Микробиология. Практикум

МИКРОБИОЛОГИЯ

ПРАКТИКУМ

Н.Н. МИНИНА

Москва 
ИНФРА-М 

2025

УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ

УДК 579+663(075.8)
ББК 28.4:52.6я73
 
М61

Минина Н.Н.

М61  
Микробиология. Практикум : учебное пособие / Н.Н. Мининa. — 

Москва : ИНФРА-М, 2025. — 381 с. — (Высшее образование). — DOI 
10.12737/1938076.

ISBN 978-5-16-018245-2 (print)
ISBN 978-5-16-111255-7 (online)
В учебном пособии описаны структура микробиологической лаборатории, 

основные требования к помещениям и оборудованию, типы защитных костюмов для персонала, общие требования охраны труда перед началом, во время 
и по окончании работ. Рассмотрены основные мероприятия, проводимые при 
локализации аварийных ситуаций в лаборатории; даны общие сведения по правилам работы и уборки помещений лаборатории; представлены основные средства и методы дезинфекции; перечислены требования к проведению зоологической и энтомологической работы; приведены контроль качества всех систем 
лаборатории, питательных сред и реактивов, а также способы обработки и обеззараживания материалов при проведении серологических и геннодиагностических исследований. Приведены список патогенных биологических агентов 
по группам патогенности и режимы обеззараживания объектов, зараженных 
патогенными микроорганизмами согласно СанПиН 3.3686–21.

В результате изучения курса микробиологии студенты получат знания 

о био логическом разнообразии, научатся проводить наблюдения за микроорганизмами, приобретут навыки культивирования и идентификации микроорганизмов.

Соответствует требованиям федеральных государственных образователь
ных стандартов последнего поколения.

Предназначено для студентов бакалавриата направления подготовки 

06.03.01 «Биология», а также будет интересен магистрантам, аспирантам, преподавателям и научным сотрудникам, которые занимаются исследованиями 
в области микробиологии, иммунологии и санитарной микробиологии.

УДК 579+663(075.8)

ББК 28.4:52.6я73

Р е ц е н з е н т ы:

Кутлин Н.Г., доктор биологических наук, профессор, профессор 

кафедры биологии, экологии и химии Бирского филиала Уфимского 
университета науки и технологий;

Жуков Н.Н., кандидат биологических наук, доцент, доцент кафедры 

биологии и технологий живых систем Тульского государственного 
педагогического университета имени Л.Н. Толстого

ISBN 978-5-16-018245-2 (print)
ISBN 978-5-16-111255-7 (online)
© Минина Н.Н., 2024

Данная книга доступна в цветном  исполнении  

в электронно-библиотечной системе Znanium

Предисловие

Практикум «Микробиология» подготовлен для обучения специа
листов с учетом требований программы ФГОС ВО по направлению 
06.03.01«Биология». Он может быть использован для изучения теоретического материала, подготовки к лабораторным занятиям и экзаменам.

Предлагаемый практикум позволит студентам ознакомиться:

 
• со структурой микробиологической лаборатории;

 
• с основными требованиями к помещениям и оборудованию;

 
• с типами защитных костюмов для персонала и правилами их на
девания и снятия;

 
• с общими требованиями охраны труда перед началом, во время 

и по окончании работ;

 
• с основными мероприятиями, проводимыми при локализации 

аварийных ситуаций в лаборатории;

 
• с общими сведениями по правилам работы и уборки помещений 

лаборатории;

 
• с основными средствами и методами дезинфекции;

 
• с требованиями к проведению зоологической и энтомологиче
ской работы;

 
• с контролем качества всех систем лаборатории, питательных 

сред и реактивов;

 
• со способами обработки и обеззараживания материала при про
ведении серологических и геннодиагностических исследований.
Практикум составлен в классическом стиле, для наглядности 

снабжен иллюстрациями (в виде цветных и черно-белых фотографий). После каждой главы приводятся контрольные вопросы 
и задания, позволяющие закрепить изученный материал. Практикум 
поможет удовлетворить запросы студентов, аспирантов, преподавателей и научных сотрудников — всех, кому он адресован.

В результате освоения практикума студент должен:
знать

 
• основные требования к помещениям и оборудованию;

 
• типы защитных костюмов для персонала и правила их наде
вания и снятия;

 
• общие требования охраны труда перед началом, во время 

и по окончании работ;

 
• основные мероприятия, проводимые при локализации ава
рийных ситуаций в лаборатории;

• общие сведения по правилам работы и уборке помещений лабо
ратории;

 
• основные средства и методы дезинфекции помещений лабора
тории и оборудования;

 
• требования к проведению зоологической и энтомологической 

работы;

 
• особенности контроля качества всех систем лаборатории, пита
тельных сред и реактивов;

 
• способы обработки и обеззараживания материала при прове
дении серологических и геннодиагностических исследований;

 
• лабораторное оборудование;

 
• строение и виды микроскопов;

 
• особенности дезинфекции и стерилизации;

 
• способы приготовления препаратов микроорганизмов разных 

видов;

 
• способы окраски микропрепаратов;

 
• виды питательных сред;

 
• особенности культивирования бактерий и выделения чистых 

культур;

 
• физиолого-биохимические признаки бактерий;

уметь

 
• проводить исследования в микробиологической лаборатории;

 
• определять тип защитной одежды для работы в лаборатории;

 
• надевать и снимать защитную одежду;

 
• использовать основные средства и методы дезинфекции для 

уборки лаборатории;

 
• проводить зоологическую и энтомологическую работу;

 
• контролировать качество воды, питательных сред и реактивов;

 
• использовать лабораторное оборудование для проведения ис
следований;

 
• работать с разными видами микроскопов;

 
• проводить работы по дезинфекции и стерилизации;

 
• изготавливать препараты микроорганизмов разных видов;

 
• окрашивать микропрепараты;

 
• готовить питательные среды;

 
• культивировать бактерии и выделять чистые культуры;

владеть

 
• способами дезинфекции в микробиологической лаборатории;

 
• методами безопасной работы в микробиологической лабора
тории;

 
• навыками контроля качества микробиологических исследо
ваний;

• навыками эксплуатации лабораторного оборудования и микро
скопов;

 
• методами дезинфекции и стерилизации;

 
• навыками приготовления препаратов микроорганизмов разных 

видов;

 
• навыками окраски микропрепаратов;

 
• навыками приготовления различных видов питательных сред;

 
• навыками культивирования бактерий и выделения чистых 

культур;

 
• методами изучения физиолого-биохимических признаков бак
терий.

Глава 1.  

СТРУКТУРА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ 

ЛАБОРАТОРИИ

1.1. ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

В соответствии с типами микроорганизмов, которые изучаются 

в лабораториях, выделяются вирусологические, микологические, 
бактериологические и протозоологические лаборатории.

Объекты изучения микробиологических лабораторий — пато
генные биологические агенты (ПБА) — это патогенные для человека 
микроорганизмы (грибы, вирусы, простейшие, бактерии), модифицированные генно-инженерным способом микроорганизмы, токсины 
биологического происхождения (биологические яды), гельминты, 
а также биологический материал организма человека (включая биологические жидкости, кровь и экскременты человека), подозрительный 
на содержание ПБА.

Микробиологические лаборатории в зависимости от выполняемых 

исследований подразделяются на научно-исследовательские, диагностические и производственные.

С возбудителями инфекционных заболеваний можно работать 

только в специализированных лабораториях, которые обеспечивают 
безопасность работы ее персонала и невозможность выхода за пределы лаборатории патогенных микроорганизмов.

1.2. ГРУППЫ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Работа в микробиологической лаборатории требует соблюдения 

специальных правил, так как исследования проводят с использованием заразного материала от экспериментальных и больных животных, а также культур патогенных микроорганизмов. Соблюдение 
данных правил необходимо для обеспечения не только личной безопасности сотрудников лаборатории, но и безопасности всех окружающих.

Регламентация условий работы с возбудителями инфекционных 

заболеваний производится в соответствии со степенью опасности 
микроорганизма для человека.

В России приняты Санитарные правила, которые устанавливают 

требования к организационным и санитарно-противоэпидемическим 

(профилактическим) мероприятиям, направленным на обеспечение 
личной и общественной безопасности, защиту окружающей среды 
при работе с патогенными биологическими агентами (утвержденные 
постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2021 № 4 «Об утверждении Санитарных 
правила и норм СанПин 3.3686–21 “Санитарно-эпидемиологические 
требования по профилактике инфекционных болезней”».) Данные 
по ПБА по группам патогенности приведены в приложении 1.

Микроорганизмы по степени опасности возможного заражения 

работающих с ними лиц подразделяются на четыре группы согласно 
классификации, действующей на территории Российской Федерации.

Группа I: возбудители особо опасных инфекций. Возбудители 

чумы, геморрагических лихорадок Эбола и Марбург (филовирусы), 
Ласса, Хунин, Мачупо, Себиа, Гуанарит (аренавирусы), натуральной 
оспы человека и обезьян (поксвирусы).

Группа II: возбудители высококонтагиозных бактериальных гриб
ковых и вирусных инфекций (сибирская язва, холера, бластомикоз, 
лихорадка Скалистых гор, сыпной тиф, бешенство, туляремия, бруцеллез, гистоплазмоз, сап, Ку-лихорадка, кокцидиоидоз, ВИЧ, гепатиты В, С, D, клещевой энцефалит, губчатая энцефалопатия крупного 
рогатого скота («коровье бешенство»), орнитоз и др.). В эту группу 
также включен ботулотоксин (но не сам возбудитель ботулизма).

Группа III: возбудители бактериальных грибковых, вирусных 

и протозойных инфекций, выделенные в отдельные нозологические 
формы (возбудители коклюша, столбняка, ботулизма, туберкулеза, 
кандидоза, малярии, лейшманиоза, гриппа, дифтерии, лепры, возвратного тифа, полиомиелита, брюшного тифа, дизентерии, некоторых 
микозов, гриппа, полиомиелита, гепатитов А, Е, хламидиозов (трахомы, урогенитального хламидиоза, пневмонии) и др.). В эту группу 
также включены аттенуированные штаммы бактерий групп I, II и III.

Группа IV: возбудители бактериальных, вирусных, грибковых 

септицемий, менингитов, пневмоний, энтеритов, токсикоинфекций 
и острых отравлений, а также возбудители анаэробных газовых инфекций, синегнойной инфекции, аспергиллеза, амебиаза, конъюнктивитов, аденовирусы, острых респираторных вирусных заболеваний 
(ОРВИ), герпес-вирусы септицемии, кандидозов; микробы — показатели санитарного состояния объектов окружающей среды и др.

Работа с особо опасными микроорганизмами обязательно регла
ментируется специальной инструкцией и проводится в режимной 
лаборатории.

Работа с возбудителями III и IV групп проводится в соответствии 

с правилами техники безопасности, устройства производственной 

санитарии в лабораториях санитарно-эпидемиологических станций 
и других микробиологических лабораториях.

Однако классификация, принятая в США, Японии, Канаде, 

а также используемая Всемирной организацией здравоохранения 
(ВОЗ), отличается от принятой в России обратным порядком:  
к IV группе у них отнесены микроорганизмы наиболее высокой степени патогенности.

Группа риска I: отсутствует или низкая индивидуальная и об
щественная опасность. Относятся микроорганизмы, которые потенциально не являются возбудителями заболеваний животных или 
человека.

Группа риска II: умеренная индивидуальная опасность и низкая 

общественная опасность. Входят патогенные микроорганизмы, 
которые могут вызвать заболевания, но не представляют собой серьезного риска для населения, персонала лаборатории, домашних 
животных или окружающей среды. Неосторожность в лаборатории 
может вызвать отдельную инфекцию, но существуют доступные 
профилактические и лечебные меры. Риск распространения весьма 
ограничен.

Группа риска III: характерен высокий индивидуальный и низкий 

общественный риск. Патогенные агенты, которые обычно вызывают 
серьезные заболевания человека или животных, но, как правило, 
не распространяются от больного человека или животного к здоровому. Существуют достаточно эффективные лечебно-профилактические процедуры.

Группа риска IV: высокий индивидуальный и общественный 

риск. Патогенные агенты вызывают обычно серьезные заболевания 
у человека или животных и легко распространяются опосредованно 
или от больного к здоровому. Эффективных мер против заболеваний 
в большинстве случаев не существует.

1.3. ВИДЫ РАБОТ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ

Все виды работ, проводимых в микробиологических лаборато
риях, необходимо проводить с соблюдением особых требований, 
в связи с тем, что разные типы исследований проводятся с инфицированным материалом от больных или экспериментальных животных, и отдельных культур болезнетворных микроорганизмов. 
Неукоснительное соблюдение данных требований важно не только 
для обеспечения личной безопасности персонала в лабораториях, 
но и для полной безопасности окружающих людей.

Регламентация правил проведения исследований с возбудителями 

любого инфекционного заболевания должна производиться в зависимости от степени опасности видов микроорганизмов для людей.

В Российской Федерации действуют Санитарные правила, уста
навливающие порядок проведения организационных и санитарнопротивоэпидемических (профилактических) действий, направленных 
на формирование общественной и личной безопасности, а также 
на защиту элементов окружающей среды при исследовании патогенных биологических агентов (СП 3.3686–21).

Данные Санитарные правила имеют комплекс обязательных тре
бований:

 
• к проводимым организационным, профилактическим, в том 

числе лечебно-профилактическим, санитарно-противоэпидемическим, лабораторно-диагностическим мероприятиям, направленным на обеспечение как раннего выявления, так и предупреждения возникновения или распространения опасных инфекционных болезней по территории России;

 
• к комплексу организационных, санитарно-противоэпидеми
ческих (профилактических), инженерно-технических мероприятий, которые направлены на личную и общественную безопасность, способствует защите объектов окружающей среды 
при работе в лаборатории с вирусами, микроорганизмами, прионами, токсинами биологического происхождения или другими 
биологическими агентами, которые могут быть созданы при генетических манипуляциях, с применением методов синтетической биологии и других видов деятельности, способные вызвать 
патологический процесс организма человека или животного, 
и также группа биологических материалов, содержащих патогены:

 
• к особенностям способов хранения, учета, передачи или тран
спортировки ПБА и объектов (материалов), которые содержат 
ПБА или подозрительны на их содержание.
Эти Санитарные правила регламентируют проведение работ в ла
бораториях с использованием ПБА либо с использованием материалов и объектов, которые содержат ПБА или подозрительны на их 
содержание:

1) диагностика объектов абиотической и биотической природы 

для индикации ПБА в целях определения биологической природы 
микроорганизма; установления, детекции нуклеиновых кислот, об

наружения антител или антигенов к патогену; выделения и идентификации агентов;

2) экспериментальные исследования, включающие действия 

на разных уровнях (молекулярный, клеточный) по созданию модифицированных и в том числе генно-инженерно-модифицированных 
типов агентов с применением микроорганизмов или продуктов их 
микробного синтеза, прионов, ядов и токсинов биологического происхождения.

К таковым исследованиям относятся:

 
• микробиологические и вирусологические (также использование 

животных);

 
• аэробиологические;

 
• биотехнологиеские, а также генно-инженерные;

3) деятельность, включающая производство иммунобиологиче
ских средств, таких как вакцины, сыворотки, иммуноглобулины, 
диагностические тест-системы, и другой продукциии с применением 
микроорганизмов или продуктов их синтеза);

4) действия по обеззараживанию материалов, содержащих или 

подозрительных на содержание ПБА (для организаций, осуществляющих методы централизованного химического и (или) физического обеззараживания объектов, которые содержат ПБА или 
подозрительных на их содержание);

5) зоолого-энтомологические исследования, включающие сбор 

зоолого-паразитологических материалов, объектов природной среды 
на территориях эндемичных по природно-очаговым инфекциям, 
а также транспортировка этих материалов; содержание в вивариях 
членистоногих и диких позвоночных животных;

6) работы, которые связаны с забором любого биологического 

материала людей и животных, который содержит ПБА или подозрителен на их содержание, а также патологоанатомические исследования трупов людей и павших животных при проведении исследований на обнаружение и идентификацию ПБА;

7) деятельность, связанная с хранением, передачей, транспорти
ровкой ПБА, относящихся к I–IVгруппам патогенности (коллекционные виды деятельности);

8) другие виды деятельности, которые связаны с применением 

ПБА или материалов и объектов, содержащих ПБА или подозрительных на их содержание.