,  50,  1, . 3–10
 
 
 
 
 
   
УДК 577.113.6
НОВЫЙ ПОДХОД К ПОЛУЧЕНИЮ АНАЛОГА  
КЭП-СТРУКТУРЫ С ПРАВИЛЬНОЙ ОРИЕНТАЦИЕЙ  
(ANTI-REVERSE CAP ANALOG, ARCA) 2mGpppG
© 2024 г. А. Л. Каюшин*, #, К. В. Антонов*, Е. В. Дорофеева*, М. Я. Берзина*,  
А. О. Арнаутова*, И. А. Прохоренко*, А. И. Мирошников*, И. Д. Константинова*
* ФГБУН “Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова” РАН,  
Россия, 117997 Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10
Поступила в редакцию 14.09.2023 г.  
После доработки 27.09.2023 г.  
Принята к публикации 28.09.2023 г.
Предложен новый подход к синтезу ARCA (Anti-Reverse Cap Analog) классической структуры – диме- 
тилированного динуклеотида гуанозина 2mGpppG. Традиционный подход к его получению состоит в кон- 
денсации активированного 5′-дифосфата 7,3′-О-диметилгуанозина c 5′-монофосфатом гуанозина. Мы 
предлагаем использовать 3′-О-метилгуанозин только для синтеза 5′-монофосфата диметилированного 
гуанозина, а в конденсацию вводить активированный 5′-дифосфат гуанозина. Определены условия 
фосфорилирования 3′-O-метилгуанозина, позволяющие избежать образования побочного 3′-О-метил-5′- 
дезокси-5′-хлоргуанозин-2′-фосфата. ARCA синтезирован с высоким выходом (89% на стадии конденсации). 
Разработанный нами вариант синтеза легко масштабируется и удобен для получения граммовых количеств 
ARCA.
Ключевые слова: ARCA, 2mGpppG, имидазолид, гуанозин
DOI: 10.31857/S0132342324010015, EDN: QSYRGR
ВВЕДЕНИЕ
напрямую зависит от структуры кэпа и количества 
метилированных участков. 
Процессинг эукариотических мРНК начинается 
с образования на 5′-конце так называемой кэпСинтезировано и изучено большое число аналогов 
структуры – 7-метилгуанозина, присоединенного 
природного N7-метилгуанозинового кэпа [1–5], но 
через трифосфатный мостик к первому нуклеотиду 
исследователи отдают предпочтение работе с мети- 
(A или G) цепи РНК. В клетке кэп играет важней- 
лированным по N7 и О3′ атомам динуклеотида гуаношую роль в функционировании РНК – регулирует 
зина 2mGpppG (рис. 1) [1–5]. Этот кэп можно получить 
химическим синтезом, предложенным Stepinski et al. 
процессы трансляции, сплайсинга и межклеточного 
в 2001 г. [4]. 
транспорта. Эффективность выполняемых функций 
Сокращения: CDI – карбонилдиимидазол; ARCA – аналог кэп-структуры с правильной ориентацией (Anti-Reverse Cap Analog).
#Автор для связи: (тел.: +7 (916) 686-45-03; эл. почта: kayushin.alexej@yandex.ru).
3

КАЮШИН и др.
динуклеотида гуанозина 2mGpppG в лабораторных 
(а)
условиях.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
В нашем случае нужно было ответить на два воп- 
роса: во-первых, 5′-дифосфат какого нуклеозида мы 
(б)
получаем – гуанозина или 7,3′-О-диметилгуанозина, 
и, во-вторых, какой фосфат мы активируем на стадии 
конденсации – дифосфат или монофосфат (рис. 1).
На последней стадии синтеза мы использовали 
активированный 5′-дифосфат гуанозина (IV) и 
5′-монофосфат 7,3′-О-диметилгуанозина (VI). Схема 
синтеза динуклеотида ARCA (I) приведена на рис. 2.
Рис. 1. Сайты конденсации при получении ARCA (I):  
(а) – классический вариант [5] (красная линия); (б) – предложенный нами (зеленая линия).
Мононуклеотид (II) получали обработкой суспензии гуанозина в триэтилфосфате хлорокисью фосОбщепринятая стратегия синтеза динуклеотифора. В работе Yoshikawa et al. [6] для получения 
дов ARCA (Anti-Reverse Cap Analog) заключается в 
мононуклеотида (II) в качестве растворителя испольследующем: 1) получение 5′-полифосфата (в простейзовали триметилфосфат и добавляли воду для пре- 
шем случае – дифосфата) одного из нуклеозидов; 
дотвращения образования 5′,2′- или 5′,3′-дифосфатов; 
2) получение 5′-моно- или полифосфата второго 
в наших условиях дифосфаты не образовывались. 
нуклеозида; 3) активация одного из этих фосфатов 
Мононуклеотид (II) выделяли из реакционной смеси 
(обычно через фосфоимидазолид) и последующая 
с помощью ионообменной хроматографии в виде 
конденсация с образованием, например, Р1,Р3-трифостриэтиламмониевой соли с выходом 72%.
фата или Р1,Р4-тетрафосфата динуклеотида [1–5].
 Взаимодействием мононуклеотида (II) с карбонилКак правило, в синтезе динуклеотидов ARCA 
диимидазолом в DMF получали соответствующий 
используется 5′-дифосфат 7-метилгуанозина или его 
имидазолид, который без выделения обрабатывали 
производных по 2′- или 3′-положению (см., например, 
триэтиламмониевой солью ортофосфорной кислоты 
работы [1–5]) и имидазолид 5′-монофосфата гуано- 
(получена in situ из 1 экв. триэтиламина и 1 экв. 
зина (рис. 1а). Однако нуклеотиды, содержащие 
кислоты) с образованием 5′-дифосфата (III). В 
7-метилгуанозин, менее стабильны по сравнению 
качестве катализатора реакции использовали хлос неметилированными нуклеотидами. Кроме того, 
ристый цинк [7]. Соединение (III) выделяли из 
3′-О-метилгуанозин – недешевый препарат. Поэтому 
реакционной смеси с помощью ионообменной 
желательно свести к минимуму число реакций, в 
хроматографии в виде триэтиламмониевой соли с 
которых он участвует. 
выходом 57%.
Основная цель данного исследования – разраТриэтиламмониевая соль соединения (IV) была 
ботка простого и эффективного способа синтеза 
получена из соединения (III) известным методом с 
ARCA, который можно было бы легко масштаиспользованием 2,2′-дитиодипиридина, трифенилбировать до получения граммовых количеств 
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024

НОВЫЙ ПОДХОД К СИНТЕЗУ 2mGpppG
5
Рис. 2. Схема синтеза ARCA (I).
Как следует из данных ЯМР, ароматическая струкфосфина, имидазола и триэтиламина [1–5] с выходом 
73%. Таким образом, мы синтезировали первый 
тура остатка гуанина не нарушена, следовательно, 
компонент для последней стадии синтеза соединемодификация прошла по остатку рибозы. Сдвиг сиг- 
ния (I).
нала C5′ в сильное поле (44.80 м.д. вместо обычных 
Следующим этапом работы был синтез 5′-моно- 
для 5′-фосфатов гуанозина 63–65 м.д.) указывает на 
фосфата 7,3′-О-диметилгуанозина (V). Вначале мы 
то, что этот атом соединен с атомом более электро- 
попытались фосфорилировать 3′-О-метилгуанозин 
отрицательным, чем атом кислорода фосфатной 
по той же методике, что и гуанозин, но помимо це- 
группы. Сигналы атомов C1′, C2′ и C3′ расщеплены 
левого продукта неожиданно получили 3′-О-метил-5′в дублеты (JC1′-P = 5.0, JC2′-P = 3.8 и JC3′-P = 2.1 Гц) – 
 
дезокси-5′-хлоргуанозин-2′-фосфат (VII) с выходом 
это характерно для атомов углерода, непосредствен- 
18%. Состав этого соединения подтверждается дан- 
но соединенных с атомом кислорода фосфатной 
ными масс-спектроскопии – два положительных иона 
группы, и для соседних атомов углерода. Эти факты 
с m/z [M + H]+ 396.0469 (100% 35Cl) и 398.0440 (31.8% 
и результаты анализа двумерных спектров ЯМР 
37Cl), вычислено 396.0476 (100%) и 398.0446 (32.0%) 
однозначно подтверждают структуру соединения 
соответственно. Местоположение фосфатной группы 
(VII) (рис. 3).
и атома хлора установлено анализом данных ЯМР. 
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024

КАЮШИН и др.
6
Хромато-масс-спектрометрию проводили в системе Agilent 6210 TOF LC/MS (Agilent Technologies, 
США).
Гуанозин-5′-монофосфат, триэтиламмониевая 
соль (II). Суспензию 1 г (3.5 ммоль) гуанозина в 
10 мл триэтилфосфата охлаждали до 0°С и при 
интенсивном перемешивании добавляли 1.3 мл 
Рис. 3. Структура побочного продукта (VII) в синтезе 
(14.1 ммоль) POCl3. Инкубировали 3 ч при 0°С и 6 ч 
 
5′-монофосфата 7,3′-О-диметилгуанозина (V).
при 6°С. Избыток POCl3 отгоняли, добавляли 
25 мл 1 М ТЕАВ и оставляли на 16 ч при комнатной 
Триэтиламмониевая соль соединения (V) была 
температуре. Добавляли 50 мл воды и наносили на 
получена тем же методом, что и соединение (II), но 
колонку (3 × 17 см) с DEAE-Sephadex A-25 (HCO3
–без удаления избытка POCl3. Выход составил 69%, 
форма). Элюировали градиентом концентрации 
соединение (VII) не образовывалось. МетилироваТЕАВ (0.05–0.45 М, 1 л, скорость потока 6 мл/мин). 
 
нием соединения (V) в условиях, описанных в работе 
Фракции, содержавшие искомый продукт, объеJemielity et al. [5], получили триэтиламмониевую соль 
диняли, упаривали, остатки триэтиламина удасоединения (VI) с выходом 83%.
ляли соупариванием с этанолом (3 × 100 мл) и лио- 
Наконец, конденсацией соединений (IV) и (VI) в 
филизировали. Выход 1.43 г (2.53 ммоль, 72%). 
присутствии ZnCl2 синтезировали ARCA (I) в виде 
Вычислено для аниона C10H13N5O8P [M – H]–
триэтиламмониевой соли. После перевода этой соли 
362.0507, найдено 362.0736.
в натриевую выход составил 89%.
1Н-ЯМР (DMSO-d6): 7.96 (с, 1Н, Н8), 6.61 (с, 2Н, 
NH2), 5.69 (д, J 6.5, 1Н, H1′), 4.57–4.55 (м, 1Н, H2′), 
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
4.18–4.17 (м, 1Н, H3′), 3.99–3.98 (м, 1Н, H4′), 3.88–3.85 
В работе использовали реактивы Sigma (США) 
(м, 1Н, H5′), 3.83–3.80 (м, 1Н, H5′).
и Aldrich (США) без дополнительной очистки, 
13C-ЯМР (DMSO-d6): 157.31 (C6), 154.24 (C2), 
3′-О-метилгуанозин (Shanghai Macklin Biochemical 
151.98 (C4), 136.25 (C8), 117.00 (C5), 86.80 (C1′), 
Co., Ltd., КНР), DEAE-Sephadex A-25 и CM-Sepha- 
74.07 (C2′), 84.55 (д, J 7.6, C4′), 71.51 (C3′), 64.67 
dex C-25 (Pharmacia, Швеция), Toyopearl DEAE-650M 
(д, J 4.1, C5′).
(Tosoh Corporation, Япония). Спектры ЯМР регис15N-ЯМР (DMSO-d6): 248.69 (N7), 169.79 (N9), 
трировали на спектрометре Avance DRX-700 (Bruker, 
73.18 (NH2).
Германия) в DMSO-d6 или в D2O при 303 К. Рабо- 
Гуанозин-5′-дифосфат, триэтиламмониевая 
чая частота для 1Н-ЯМР – 700 МГц, для 13С – 176 МГц, 
соль (III). К раствору 98 мг (1 ммоль) безводной 
для 15N – 71 МГц. Химические сдвиги измеряли в 
Н3РО4 в 10 мл DMF добавляли 140 мкл (1 ммоль) 
м.д. (δ) относительно остаточных сигналов протонов 
триэтиламина и выдерживали 30 мин (раствор 1). 
К суспензии 114 мг (0.2 ммоль) соединения (II) в 
 
DMSO (2.50 м.д.) или D2O (4.79 м.д.) в качестве 
внутреннего стандарта. Константы спин-спинового 
4 мл DMF добавляли 162 мг (1 ммоль) CDI и через 
1.5 ч добавляли раствор 1. К получившейся суспензии 
взаимодействия (J) измеряли в Гц.
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024

НОВЫЙ ПОДХОД К СИНТЕЗУ 2mGpppG
7
1Н-ЯМР (DMSO-d6): 10.75 (с, 1Н, Н1), 7.89 (c, 1H, 
добавляли раствор 166 мг (1.2 ммоль) ZnCl2 в 2 мл 
DMF и оставляли при интенсивном перемешивании 
H8), 7.82 (c, 1H, H5′′), 7.23 (c, 1H, H4′′), 6.86 (c, 1H, 
на 16 ч. Упаривали досуха, растворяли в 30 мл воды 
H2′′), 6.64 (c, 2H, NH2), 5.67 (д, J 6.1, H1′), 4.55–4.54 
и выливали в суспензию 500 мг (1.69 ммоль) EDTA 
(м, 1Н, H2′), 4.17–4.16 (м, 1Н, H3′), 3.95–3.93 (м, 1Н, 
в 30 мл воды. Нейтрализовали насыщенным водH4′), 3.87–3.84 (м, 1Н, H5′), 3.79–3.76 (м, 1Н, H5′).
ным раствором NaHCO3 и наносили на колонку 
13C-ЯМР (DMSO-d6): 156.84 (C6), 153.60 (C2), 
(2 × 18 см) с Toyopearl DEAE-650M (HCO3
–151.32 (C4), 139.16 (д, J 5.3, C5′′), 136.08 (C8), 127.48 
форма). Элюировали градиентом концентрации 
(д, J 7.7, C2′′), 120,20 (д, J 5.5, C4′′), 116.78 (C5), 86.77 
ТЕАВ (0–0.3 М, 800 мл, скорость потока 7 мл/мин). 
 
(C1′), 83.57 (д, J 7.5, C4′), 73.02 (C2′), 70.45 (C3′), 64.85 
Фракции, содержавшие целевое соединение, объе(д, J 3.0, C5′).
диняли, упаривали, остатки триэтиламина удаля15N-ЯМР (DMSO-d6): 258.52 (N1′′), 248.66 (N7), 
ли соупариванием с этанолом (3 × 100 мл) и лиофи- 
194.09 (N3′′), 169.62 (N9).
лизировали. Выход 72 мг (0.11 ммоль, 57%). 
3′-О-Метилгуанозин-5′-монофосфат, триэтилВычислено для аниона C10H14N5O11P2 [M – H]– 
аммониевая соль (V). Суспензию 200 мг (0.67 ммоль) 
442.0171, найдено 442.0580.
3′-О-метилгуанозина в 5 мл триэтилфосфата охлаж- 
1Н-ЯМР (D2O): 8.07 (c, 1H, H8), 5.89 (д, J 6.1, 1H, 
дали до 0°С и при интенсивном перемешивании 
H1′), 4.72 (дд, J 5.4, 11.3, 1H, H2′), 4.49 (дд, J 3.6, 5.0, 
добавляли 0.3 мл (3.35 ммоль) POCl3. Инкубировали 
H3′), 4.31 (м, 4.32–4.30, H4′), 4.17 (м, 4.17–4.15, 2H, 
2 ч при 0°С, добавляли 10 мл воды, нейтрализовали 
H5′).
насыщенным водным раствором NaHCO3 и наносили 
13C-ЯМР (D2O): 158.97 (C6), 153.95 (C2), 151.78 
на колонку (3 × 17 см) с DEAE-Sephadex A-25 (HCO3
–(C4), 137.66 (C8), 116.22 (C5), 86.84 (C1′), 83.84 
форма). Элюировали градиентом концентрации 
(д, J 9.0, C4′), 73.74 (C2′), 70.41 (H4′), 65.11 (д, J 5.7, 
ТЕАВ (0.05–0.45 М, 1.4 л, скорость потока 7 мл/мин). 
C5′).
Фракции, содержавшие искомый продукт, объеди15N-ЯМР (D2O): 235.72 (N7), 167.93 (N9).
няли, упаривали, остатки триэтиламина удаляли 
P2-Имидазолид гуанозин-5′-дифосфата, трисоупариванием с этанолом (3 × 100 мл) и лиофиэтиламмониевая соль (IV). К суспензии 260 мг 
лизировали. Выход 266 мг (0.46 ммоль, 69%).
(0.40 ммоль) соединения (III) в 5 мл DMF при 
Вычислено для аниона C11H15N5O8P [M – H]– 
интенсивном перемешивании добавляли 136 мг 
376.0664, найдено 376.0588.
(2 ммоль) имидазола, 176 мг (0.8 ммоль) 2,2′-дитио- 
1Н-ЯМР (DMSO-d6): 7.93 (c, 1H, H8), 6.76 (c, 2H, 
дипиридина, 56 мкл (0.4 ммоль) триэтиламина и 
NH2), 5.69 (д, J 6.4, 1H, H1′), 4.65–4.63 (м, 1H, H2′), 
208 мг (0.8 ммоль) трифенилфосфина. Через 16 ч 
4.10–4.08 (м, 1H, H4′), 3.91–3.88 (м, 1H, H5′), 3.84–3.83 
высаживали при 0°С в 30 мл ацетона, содержавшего 
(м, 1H, H5′), 3.83–3.82 (м, 1H, H4′), 3.41 (c, 3H, O-CH3).
200 мг NaClO4. Центрифугировали при 5000 g, 
осадок промывали холодным ацетоном (3 × 15 мл) и 
13C-ЯМР (DMSO-d6): 157.14 (C6), 154.43 (C2), 
высушивали в вакууме. Выход 174 мг (73%). 
151.96 (C4), 136.95 (C8), 116.98 (C5), 86.81 (C1′), 
73.38 (C2′), 81.82 (C4′), 80.64 (C3′), 64.85 (д, J 5.2, 
 Вычислено для аниона C13H16N7O10P2 [M –H]– 
492,0439, найдено 492.0434.
C5′), 58.17 (OCH3).
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024

КАЮШИН и др.
8
(2 × 18 см) с Toyopearl DEAE-650M (HCO3
–-фор15N-ЯМР (DMSO-d6): 249.93 (N7), 169.22 (N9), 
ма). Элюировали градиентом концентрации ТЕАВ 
75.10 (NH2).
(0–0.3 М, 800 мл, скорость потока 5 мл/мин). Фрак- 
7,3′-О-Диметилгуанозин-5′-монофосфат, триции, содержавшие целевое соединение, объединяли, 
этиламмониевая соль (VI). К раствору 200 мг 
упаривали, остатки триэтиламина удаляли соупари- 
(0.35 ммоль) соединения (V) в 3.5 мл DMSO добав- 
ванием с этанолом (3 × 100 мл). Сухой остаток 
ляли 0.7 мл (12 ммоль) CH3I. Через 3 ч выливали в 
растворяли в 10 мл воды, наносили на колонку 
100 мл ледяной воды и экстрагировали эфиром до 
(1.5 × 12 см) с CM-Sephadex C-25 (Na+-форма) и 
исчезновения желтой окраски (5 × 50 мл). Водный 
элюировали водой (скорость потока 0.5 мл/мин). 
слой нейтрализовали насыщенным водным раствором 
Элюат лиофилизировали. Выход 165 мг (0.19 ммоль, 
NaHCO3 и наносили на колонку (2 × 18 см) с 
89%).
Toyopearl DEAE-650M (HCO3
–-форма). Элюировали 
градиентом концентрации ТЕАВ (0–0.2 М, 800 мл, 
Вычислено для аниона C22H30N10O18P3 [M – H]–
815.0958, найдено 815.0859.
скорость потока 5 мл/мин). Фракции, содержавшие 
целевое соединение, объединяли, упаривали, остатки 
1Н-ЯМР (D2O): 7.96 (с, 1Н, H8-G), 5.85 (д, J 4.1, 
триэтиламина удаляли соупариванием с этанолом 
1H, H1′-2mG), 5.76 (д, J 6.2, 1H, H1′-G), 4.68 (уш.сигн, 
(3 × 100 мл) и лиофилизировали. Выход 143 мг 
1Н, H2′-2mG), 4.66 (уш.сигн, 1Н, H2′-G), 4.44 (дд, J 3.6, 
(0.30 ммоль, 83%). 
5.2, 1H, H3′-G), 4.42–4.39 (м, 1Н, H4′- 2mG), 4.38–4.33 
(м, 1H, H5′- 2mG), 4.32–4.29 (м, 1H, H4′-G), 4.27–4.23 
Вычислено для C12H19N5O8P [M + H]+ 392.0971, 
(м, 1H, H5′-G), 4.21–4.20 (м, 1H, H5′- 2mG), 4.20–4.19 
найдено 392.0976.
(м, 1H, H5′-G), 4.10–4.08 (м, 1H, H3′- 2mG), 4.03 (с, 3H, 
1Н-ЯМР (DMSO-d6): 9.58 (c, 1H, H8), 7.50 (c, 2H, 
N-CH3), 3.45 (с, 3H, O-CH3).
NH2), 5.82 (уш.сигн, 1H, H1′), 4.66 (уш.сигн, 1H, H2′), 
4.16–4.15 (м, 1H, H4′), 4.04–4.02 (м, 1H, H5′; м, 1H, 
13C-ЯМР (D2O): 158.49 (C6-G), 137.53 (C8-G), 151.52 
(C4-G), 149.35 (C4- 2mG), 137.53 (C8-G), 136.34 (C8- 2mG), 
H4′), 4.00 (c, 3H, N-CH3), 3.84–3.83 (м, 1H, H5′), 3.37 
116.09 (C5-G), 108.02 (C5- 2mG), 89.68 (C1′- 2mG), 
(c, 3H, O-CH3).
86.75 (C1′-G), 83.78 (д, J 8.0, C4′-G), 82.40 (д, J 9.4, 
13C-ЯМР (DMSO-d6): 158.88 (C6), 149.80 (C4), 
C4′- 2mG), 78.57 (C3′- 2mG), 73.59 (C2′- 2mG), 73.53 
136.06 (C8), 107.74 (C5), 89.84 (C1′), 82.70 (д, J 7.6, 
(C2′-G), 70.33 (C3′-G), 65.46 (д, J 5.3, C5′-G), 64.81 
C4′), 78.80 (C3′), 73.45 (C2′), 62.96 (д, J 3.8, C5′), 58.07 
(C5′- 2mG), 58.05 (O-CH3), 36.09 (N-CH3).
(O-CH3), 35.92 (N-CH3).
15N-ЯМР (D2O): 236.72 (N7-G), 168.09 (N9-G), 
15N-ЯМР (DMSO-d6): 159.80 (N7).
160.95 (N7- 2mG).
Р1-Гуанозин-5′-Р3-(7,3′-О-диметилгуанозин-5′)31Р-ЯМР (D2O, 243 Мгц, относительно H3PO4): 
трифосфат (натриевая соль) (I). К суспензии соеди–11.35 (д, J 17.2, 1P, Р1 или Р3), –11.55 (д, J 18.4, 
нений (VI) (104 мг, 0.21 ммоль) и (IV) (111 мг, 
1P, Р3 или Р1), от –22.84 до –23.26 (м, 1P, Р2).
0.16 ммоль) в 3 мл DMF добавляли раствор 250 мг 
3′-О-Метил-5′-дезокси-5′-хлоргуанозин-2′(1.84 ммоль) ZnCl2 в 1 мл DMF. Через 16 ч прозрачный 
фосфат, триэтиламмониевая соль (VII). Суспензию 
раствор выливали в суспензию 800 мг (2.72 ммоль) 
100 мг (0.34 ммоль) 3′-О-метилгуанозина в 1 мл 
EDTA в 50 мл воды. Нейтрализовали насыщенным 
триэтилфосфата охлаждали до 0°С и при интенсивном 
водным раствором NaHCO3 и наносили на колонку 
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024

НОВЫЙ ПОДХОД К СИНТЕЗУ 2mGpppG
9
биоорганической химии для получения граммовых 
перемешивании добавляли 0.1 мл (1.02 ммоль) POCl3. 
количеств ARCA.
Через 3 ч отгоняли избыток POCl3, добавляли 3 мл 
насыщенного водного раствора NaHCO3, 50 мл воды 
ФОНДОВАЯ ПОДДЕРЖКА
и наносили на колонку (2 × 18 см) с Toyopearl DEAE650M (HCO3
–-форма). Элюировали градиентом 
Работа выполнена при финансовой поддержке Минис- 
терства образования и науки Российской Федерации в 
концентрации ТЕАВ (0–0.2 М, 800 мл, скорость 
рамках Соглашения 075-15-2021-1049.
потока 5 мл/мин). Фракции, содержавшие целевое 
соединение, объединяли, упаривали, остатки триэтилСОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ
амина удаляли соупариванием с этанолом (3 × 100 мл) 
и лиофилизировали. Выход 33 мг (0.06 ммоль, 18%).
Настоящая статья не содержит описания исследований с 
участием людей или использованием животных в качестве 
объектов исследования.
Вычислено для C11H16ClN5O7P [M + H]+ 396.0476, 
398.0446, найдено 396.0469, 398.0440.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ
1Н-ЯМР (DMSO-d6): 9.42 (уш. сигн, 1H, H1), 7.88 
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
(c, 1H, H8), 6.62 (c, 2H, NH2), 5.90 (д, J 5.4, 1H, H1′), 
5.12–5.09 (м, 1H, H2′), 4.18–4.16 (м, 1H, H3′), 4.12–4.09 
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
(м, 1H, H4′), 3.90–3.87 (м, 1H, H5′), 3.80–3.78 (м, 1H, 
 1.
Peng Z.-H., Sharma V., Scott F. Singleton S.F., Paul D. 
 
H5′), 3.47 (c, 3H, CH3).
Gershon P.D. // Org. Lett. 2002. V. 4. P. 161–164. 
13C-ЯМР (DMSO-d6): 156.70 (C6), 153.70(C2), 
https://doi.org/10.1021/ol0167715
151.27 (C4), 135.87 (C8), 116.60 (C5), 85.73 (д, J 5.0, 
 2.
Rydzik A.M., Lukaszewicz M., Zuberek J., Kowalska J., 
C1′), 81.46 (C4′), 79.15 (д, J 2.1, C3′), 73.49 (д, J 3.8, 
Darzynkiewicz Z.M., Darzynkiewicz E., Jemielity J. // 
C2′), 57.55 (CH3), 44.80 (C5′).
Org. Biomol. Chem. 2009. V. 7. P. 4763–4776. 
15N-ЯМР (DMSO-d6): 248.60 (N7), 168.35 (N9), 
https://doi.org/10.1039/B911347A
148.03 (N1), 74.32 (NH2).
 3.
Grudzien-Nogalska E., Stepinski J., Jemielity J., Zube- 
rek J., Stolarski R., Rhoads R.E, Darzynkiewicz E. // 
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Methods Enzymol. 2007. V. 431. P. 203–227. 
https://doi.org/10.1016/S0076-6879(07)31011-2
 4.
Stepinski J., Waddell C., Stolarski R., Darzynkiewicz E., 
Rhoads R.E. // RNA. 2001. V. 7. P. 1486–1495. 
 5.
Jemielity J., Fowler T., Zuberek J., Stepinski J., Lewdorowicz M., Niedzwiecka A., Stolarski R., Darzynkiewicz E., 
Rhoads R.E. // RNA. 2003. V. 9. P. 1108–1122. 
https://doi.org/10.1261/rna.5430403
 6.
Yoshikawa М., Kato T., Takenishi T. // Bull. Chem. Soc. Jap. 
1969. V. 42. P. 3505–3508.
Предложен новый вариант синтеза ARCA гуанозинового типа, метилированного по N7 и 3′-положениям 
гуанозина. Реализована схема конденсации 5′-моно- 
фосфата 7,3′-О-диметилгуанозина и 5′-дифосфата 
гуанозина, причем проводили активацию имидазолом 
именно 5′-дифосфата гуанозина. Определены условия фосфорилирования 3′-О-метилгуанозина, поз- 
воляющие избежать образования побочного 3′-О-ме- 
тил-5′-дезокси-5′-хлоргуанозин-2′-фосфата. ARCA 
синтезирован с высоким выходом (89% на стадии 
конденсации). 
 7.
Kadokura M., Wada T., Urashima C., Sekine M. // 
 
Tetrahedron Lett. 1997. V. 38. P. 8359–8362. 
https://doi.org/10.1016/S0040-4039(97)10263-5
Разработанный вариант синтеза ARCA легко мас- 
штабируется и может быть использован в практике 
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ          том 50          № 1          2024