Роль проточной цитофлуориметрии лимфоузлов в дифференциальной диагностике реактивных лимфаденитов и лимфопролиферативных заболеваний

ВЕСТНИК УДМУРТСКОГО УНИВЕРСИТЕТА

2013. Вып. 1
БИОЛОГИЯ. НАУКИ О ЗЕМЛЕ

Краткие сообщения

УДК 61.616(411)

Т.О. Толстолуцкая, А.Н. Суворов, В.Г. Сергеев, Э.Ф. Аглетдинов

РОЛЬ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ ЛИМФОУЗЛОВ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ 
ДИАГНОСТИКЕ РЕАКТИВНЫХ ЛИМФАДЕНИТОВ И ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ 
ЗАБОЛЕВАНИЙ

Показана актуальность исследования биоптатов лимфатических узлов методом проточной цитофлуориметрии 
для дифференциальной диагностики реактивных лимфаденитов и лимфопролиферативных заболеваний. Представлены результаты количественного исследования субпопуляций лимфоцитов при  неходжкинских злокачественных лимфомах, лимфоме Ходжкина и реактивных лимфаденитах.

Ключевые слова: проточная цитофлуориметрия, лимфоузлы, лимфопролиферативные заболевания.

Одним из наиболее трудных разделов онкоморфологии остается дифференциальная диагности
ка лимфом, что обусловлено значительной гетерогенностью опухолей лимфоидной ткани, многообразием вариантов в пределах одной нозологической единицы, в ряде случаев морфологической близостью нормальных и опухолевых лимфоцитов, а также сходством гистологических проявлений злокачественных и реактивных процессов в лимфоузлах [1]. 

В настоящее время классификация лимфопролиферативных заболеваний невозможна без ис
следования иммунофенотипа опухолевых клеток. Иммунологические маркеры клеток можно исследовать методами иммуноцитохимии, иммуногистохимии, лазерной проточной цитометрией. Иммуногистохимия является обязательным компонентом исследования лимфоузлов в диагностике лимфом, 
однако, этот метод имеет ряд ограничений: невозможность количественного выражения экспрессии 
антигена, длительное время исследования, некоторая субъективность анализа, ограниченная воспроизводимость (факторы, влияющие на обработку образца) [2]. По данным работ ряда зарубежных исследователей проточная цитометрия тонкоигольного аспирата лимфоузла под УЗИ-контролем обладает достаточно высокой чувствительностью и специфичностью при диагностике неходжкинских
лимфом, ниже диагностическая значимость при лимфоме Ходжкина и негематологических новообразованиях [2-7].

Целью исследования являлась разработка критериев дифференциальной диагностики реактив
ного лимфаденита, лимфомы Ходжкина и неходжкинских лимфом с использованием метода проточной цитофлуориметрии лимфоузлов. 

Материалы и методика исследования

За период 2010–2011 гг. в гематологической лаборатории БУЗ УР «Первая республиканская кли
ническая больница МЗ УР» выполнено иммунофенотипирование лимфоузлов у 53 пациентов с лимфаденопатией. Исследование проводили на 6-цветном проточном цитофлуориметре FACS CantoII c использованием широкой панели моноклональных антител производства BD. Биопсийный материал 
лимфатических узлов подвергали механической гомогенизации с последующим выделением клеточной 
суспензии опухолевых клеток. Концентрацию опухолевых клеток в суспензии доводили до 105-106 в мл, 
по 100 мкл суспензии вносили в пробирки, добавляли по 20 мкл меченых мышиных моноклональных 
антител. Инкубировали 15 мин. Ресуспензировали в 0,5 мл PBS, анализировали на проточном цитофлуориметре с помощью программы FACSDiva. Всем пациентам параллельно выполнялось цитологическое, гистологическое и иммуногистохимическое исследование биопсийного материала лимфоузлов.

Распределение пациентов по нозологическим формам представлено в таблице.
Среди пациентов с В-клеточными неходжкинскими лимфомами хронический лимфолейкоз /

лимфома из малых лимфоцитов выявлена у 8 пациентов, лимфома зоны мантии – у 3, В-пролимфоцитарный лейкоз – у 1, фолликулярная лимфома – у 1, диффузная В-клеточная крупноклеточная лимфома – у 1 пациента. В анализ данных не включены 4 пациента – 3 с негематологическими злокачественными новообразованиями и 1 с TNK-клеточной лимфомой из-за маленького объема выборки.