Оценка качественных показателей спермы животных
Покупка
Новинка
Тематика:
Ветеринария
Год издания: 2023
Кол-во страниц: 25
Дополнительно
Вид издания:
Учебно-методическая литература
Уровень образования:
ВО - Бакалавриат
Артикул: 834811.01.99
Учебно-методическое пособие разработано по материалам авторов с использованием литературных источников и предназначено для ветеринарных специалистов, техников-биологов и студентов факультета ветеринарной медицины очной, очно-заочной (вечерней) и заочной формы обучения по специальности 36.05.01 - Ветеринария, 36.06.01 - Ветеринария и зоотехния (аспирантура).
Тематика:
ББК:
УДК:
ОКСО:
- ВО - Бакалавриат
- 36.03.01: Ветеринарно-санитарная экспертиза
- ВО - Специалитет
- 36.05.01: Ветеринария
ГРНТИ:
Скопировать запись
Фрагмент текстового слоя документа размещен для индексирующих роботов.
Для полноценной работы с документом, пожалуйста, перейдите в
ридер.
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ Баженова Н.Б., Племяшов К.В., Корочкина Е.А. ОЦЕНКА КАЧЕСТВЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СПЕРМЫ ЖИВОТНЫХ Учебно-методическое пособие Санкт-Петербург 2023
УДК 636.082.453.52 Баженова Н.Б. Оценка качественных показателей спермы животных : учебно-методическое пособие / Н.Б. Баженова, К.В. Племяшов, Е.А. Корочкина ; МСХ РФ, СПбГУВМ. – Санкт-Петербург : Изд-во СПбГУВМ, 2023. – 25 с. Учебно-методическое пособие разработано по материалам авторов с использованием литературных источников и предназначено для ветеринарных специалистов, техников-биологов и студентов факультета ветеринарной медицины очной, очно-заочной (вечерней) и заочной формы обучения по специальности 36.05.01 - Ветеринария, 36.06.01 - Ветеринария и зоотехния (аспирантура). Авторы: Баженова Н.Б., Племяшов К.В., Корочкина Е.А. Рецензент: профессор кафедры генетических и репродуктивных биотехнологий СПбГУВМ, д.в.н. Авдеенко В.С. Учебно-методическое пособие одобрено и рекомендовано к изданию и размещению в ЭИОС/ЭБС СПбГУВМ методическим советом Санкт-Петербургского государственного университета ветеринарной медицины, протокол № 8 от 30.10.2023г. © ФГБОУ ВО СПбГУВМ, 2023
ВВЕДЕНИЕ Как известно, фертильность сперматозоидов обусловлена морфологи ческими, биохимическими, физическими, биологическими свойствами и санитарными показателями спермы. Полученную от производителя сперму перед использованием всегда подвергают оценке. Это необходимо делать потому, что качество спермы не является строго постоянным, а подвергается часто резким изменениям в зависимости от изменений условий содержания, кормления производителя, ухода за ним, режима полового использования, состояния его здоровья и даже времени года. При искусственном осеменении исследованию подвергают каждый эякулят (количество спермы, полученной от самца во время одного полового акта) и каждую серию сохраняемой спермы (количество спермы, полученной после разбавления одного или нескольких смешанных и обработанных по одной технологии эякулятов). При естественном осеменении предпосылками для исследования спермы являются низкая оплодотворяемость и аборты у самок. Для всесторонней оценки качества спермы используют все наиболее распространенные методы исследования. Основными из них являются следующие: оценка качества спермы по внешним признакам, по густоте и активности (подвижности) сперматозоидов, определение концентрации сперматозоидов в эякуляте, определение процента живых и патологических форм сперматозоидов, определение интенсивности дыхания сперматозоидов, определение резистентности сперматозоидов. Каждый из методов, взятых в отдельности, не позволяет в полной мере оценить качество спермы и не может в достаточной степени характеризовать оплодотворяющую способность ее. Поэтому для оценки спермы применяют одновременно несколько методов и по результатам исследований составляют спермограмму, которая и служит критерием качества. Для суждения, в процессе регулярного использования производителя, о качестве эякулята и пригодности его для осеменения, ограничиваются оценкой спермы по внешним признакам, определения густоты и активности сперматозоидов, а для рационального разбавления спермы и правильной дозировки ее при осеменении самок проводят еще и определение концентрации и переживаемости сперматозоидов. Полное исследование качества спермы всеми методами необходимо проводить при постановке производителя на племпредприятие, а затем периодически, через каждые 10-15 дней, но не реже одного раза в месяц. По отклонениям показателей спермы от средней нормы судят о нару шении условий кормления и содержания производителя или режима полового использования его. Это дает возможность быстро определить и исправить допущенные погрешности и сохранить нормальную плодовитость
производителя на длительный срок. Для более глубокой оценки производителя и качества его спермы определяют содержание фруктозы в сперме, уровень дыхания, гликолиза, вычисляют фруктозный индекс, определяют рН, содержание молочной кислоты, ферментов, гиалуронидазную активность спермы, микробную загрязненность и т.д. Работу со спермой проводят в лаборатории при Т 18-23°С. Посуда и принадлежности, предназначенные для определения качества спермы должны быть чистыми, сухими и стерильными. Стеклянные палочки, мензурки, пипетки, флаконы, предметные стекла, пробирки до использования хранятся в термостате, установленном на 38°С, т.к. от соприкосновения с холодными предметами сперматозоиды могут погибнуть. СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ СПЕРМЫ Существует четыре основных способа получения спермы: 1. Влагалищный (сперму получают из влагалища самки в охоте после садки на нее производителя) 2. Уретральный (сперму получают из уретрального канала самца) 3. Хирургический 4. Получение спермы от производителей на искусственную вагину. Влагалищный способ получения спермы включает в себя: 1) собственно влагалищный Производителю давали естественную садку на здоровую кобылу в охоте, а затем извлекали сперму из влагалища шприцем, ложкой, при помощи влагалищного зеркала или рукой. 2) губочный способ Греческую губку при помощи корнцанга вводят во влагалище самки в охоте и допускают к ней производителя для садки. Затем губку извлекают и выжимают из нее сперму рукой или специальным прессом. Недостатки: значительные потери эякулята, загрязнение спермы, воз можность распространения возбудителей заразных заболеваний через сперму, возможность распространения возбудителей заразных заболеваний через сперму, опасность заражения производителя при половом контакте с больной самкой, необходимость иметь самок в охоте. Уретральный способ получения спермы: 1) способ мастурбации Сущность: механическое раздражение головки полового члена рукой через кожу препуция, в результате чего наступает рефлекс эякуляции и выделение спермы. Для получения спермы у собак и лисиц. 2) фистульный способ Способ получения спермы от жеребцов предложил Животков Х.И. Суть метода заключается в следующем: в промежность путем уретростомии делают фистулу мочеполового канала, открывающуюся на 10-12 см
ниже ануса. Во время садки жеребца на кобылу в охоте сперму получают через очищенную и продезинфицированную фистулу в подставленную посуду. Указанный способ практического применения не получил. 3) способ спермособирателя Сперму получают в резиновый мешок – спермособиратель. - путем введения спермособираетля во влагалище перед садкой - искусственная вагина. Для получения спермы от жеребцов используют также презерватив, который надевают на половой член перед садкой (Польша, В.Белянский) 4) способ массажа ампул семяпроводов. Предложил Миллер и Эванс (США). В прямую кишку на глубину 20-25 см вводят руку и освобождают кишку от содержимого. Осторожным прощупыванием находят ампулы семяпроводов и пузырьковидные железы (над шейкой мочевого пузыря), и поглаживают их спереди назад в течение 2-3 минут. Под влиянием массажа выделяется сперма. Эрекции полового члена обычно не бывает. Сперму собирают в чистый стаканчик, подставленный к заранее обработанному препуцию. Предварительно быка следует выдерживать возле коровы в охоте, чтобы в силу полового возбуждения ампуловидные расширения семяпроводов наполнились сперматозоидами из придатков семенников. 5) способ электроэякуляции Раздражение нервных волокон тазовой и пояснично – крестцовой областей электрическим током низкого напряжения и малой силы, в результате чего происходит эякуляция. Применяют биполярные электроды, которые вводят в прямую кишку быкам на глубину до 30 см, а баранам - до 7-15 см. для получения эякуляции у баранов применяют ток напряжением от 4 до 8 вольт при силе тока 1,5 – 2 мега ампер, а у быка – от 8-10 до 20 – 30 вольт и силе тока 500-700 мега ампер. Применяют в ряде случаев, когда от ценных производителей не удает ся получить сперму на искусственную вагину (большой вес, старость, болезни копыт, поражение суставов). Хирургический способ получения спермы - извлечение сперматозо идов из придатков семенников после кастрации или у убитого производителя. Отпрепарированные придатки измельчают, вымывают из них разбавителем сперматозоиды, оценивают их качество и осеменяют самок. В отдельных случаях у пушных зверей и диких животных сперматозоидов извлекают из хвоста придатка семенника путем прокола иглой, соединенной со шприцем. Получение спермы от производителей на искусственную вагину Искусственная вагина – это прибор, в котором искусственным путем создаются механические и термические раздражители нервных окончаний полового члена производителя, аналогичные имеющимся во влагалище самки, необходимые для вызывания рефлекса эякуляции.
Состав искусственной вагины: 1) цилиндр, или корпус Эбонитовый (для барана), из толстой резины (для быков и хряков), из оцинкованного железа или алюминия (для жеребцов), для хряка – цилиндр жестяной, двустенный, в цилиндре имеется патрубок с отверстием, через которое в вагину наливают воду и нагнетают воздух. 2) тонкостенная резиновая трубка – камера 3) резиновые кольца для закрепления камеры на цилиндре вагины (для быков, хряков, жеребцов). 4) эбонитовый краник для регулирования давления в вагине. 5) спермоприемник Для барана и быка – стеклянные одностенные и двустенные спермо приемники, для хряка – пластмассовые, или стеклянная банка емкостью 500 – 800 мл, для жеребца – вид широкого резинового стакана. 6) резиновый держатель спермоприемника имеется только в искус ственной вагине для быка. Сборка искусственной вагины включает в себя: 1) натягивание резиновой камеры на цилиндр 2) фиксация камеры на цилиндре резиновыми кольцами 3) присоединение краника к патрубку. ОЦЕНКА КАЧЕСТВА СПЕРМЫ ПО ВНЕШНИМ ПРИЗНАКАМ Этот метод позволяет судить о качестве данного эякулята и целесооб разности дальнейшего исследования спермы, а такой показатель, как объем эякулята необходим для последующего разбавления спермы. Материал и оборудование. Свежеполученная сперма в спермоприемнике, весы типа ВЛК-500 или Р-2-200, мерные цилиндры и мензурки объемом 10,50, 100 и 500 мл, марлевые салфетки (20х20 см). Определение объема эякулята. Объем эякулята барана и быка измеряется при помощи градуирован ных пипеток, шприца, специального смесителя. Можно определить объем эякулята взвешиванием на весах типа ВЛК-20, ВЛК-500, Р-2-200 (при асептическом методе получения спермы в одноразовый спермоприемник, зная заранее его массу). Один грамм взвешенного эякулята приравнивается к одному миллилитру. Для определения объема эякулята жеребца, полученную сперму из спермоприемника отделяют от секрета пузырьковидных желез с помощью стерильного марлевого фильтра, в теплый (30°С) стерильный мерный ци
линдр или мензурку. Тягучий секрет остается на фильтре. Подобным образом измеряют и объем эякулята хряка. Слизистые зерна секрета луковичных желез остаются на марлевом фильтре, которым закрывают горловину спермоприемника. Если эякулят от самцов получают в спермоприемник с делениями, то объем устанавливают по шкале его градуировки. У одних и тех же животных объем эякулята, как и другие показатели спермы, может изменяться в зависимости от режима использования, условий кормления и содержания. При больших нарушениях в кормлении и эксплуатации производителей объем эякулята может снижаться до минимально допустимого (олигосперматизм) При глубоких поражениях половых органов, а также в результате рефлекторной задержки эякуляции (при болевых ощущениях в области конечностей, таза, поясницы) сперма может не выделяться совсем (асперматизм). Это наблюдается также при спастических сокращениях выводных протоков половых органов. Таблица 1 Объем эякулята у производителей (в мл.) Производители Минимальный Средний Максимальный Баран 0,6 1-1,5 3-4 Бык 1,5 4-6 10-15 Хряк 150 250-350 600-1000 Жеребец 40 60-80 200-300 _________________________________________________________________ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦВЕТА СПЕРМЫ Цвет спермы зависит от видовых особенностей, а также от насыщен ности эякулята сперматозоидами. Нормальная сперма барана – белая, с желтоватым оттенком, быка – чаще белая, иногда с желтоватым оттенком, хряка и жеребца – серовато-белая (напоминает цвет сильно разбавленного молока). Красноватая окраска эякулята свидетельствует о примеси крови, по павшей в сперму, в результате свежей травмы половых органов. Присутствие в эякуляте беловатых хлопьев означает обычно воспаление пузырьковидных желез. Бурый цвет спермы указывает на наличие в ней гноя, а желтый – на примесь мочи. Различные примеси в сперме снижают ее качество, и такая сперма к использованию не допускается. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЗАПАХА СПЕРМЫ Сперма, если она нормальная, обычно запаха не имеет. При непра вильном содержании и уходе за животными сперма приобретает запах
жиропота или специфический запах данного вида животного. Наличие неприятного, гнилостного запаха указывает на воспалительный процесс в половых органах производителя. Такая сперма не пригодна для осеменения самок. Определение запаха спермы производится сразу же после получения эякулята, когда она находится еще в спермоприемнике. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНСИСТЕНЦИИ СПЕРМЫ Консистенция спермы зависит главным образом от насыщенности ее сперматозоидами. Нормальная сперма барана по консистенции похожа на сливки или сметану, сперма быка – на молоко, сперма хряка и жеребца имеет слизисто-водянистую консистенцию (после фильтрации слизистого секрета пузырьковидных желез спермы жеребца и студенисто-клейких зерен луковичных желез хряка). Определение консистенции спермы производится также сразу после получения эякулята. При значительных отклонениях от нормального показателя внешних признаков спермы, ее бракуют, а производителя направляют на тщательное клиническое обследование. ОЦЕНКА КАЧЕСТВА СПЕРМЫ ПО ГУСТОТЕ И АКТИВНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ Этот метод оценки спермы является одним из важнейших и доступных в практике. Глазомерная оценка довольно субъективна, однако у высококвалифицированных специалистов является надежной гарантией использования спермы только хорошего качества. Материал и оборудование. Свежеполученная сперма, столик Морозова, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки, 1%-й раствор хлорида натрия. Густоту и активность сперматозоидов определяют при помощи микро скопа с увеличением в 80-400 раз. Густота спермы зависит от количества содержащихся в ней спермато зоидов. Для определения густоты используют свежеполученную сперму. На чистое, теплое предметное стекло наносят каплю исследуемой спермы и накрывают ее покровным стеклом. Стекло помещают на столик Морозова (Т 38-40°С) и исследуют под микроскопом (для оценки спермы применяют специальные термостаты, нагревательные столики с автоматической регуляцией или телевизионное устройство) в неярком освещении (полуприкрытой диафрагме и опущенном конденсоре).
По густоте, в зависимости от количества сперматозоидов, которые наблюдаются в поле зрения микроскопа, различают густую, среднюю и редкую сперму (рис.1). Густая сперма – все поле зрения микроскопа сплошь заполнено спер матозоидами с незначительными промежутками. В ней трудно различить движение отдельных сперматозоидов. Густую сперму условно обозначают буквой "Г". Сперма средней густоты – в поле зрения между отдельными сперма тозоидами наблюдаются промежутки, приблизительно равные длине одного сперматозоида. В такой сперме движение отдельных сперматозоидов хорошо различимо. Условно ее обозначают буквой "С". Редкая сперма – в поле зрения микроскопа промежутки между спер матозоидами допускают свободное их передвижение. Редкая сперма условно обозначается буквой "Р". Рис. 1. Иногда можно встретить сперму, когда в поле зрения совсем нет спер матозоидов или встречаются единичные сперматозоиды. Такое явление называется – аспермия. Обозначается буквой "А". Свежеполученная, неразбавленная сперма по густоте допускается со следующей оценкой: - для барана – только густая (Г), - для быка, хряка и жеребца – густая и средняя (Г и С). Сперма различных видов производителей значительно отличается по своей густоте. Баран, например, выделяет наиболее густую сперму по сравнению с другими производителями. Густота спермы хряка и жеребца приблизительно в 10 раз меньше, чем у барана. Несмотря на то, что понятие о густоте спермы для каждого вида животного различно, тем не менее, при глазомерной оценке густоты она имеет у всех производителей одинаковое значение.
Таблица 2 Содержание сперматозоидов в различной по густоте сперме производителей (млрд. в 1 мл) ________________________________________________________________ Производители Густая Средняя Редкая Баран более 2,0 1,0-2,0 менее 1,0 Бык -"- 1,0 0,6-1,0 -"- 0,6 Жеребец -"- 0,25 0,15-0,25 -"- 0,15 Хряк -"- 0,2 0,1-0,2 -"- 0,1 Активность сперматозоидов оценивается глазомерно, в процентном количестве сперматозоидов с активным поступательным движением. Различают следующие виды движения сперматозоидов: прямолинейно поступательное (нормальное), манежное, колебательное. Кроме того, сперматозоиды могут быть неподвижными (акиноспермия). Прямолинейно-поступательное движение характеризуется прямоли нейным перемещением их в поле зрения. Только такие сперматозоиды могут продвигаться в половых путях самки и обладают способностью оплодотворения (рис. 2). Рис. 2. Рис. 3. Манежное (круговое) движение характеризуется вращением сперма тозоидов по небольшому кругу, радиус которого приблизительно равен длине сперматозоида. Этот тип движения свидетельствует о неполноценности сперматозоида, когда закручен его хвост под влиянием изменения осмотического давления в сперме, о потере запаса энергетических веществ, дефектах его оболочки (рис.3). Колебательное движение характеризуется слабым движением сперма тозоида из стороны в сторону, слабым движением хвоста, не приводящим к его перемещению. Колебательное движение сперматозоидов указывает на то, что сперматозоиды накануне гибели или впадают в состояние анабиоза