Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные, 2014, № 4

ISSN 5181501959

сельскохозяйственные
животные

4

2014 ÐÎÑÑÈÉÑÊÈÉ
ÂÅÒÅÐÈÍÀÐÍÛÉ
ÆÓÐÍÀË

Акушерство/гинекология/
биотехника размножения

Кормление

Микробиология

Морфология

Токсикология

Иммунология/паразитология

Физиология

Современные фармакои биопрепараты

РВЖ • СХЖ • № 4/2014
3

Генетика Ðîññèéñêèé 
Âåòåðèíàðíûé 
Æóðíàë
Russian Veterinary Journal
4/2014

Актуальная тема

Дюльгер Г.П., Храмцов В.В., Нежданов А.Г. 
Вспомогательные репродуктивные технологии 
в воспроизводстве крупного рогатого скота . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5

Оригинальные статьи

Кормление

Фомичев Ю.П., Гусев И.В., Сулима Н.Н., Шайахметов Б.Д., Пьянзина И.П.
Экологические аспекты производства коровьего молока . . . . . . . . . . . . . 10

Григорьева Д.А., Пронин В.В., Фролова Л.В.
Влияние селеноорганического препарата на динамику МТ 
и массы печени гусей китайской серой породы . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Микробиология

Гаврилин К.В.
Результаты мониторинга антибиотикорезистентности основных групп 
ихтиопатогенных бактерий за 2014 год . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

Морфология

Грозина А.А., Пронин В.В., Дюмин М.С. 
Морфологическая оценка стенки кишечника цыплят кросса 
«КОББ 500» на фоне применения антибиотика и пробиотика . . . . . . 16

Азарнова Т.О., Болгова М.И, Индюхова Е.Н., 
Зайцев С. Ю., Найденский М.С., Киселев А.Л., Антипов А.А. 
Использование хондропротекторов 
в промышленной инкубации яиц . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Токсикология

Акбаев Р.М. 
Результаты исследования органов и тканей кур 
с целью обнаружения синтетических пиретроидов после обработок 
препаратом на их основе в рекомендуемой и пятикратной дозе . . . . . 20

Иммунология/паразитология

Георгиу Х. 
Получение активных и специфических противобабезийных 
антигенов крупного рогатого скота . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

Физиология

Азарнова Т.О., Максимов В.И., Индюхова Е.Н., Зайцев С.Ю.
Влияние йодсодержащего препарата при обработке in ovo 
на качество цыплят суточного возраста . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

Максимов В.И., Староверова И.Н., Балакирев А.Н. 
Изменение минерального состава крови у стандартных норок 
в разные фазы постнатального онтогенеза . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

Современные фармако- и биопрепараты

Либерман Е.Л., Георгиу Х., Белименко В.В. 
Опыт применения Гамавита при лечении 
кровепаразитарных болезней северных оленей . . . . . . . . . . . . . . . . . 31

Лашин А.В., Савинкова Е., Глотов С. 
Применение вакцины Пулвак IB QX для профилактики 
инфекционного бронхита кур в промышленном птицеводстве  . . . . . 34

Кисс И., Палиа В., Фелфолди Б., Крейчи Р.
Сравнение эффективности различных вакцин против 
болезни Ауески свиней . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Статьи, опубликованные в 2014 году . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39

Vital topic

Dyulger G.P., Khramtsov V.V., Nezhdanov A.G. 
Аssisted Reproductive Techniques 
in Breeding of Cattle . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5

Original articles

Feeding

Fomichev U.P., Gusev I.V., Sulima N.N., Shayakhmtov B.D., Pyanzina I.P. 
Ecological Aspects of Dairy Production . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

Grigorieva D.A., Pronin V.V., Frolova L.V. 
Influence of the Selenorganic Preparation on the Dynamics 
of Body weight and Liver of Chinese Grey Geese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Microbiology

Gavrilin K.V.
Results of Monitoring of Antibiotic Resistance of Major Groups 
of Bacterial Fish Pathogens in 2014 year . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

Morphology

Grozina A.A., Pronin V.V., Dyumin M.S. 
Morphological Evaluation of the Intestinal Wall Cyicken Cross «COBB 500»
on the Background Use of Antibiotic and Probiotics . . . . . . . . . . . . . . . . 16

Azarnova T.O., Bolgova M.I., Indyukhova E.N., 
Zaitsev S.Yu., Naydensky M.S., Kiselev A.L., Antipov A.A. 
Use of Chondroprotective Preparation 
in Industrial Incubation of Eggs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Toxicology

Akbaev R.M. 
Results of Hens Organs and Tissues Research for the Purpose 
of the Synthetic Pyrethroids Detection after the Processings by Preparation
on their Basis in the Recommended and Fivefold Dose . . . . . . . . . . . . . . 20

Immunology/ Parasitology

Georgiou Ch.  
Producing of Highly Active 
and Highly Specific Аntibabesiosis Аntigens . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

Physiology

Azarnova T.O., Maximov V.I., Indyukhova Ye.N., Zaitsev S.Yu.
Influence of Iodine-containing Drug in the in ovo 
Treatment on the Quality of Day-old Chicks . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

Maхimov V.I., Starovierova I.N., Balakirev A.N. 
Change of Mineral Composition of Standart Mink Blood 
in Different Phases of Postnatal Ontogenesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

Modern pharmacological drugs & biopreparations

Liberman E.L., Georgiou Ch., Belimenko V.V. 
Experience of Application of Gamavit 
for Treatment of Blood Parasite Diseases of Reindeer . . . . . . . . . . . . . . . 31

Lashin A.V., Savinkova E., Glotov S.
Poulvac IB QX usage for prevention 
of the infectious bronchitis in poultry industry . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34

Kiss I., Palya V., Felfoldi B., Krejci R. 
Efficacy Сomparison of Live 
Aujesky Disease Vaccine in Pigs  . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Articles published in 2014 year . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39

Содержание/Contents

Научнопрактический журнал
Издается с марта 2005 г.

«Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные
животные» входит в Перечень ВАК ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть
опубликованы основные научные результаты диссертации
на соискание ученой степени доктора и кандидата наук
(по зоотехническим и ветеринарным специальностям,
по биологическим наукам)

Учредитель: Издательский дом «Логос Пресс»
Директор М.В. Быльков 
Руководитель проекта И.М. Шугурова, к.б.н.
Руководитель отдела маркетинга Е.В. Лебедева
Шефредактор Г.В. Богданова
Компьютерный дизайн Я.В. Быстрова

Адрес редакции: 127055, Москва, а/я 9
Email: rvj@logospress.ru, info@logospress.ru
Сайт: http://logospress.ru
Тел.: +7/495/2204816, факс: +7/495/6890575

Свидетельство о регистрации СМИ:
ПИ № ФС7757776 от 18.04.2014

Оформление подписки
Каталог «Почта россии» — 12594 (на год)

Воспроизведение материалов в любом виде, включая электронный, возможно только по письменному согласованию с издательством. Редакция не несет ответственности за содержание рекламных материалов.
Мнение редакции не всегда совпадает с мнением авторов статей 

Рукописи, принятые на рассмотрение, редакция не возвращает.

Согласно рекомендациям Роскомнадзора выпуск и распространение издания допускается без размещения знака информационной продукции.

Главный редактор
Ф.И. Василевич, докт. вет. наук, академик РАН, проф., ректор ФГБОУ МГАВМиБ

Выпускающий редактор
В.В. Ракитская (rakitskaya.vera@yandex.ru)

Редакционная коллегия
Н.А. Балакирев, докт. с.х. наук, академик РАН, проф., проректор по научной работе ФГБОУ
МГАВМиБ
Н.П. Буряков, докт. биол. наук, проф. декан факультета ВЗО и ДО РГАУ—МСХА 
им. К.А. Тимирязева
О.А. Верховский, докт. биол. наук, проф., президент АНО «НИИ ДПБ»
Н.А. Власов, докт. биол. наук, проф. (Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному
надзору)
Л.И. Грищенко, докт. вет. наук, эксперт в области ихтиопатологии, ФГБОУ МГАВМиБ
Н.В. Данилевская, докт. биол. наук, профессор, зав. кафедрой фармакологии и токсикологии
ФГБОУ МГАВМиБ
А.В.Жаров, докт. вет. наук, эксперт в области патологической анатомии (ФГБОУ МГАВМиБ)
С.Ю. Зайцев, докт. биол. наук, докт. хим. наук, проф., зав. кафедрой химии имени профессоров
С.И. Афонского, А.Г. Малахова (ФГБОУ МГАВМиБ)
В.И. Максимов, докт. биол. наук, проф. проректор Учебнометодического объединения вузов
РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии, эксперт в области физиологии (ФГБОУ
МГАВМиБ)
А.В. Пронин, докт. биол. наук, проф. (Минздрав РФ)
В.В. Пронин,докт. биол. наук, проф., зав. кафедрой морфологии, физиологии и ветсанэкспертизы
(Ивановская ГСХА имени академика Д.К. Беляева)
А.В. Санин, докт. биол. наук, проф., руководитель лаборатории клеточного иммунитета НИИЭМ
им. Н.Ф. Гамалеи
А.А. Сидорчук, докт. вет. наук, проф., зав. кафедрой эпизоотологии и инфекционных болезней
ФГБОУ МГАВМиБ
Г.В. Сноз, докт. вет. наук, проф., эксперт в области диагностики болезней и терапии животных
(ФГБОУ МГАВМиБ)
Л.Ф. Сотникова, докт. вет. наук, проф., эксперт в области офтальмологии, зав. кафедрой
биологии и патологии мелких домашних, лабораторных и экзотических животных ФГБОУ
МГАВМиБ
Ю.Н. Федоров, докт. биол. наук, эксперт в области иммунологии (ВАК Минобразования и
науки РФ, член бюро Отделения ветеринарной медицины РАН) 

Журнал выпускается при участии:
Учебнометодического объединения высших учебных заведений 
Российской Федерации по образованию 
в области зоотехники и ветеринарии

Федеральной службы по ветеринарному 
и фитосанитарному надзору 
(Россельхознадзор)

Департамента ветеринарии 
Министерства сельского хозяйства РФ

Ключевые слова: вспомогательные репродуктивные
технологии, ВТР, клонирование животных, преимплантационное определение пола зародыша, сексированная сперма, трансгенные животные, химеры
Сокращения: ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота,
КРС — крупный рогатый скот, ПЦР — полимеразная
цепная реакция, УФ — ультрафиолетовый, ЭКО —
экстракорпоральное оплодотворение

Успехи в области искусственного осеменения и трансплантации
зародышей животных создали условия для развития и внедрения
в клиническую практику новых вспомогательных репродуктивных
технологий, таких как сексирование спермы, преимплантационное определение пола зародышей, репродуктивное клонирование, создание химер и трансгенных животных.

Сексирование спермы
Сексированная сперма — это сперма производителей, разделенная по «ядерному» полу (носительству Х или Y хромосомы). Начиная с 2000 г. сексированную сперму достаточно
широко используют в практике воспроизводства КРС. Впервые теленок с применением свежеполученной сексированной спермы был получен 1997 г. [22], замороженно-оттаянной — в 1999 г., а теленок с использованием сексированных спермиев в процедуре ЭКО родился в 2006 г. [20].
Для сексирования спермы применяют лазерные высокоскоростные проточные цитометры, оборудованные
системой для электростатической сортировки клеток.

Принцип метода проточной цитометрии основан на регистрации флюоресценции и светорассеивания от каждого отдельного спермия, предварительно окрашенного ДНКспецифическим витальным красителем
(рис. 1). В проточной кварцевой кювете, за счет разницы давлений между анализируемым образцом спермы и обтекающей жидкостью, спермии вводятся в ламинарный поток (выстраиваются в цепочку один
за другим) и пересекают сфокусированный лазерный луч. Высокочувствительные детекторы регистрируют флюоресценцию и рассеянное излучение (боковое и прямое) каждой половой клетки. Световые
сигналы передаются в компьютер, где они усиливаются и преобразуются в электрические импульсы фотоумножительным устройством. Далее информация обрабатывается в цифровом режиме в виде гистограмм. По разности в интенсивности ДНКфлюоресценции (спермии быка, несущие Y–хромосому, содержат на 3,8 % меньше ДНК, чем спермии, несущие Ххромосому) компьютер в режиме реального времени идентифицирует гоносому анализируемой половой клетки.
Проходя сквозь заряжающее кольцо, капли, содержащие спермии с идентифицированными Хили Yхромосомами, заряжаются положительно или отрицательно; капли, содержащие неидентифицированные по гоносомам спермии, дебрис, клетки крови или покровного эпителия мочеполовых путей, — остаются нейтральными (этот процесс контролируется компьютером).
Проанализированные спермии пропускают через биметаллические
пластины с разной полярностью (электростатический сепаратор).
При прохождении между двумя электродами заряженные капли
со спермиями (соответственно их заряду) отклоняются в правую или
левую стороны и попадают в разные пробиркиколлекторы. Дрейф
незаряженных капелек жидкости не меняется и, таким образом, неидентифицированные половые и неполовые клетки также собираются в отдельную (среднюю) пробирку (коллектор отходов).

Вспомогательные репродуктивные
технологии в воспроизводстве 
крупного рогатого скота

УДК: 636.2.082.453

АКТУАЛЬНАЯ ТЕМА

РВЖ • СХЖ • № 4/2014
5

Г.П. Дюльгер1, доктор ветеринарных наук (dulger@timacad.ru), В.В. Храмцов1, доктор сельскохозяйственных наук,
А.Г. Нежданов2, доктор ветеринарных наук (vnivipat@mail.ru)

1 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Российский государственный аграрный университет —

МСХА имени К.А. Тимирязева» (Москва).

2 Государственное научное учреждение «Всероссийский научноисследовательский институт патологии, фармакологии и терапии» (Воронеж).
В статье даны научные обоснования современных вспомогательных репродуктивных технологий, достижения и
перспективы их применения в практике воспроизводства крупного рогатого скота. Эти технологии включают
в себя сексирование спермы, преимплантационное определение «ядерного» пола зародыша, клонирование животных,
получение химер и трансгенных животных.

Рис. 1. Схема сексирования спермы животных с применением метода
проточной цитометрии и системы электростатической сепарации половых
клеток (по P.J.H. Ball, A.R. Peters, 2004, в модификации авторов)

Проточная
кювета

Датчик
измерения
флюоресценции
боковой

Датчик
измерения
флюоресценции
прямой

Электорстатический
сепаратор

Заряжающее 
устройство

Блок
обработки

Лазер

Г.П. Дюльгер, В.В. Храмцов, А.Г. Нежданов

Сексирование спермы — процесс лицензированный
и очень медленный. От быка-производителя получают
два эякулята. После всесторонней и тщательной оценки качества полученного эякулята сперму разбавляют патентованной трисбуферной средой без желтка, содержащей антибиотики, добавляют ДНК-специфический витальный краситель и инкубируют при температуре 30 °С
в течение 30…45 мин и более. Фотоцитометрический анализ спермы проводят при температуре 18 °С. Скорость
сортировки половых клеток составляет примерно 10 млн
живых спермиев в час (каждого пола). Суммарный выход сексированных спермиев из эякулята достигает 36 %,
при чистоте отсортированной фракции 90 % [24].
Проходя через системы прибора, половые клетки подвергаются неблагоприятным воздействиям (лазерное
излучение, перепады давления, витальное окрашивание
и др.), что несколько снижает их жизнеспособность
и оплодотворяющую эффективность на выходе, по сравнению с исходным материалом и несексированной спермой (примерно на 20%).
Просортированную сперму отмывают и центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а концентрат спермиев разбавляют искусственной средой. Состав искусственной среды зависит от способа и срока хранения спермы.
Просексированную сперму после разбавления и кратковременного хранения используют для искусственного осеменения самок КРС, ЭКО яйцеклеток, созревших
в условиях in vivo или in vitro, либо замораживают 
в красных соломинках объемом 0,25 мл и кодируют.
При кратковременном хранении сексированной спермы в одной спермодозе должно содержаться не менее
1 млн, при замораживании — 2 млн жизнеспособных
спермиев.
Сексированную сперму рекомендуют использовать
для осеменения клинически здоровых, физиологически зрелых телок. Эффективность искусственного осеменения при использовании отсортированной спермы у
телок достигает примерно 45 %, у лактирующих молочных коров — 28 % [8]. При этом выход потомства желаемого пола при использовании Х-фракции сексированной спермы составляет 87,8 %, Y-фракции — 92,1 % [24].

Преимплантационная диагностика 
пола зародышей
Преимплантационное определение пола зародышей имеет важное практическое значение для репродукции как
человека, так и животных [1, 2].
В практическом животноводстве, и в частности, мясном и молочном скотоводстве, селекция зародышей по полу в рамках коммерческих программ по трансплантации
эмбрионов позволяет получать приплод предетерминированного пола. Например, в мясном скотоводстве экономически выгодно получать и откармливать на мясо бычков, а в молочном скотоводстве, наоборот, — избирательно получать и выращивать для ремонта молочного стада
племенных телочек. Благодаря селекции эмбриона по «ядерному» полу удается почти в два раза сократить потребность
в дорогостоящих реципиентах и тем самым существенно удешевить программы по пересадке эмбрионов [2].
В коммерческих программах по трансплантации зародышей КРС их селекцию по полу проводят посредством ПЦР, заключающейся в амплификации (многомиллионном увеличении числа копий) определенного

участка ДНК в условиях in vitro с помощью ферментативного синтеза [21]. Технику ПЦР открыл в 1983 г.
Кэрри Мюллис (Kary Mullis), за что был удостоен Нобелевской премии в области химии за 1993 г.
Определение пола основано на амплификации и идентификации фрагмента ДНК Y-хромосомы. Процедура исследования достаточно сложна, трудоемка и включает
в себя следующие процессы: биопсию эмбриона; получение вытяжки ДНК; коамплификацию сегмента ДНК, специфичного только для Y-хромосомы и фрагмента ДНК
контрольной аутосомальной хромосомы; сепарацию и
идентификацию полученных ПЦР-продуктов на электрофорезе в агарозном геле с бромидом этидия (рис. 2).
Преимплантационную диагностику пола бычьих эмбрионов проводят на стадии морулы или бластоцисты. Для
ПЦР-анализа достаточно получить методом микросекции
или аспирации 2…10 бластомеров. Биопсия преимплантационных зародышей осуществляется под контролем инверсионного или стереомикроскопа с помощью одного или
двух микроманипуляторов. Аспирация менее травматична, но технически более сложна и трудоемка, чем микросекция. К тому же при аспирации легче утратить клеточный материал для анализа. При наличии достаточного
опыта посредством микросекции за один час можно провести биопсию примерно 15 зародышей [5].
В отличие от дисекции биопсия зародышей на стадии
морулы и бластоцисты существенно не влияет на параметры их выживаемости в культуре клеток in vitro.
Показатель выживаемости для интактных, биопсированных и разделенных на половинки эмбрионов при
их культивировании в условиях in vitro в течение 24 ч
составляет, соответственно, 92,3 %, 86,3 % и 77,5 % [15].
Для экстракции ДНК биопсированные бластомеры инкубируют в специальной среде, обладающей цитолитической активностью (например, содержащей протеинкиназу К). Полученные экстракты ДНК переносят в реакционные пробирки. ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и
нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1 °С.

Реакция амплификации ДНК in vitro основана на способности молекул нуклеотидтрифосфатов в присутствии ДНКполимеразы при соответствующих условиях (рН, ионная сила раствора, температура)
образовывать на матрице (одноцепочной ДНК) комплементарную
цепь. Избирательное копирование требуемых участков ДНК (Yхромосомы и контрольной аутосомальной хромосомы) обеспечивается двумя парами праймеров. Каждый из пары праймеров комплементарен одной из цепей двухцепочной матрицы и ограничивает начало и конец амплифицируемого участка. После гибридизации матрицы с праймером, последний служит затравкой для ДНК
полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

6
РВЖ • СХЖ • № 4/2014

Рис. 2. Основные этапы преимплантационной диагностики пола зародышей

Биопсия эмбрионов
(посредством микросекции или аспирации бластомеров)

Коамплификация сегмента ДНК, специфичного только для 
Yхромосомы, и фрагмента ДНК контрольной аутосомальной хромосомы

Сепарация и идентификация полученных ПЦРпродуктов без применения
или с применением электорофореза в агарозном геле с бромидом этидия

Получение вытяжки ДНК из биопсированных бластомеров

Вспомогательные репродуктивные технологии в воспроизводстве 
крупного рогатого скота

Результаты ПЦР учитывают при помощи стандартного УФ-трансиллюминатора с использованием электрофореза в агарозном геле с бромидом этидия (электрофоретический метод) или непосредственно в реакционной пробирке (метод флюоресцентной детекции).
Продолжительность ПЦР-анализа составляет всего
1,5…2 ч [4, 23].
Успешность определения пола эмбрионов с помощью
ПЦР зависит от техники биопсии и количества взятого
для анализа клеточного материала, способа экстракции
ДНК и методики исследования. Информативность метода (эффективность распознавания пола эмбрионов от
числа исследованных образцов) достигает 90…95 %
[4, 17], а точность определения пола — 92…100 % [15,
17, 23, 25]. При использовании для ПЦР-анализа цельных эмбрионов и полуэмбрионов эффективность и точность определения пола достигает 100 % [15, 25].
Для коммерческого определения пола бычьих эмбрионов на основе ПЦР и электрофореза разработаны
тест-системы, например, с использованием двух пар
праймеров для амплификации участка ДНК Y-хромосомы, состоящего из 165 пар оснований и фрагмента
ДНК аутосомальной хромосомы размером 210 пар оснований (Alta Genetics Inc., Calgary, AB).
Хорошую перспективу для коммерциализации при определении «ядерного» пола преимплантационных зародышей имеет также тест-система Ampli-YTM, позволяющая
учитывать результаты ПЦР непосредственно в реакционной пробирке при помощи ДНК-специфического красителя бромида этидия. Для регистрации реакции также применяют стандартный УФ-трансиллюминатор. При положительном результате — амплификации сегмента Y-хромосомы — в реакционной пробирке отмечают эффект
розового свечения, при отрицательном флюоресценция
отсутствует. Недостаток тест-системы: анализ проводится без контрольной аутосомальной хромосомы. Тем не
менее, на большом материале показано, что точность определения пола при использовании данной тест-системы
составляет 95 % [13]. Эмбрионы с гетерогенным (мужским)
«ядерным» полом диагностируются точнее, чем зародыши
с гомогенным (женским): 98,7 % против 94,4 % [13].
Приживляемость биопсированных эмбрионов при
нехирургическом способе их пересадки достигает
53…71 % [5, 13, 23]. При комбинации биопсии с замораживанием и оттаиванием эмбрионов она в среднем
составляет 49,8 % [13] с колебаниями от 37 до 66 % [23].

Репродуктивное клонирование
В современной биотехнологии и репродуктологии термин
«клонирование» обозначает процесс получения биологической копии другого организма, обладающей абсолютно идентичной наследственностью. Разработаны две технологии клонирования организмов млекопитающих: а) путем переноса ядра неполовых (соматических) клеток донора (взрослого животного или зародыша) в лишенную ядра
(энуклеированную) яйцеклетку реципиента; б) посредством
разделения, или сплиттинга, эмбриона на две половинки.
Эру репродуктивного клонирования открыли работы
Роберта Бриггса (Rober Briggs) и Томаса Кинга (Thomas J.
King), которым в 1952 г. удалось методом переноса ядра недифференцированной эмбриональной клетки в энуклеированную (лишенную ядра) зрелую яйцеклетку клонировать 27 головастиков северной лягушки леопард.

Основные достижения в области клонирования 
эмбрионов и взрослых сельскохозяйственных 
и домашних животных
1984 г. — Steen Willadsen из ядра бластомера 8клеточного
зародыша клонировал овцу; 
1987 г. — Neal First, Randal Prather и Willard Eyestone из эмбриональных клеток клонировали двух телят (по кличке Fusion and
Copy); 
1996 г. — Ian Wilmut и Keith Campbell впервые из донорской
соматической клетки взрослого животного клонировали всемирно известную овцу Долли;
2000 г. — Julie Grisham сообщил о клонировании 5 поросят
(по кличке Millie, Christa, Alexis, Carrel, Dotcom) из соматической
клетки взрослой свиньи;
2001 г. — Mark Westhusin, Taeyoung Shin впервые клонировали кошку; в 2004 г. в США по коммерческому заказу получили клон 19летней кошки породы мейнкун (по кличке Litlle Nicky);
2003 г. — C. Galli et al. впервые получили клон мула и лошади;
2005 г. — B.C. Lee et al. получили клон собаки по кличке Snappy от кобеля породы афган;
2009 г. — Richard Spencer сообщил о клонировании в Саудовской Аравии верблюда;
2012 г. — Riaz Ahmad Shah et al. клонировали в Индии козу
пуховой породы.

Прикладное значение технологии клонирования заключается в возможности получения многочисленных
генетически идентичных копий высокопродуктивных
и трансгенных сельскохозяйственных животных.
Технология клонирования организмов млекопитающих сложна, трудо- и наукоемка и включает в себя
проведение следующих деликатных манипуляций: получение, культивирование и отбор донорских соматических клеток и синхронизация их клеточного цикла
(G0); получение, культивирование и отбор созревших
в условиях in vitro (лучше in vivo) донорских ооцитов в
фазе МII мейоза; удаление из ооцита полярного тельца и метафазной пластинки (энуклеация), окрашенных
витальными красителями; подсадка ядра соматической
клетки в ооплазму ооцита; слияние ооцита и соматической клетки с помощью электропорации (электрослияния) либо путем прямой микроинъекции ядра в
ооплазму ооцита; химическая активация дробления яйцеклетки в среде, содержащей иономицин/циклогексимид или иономицин/6-диметиламинопурин; культивирование эмбриона in vitro до стадии бластоцисты;
подсадка клонированного эмбриона гормонально синхронизированному реципиенту (рис. 3).
Источником соматических клеток могут служить
эпителиоциты молочных желез, яйценосного бугорка, маточных труб и матки, клетки (в основном фибробласты) кожи взрослых и новорожденных животных,
дифференцированные и недифференцированные эмбриональные клетки; незрелых ооцитов — яичники коров, полученные вскоре после их убоя.
Приживляемость, или эффективность пересадки,
клонированных эмбрионов КРС составляет примерно
50 %. Репродуктивные потери при вынашивании клонированных эмбрионов и плодов очень велики. После
успешной подсадки клонированных эмбрионов вынашивается и заканчивается физиологическими родами
только 5,6 % беременностей. Тем не менее, с использованием технологии переноса ядра соматической клет
РВЖ • СХЖ • № 4/2014
7

Г.П. Дюльгер, В.В. Храмцов, А.Г. Нежданов

ки в лишенную ядра зрелую яйцеклетку уже клонировано около 1,5 тыс. телят [18].
Итоговая эффективность метода — от этапа реконструирования ооцитов до рождения клона — составляет примерно 1…2 %.

Эмбриональный сплиттинг, 
или разделение зародышей
Эмбриональный сплиттинг на ранних стадиях развития (с помощью микрохирургии) впервые был разработан и успешно апробирован на овцах датчанином Стином Вилладсеном (Steen Willadsen) в 1979 г.
Сущность метода заключается в следующем. Зародыша на стадии развития в 60 клеток с помощью микроманипулятора и микроножа делят на две половинки,
которые помещают для дальнейшего развития в половые органы животного-реципиента. В результате данной операции получают двух генетически идентичных
животных. Этот метод позволяет получить не только
идентичных близнецов, но и преимплантационно определять пол зародышей.
В середине 80-х гг. прошлого столетия началось коммерческое применение этого метода в скотоводстве.
Приживляемость «полуэмбрионов» составляет 50,2 %.
В период с 1982 по 2006 гг. с применением метода эмбрионального сплиттинга только в США было получено
2664 теленка [14].

Создание химер
В современной биотехнологии термином «химеры» обозначают организмы, состоящие из генетически разнородных тканей, принадлежащих разным индивидуумам.
Впервые термин ввел в 1907 г. немецкий ботаник Ганс
Винклер (Hans Winkler, 1877…1945), назвав химерами
растения, полученные в результате прививки паслена
на черенок томата.
Технология получения межвидовых химерных организмов млекопитающих разработали в 1984 г. ученые Кэмбриджского университета — C.B. Fehilly, 
S.M. Willadsen, E.M. Tucker. Для создания химерного
существа (особи) на 6-е и 7-е сутки после оплодотворения от овец и коз авторы хирургическим путем вымывали бластоцисты. После ферментативного удаления
прозрачной оболочки внутреннюю клеточную массу из
бластоцист коз при помощи микроманипулятора они

вводили в бластоцисты овец. После подсадки 22 бластоцист 12 овцам–донорам от 9 из них получили приплод: 9 ягнят, одного козленка и два межвидовых 
химера. Химерные овце-козы на разных участках тела имели разный шерстный покров.
Получать химерные зародыши, пригодные для пересадки, можно также путем агрегации (слияния) под
одной прозрачной оболочкой двух полуэмбрионов от
разных родителей. По этой технологии созданы межпородные и межвидовые химеры КРС. В работе 
T.J. Williams et al. (1990) после пересадки 112 химерных
эмбрионов (Bos indicus х Bos taurus) развитие беременности диагностировали у 29 реципиентов, или 26 %.
У 24, или 83 %, из них беременность закончилась физиологическими родами, у 5, или 17 %, — абортом. При
этом две коровы принесли по два теленка, 22 — по одному. При родах одним плодом в 15 случаях родились
химеры.
В 1997 г. в экспериментальном хозяйстве ВИЖ родился бычок Ералаш, родителями которого стали 
4 донора: две коровы айрширской и черно-пестрой породы и два быка красной голштино-фризской и голландской черно-пестрой пород. Вымытые из двух стельных коров эмбрионы были разделены на половинки,
после чего пересажены в эмбрион, из которого удалили все содержимое. После пересадки эмбриона родился бычок- химер бело-красно-чёрной окраски.

Получение трансгенных животных
Трансгенные животные — это экспериментально полученные животные, содержащие во всех клетках своего
организма дополнительную, интегрированную с хромосомами и экспрессирующуюся чужеродную ДНК (трансген), которая передается по наследству по законам Менделя. Искусственный перенос генов из одной биологической системы в другую с целью получения трансгенных организмов называют трансгенозом.
Первые трансгенные животные были получены 
в 1974 г. Рудольфом Янишем (Rudolf Jaenisch) в результате инъекции в эмбрион мыши ДНК вируса обезьяны SV40. В России в 1987 г. академик Л.К. Эрнст и соавторы сообщили о рождении трансгенных кроликов,
содержащих ген поверхностного антигена вируса гепатита В человека.
В настоящее время для переноса и встраивания генов одних организмов в клетки организмов других видов применяют следующие методики: опосредованный
ретровирусами перенос генов; метод микроинъекции
ДНК; перенос трансформированных ядер генеративных
и соматических клеток; использование спермиев и спермиогониев как переносчиков ДНК.
Метод микроинъекций ДНК в пронуклеус оплодотворенной яйцеклетки является основным. Его разработали американские исследователи — J.W. Gordon 
et al. (1980). Первые трансгенные кролики, овцы и свиньи
с применением данной методики были получены в 1985
г. [12], коровы — в 1998 г. [7].
Технология получения трансгенных животных с использованием метода микроинъекции ДНК в пронуклеус зиготы включает в себя следующие процессы:
конструирование трансгена; отбор, подбор и спаривание родительских пар; получение и отбор зигот, содержащих пронуклеусы; микроинъекцию ДНК (транс
8
РВЖ • СХЖ • № 4/2014

Рис. 3. Схема репродуктивного клонирования животных посредством
переноса ядра соматической клетки в лишенную ядра зрелую яйцеклетку

Животное — донор ядер
соматических клеток

Получение клеток, их отбор,
культивирование и выравнивание
клеточного цикла

Получение, отбор,
культивирование 
и энуклеация ооцитов

Животное — 
донор яйцеклеток

Перенос ядра соматической клетки в лишенный ядра ооцит (электропортация)

Химическая активация дробления реконструированного зародыша

Культивирование зародыша в условиях in vitro до стадии морулы/бластоцисты

Пересадка зародыша самкереципиенту

Роды

Вспомогательные репродуктивные технологии в воспроизводстве 
крупного рогатого скота

гена) в мужской пронуклеус (по размеру он больше и
поэтому легче визуализируется, чем женский); культивирование реконструированных зигот в условиях in vitro до стадии преимплантационных зародышей; подсадку зародышей в половые органы самок-реципиентов для
их дальнейшего вынашивания; диагностику беременности и мониторинг ее течения; роды, получение приплода, идентификацию особей, экспресирующих трансген, и их выращивание (рис. 4).
В своей работе W.H. Eyestone (1999) сообщает, что
после процедуры микроинъекции ДНК в мужской пронуклеус только 6,3 % зигот КРС (2300/36500) при культивировании в лабораторных условиях развились до
стадии бластоцисты. После нехирургической пересадки 1472 преимплантационных зародышей 1324 самкам-реципиентам автор диагностировал развитие 
беременности у 28 % из них. Сохранность развившейся стельности составила 60 %. От коров с выношенной беременностью в общей сложности было получено 226 телят, из которых только 18, или 7,96 %
экспрессировали трансген (ген человеческого альфалактальбумина).
Итоговая эффективность трансгеноза очень низка:
от этапа микроинъекции ДНК в пронуклеус зиготы
до получения жизнеспособной особи, экспрессирующей трансген, она не превышает 1 %.
Трансгеноз — одна из самых дорогостоящих вспомогательных репродуктивных технологий. Подсчитано,
что расходы на получение одной трансгенной мыши достигают в среднем 121 доллара США, одной свиньи — 
25 тыс., овцы — 60 тыс., коровы — 546 тыс. долларов
США [26].

Приведенная характеристика существующих методов вспомогательной репродуктивной технологии свидетельствует о достаточно высокой эффективности и перспективности применения в практике воспроизводства КРС сексированной спермы
и эмбрионов, а также необходимости дальнейшего изучения
и совершенствования таких технологий, как репродуктивное
клонирование, получение трансгенных животных.

Б и б л и о г р а ф и я
1. Дюльгер, Г.П. Преимплантационная диагностика пола эмбрионов крупного рогатого
скота: учеб. пособие /. М.: Изд-во РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, 2010. — 22 с.
2. Дюльгер, Г.П. Преимплантационная диагностика пола эмбрионов крупного рогатого
скота. Определение пола зародышей методом ПЦР- и FISH-анализов / Г.П. Дюльгер,
П.Г. Дюльгер // Ветеринария сельскохозяйственных животных. — 2010. — №5. — 
С. 43–47.
3. Эрнст, Л.К. Получение трансгенных кроликов, содержащих ген поверхностного антигена
вируса гепатита B человека / Л.К. Эрнст, Г.П. Георгиев, Г.Н. Ениколопов, М.И. Прокофьев, В.И. Захарченко, Г.Г. Секирина // Вестник с.-х. науки. — 1987. — №9. — С. 68–73.
4. Bredbacka, P. Recent developments in embryo sexing and its feld application / P. Bredbacka
// Reprod. Nutr. Dev. — 1998. — V. 38. — P. 605–613.
5. Bredbaska P. Progress on methods of gene detection in preimplantation embryos / P. Bredbacka
// Theriogenology. — 2001. — V.55. — P. 23–34.
6. Briggs, R. Transplantation of living nuclei from blastula cells into enucleated frog’s eggs /
R. Briggs, T.J. King // Zoology. — 1952. — V. 38. — P. 455–463.
7. Cibelli, J.B. Transgenic bovine chimeric offspring produced from somatic cell-derived stem
like cells / J.B. Cibelli, S.L. Stice, P.L. Golueke et al. // Nat. Biotechnol. — 1998. — V.16. — 
P. 642–646.
8. De Vries A. Exploring the impact of sexed semen on the structure of the dairy industry/ De A.Vries,
M. Overton, J. Fetrow J. et al. // J. Dairy Sci. — 2008. — V. 91. — P. 847–856.
9. Eyestone, W.H. Production and breeding of transgenic cattle using in vitro embryo production
technology / W.H. Eyestone // Theriogenology. — 1999. — V. 51. — P. 509–517.
10. Fehilly, C.B. Interspesific chimerism between sheep and goat / C.B. Fehilly, S.M. Willadsen, E.M.
Turcker // Nature. — 1984. — V. 307. — P. 16–22.
11. Gordon, J.W. Genetic transformation of mouse embryos by microinjection of puried DNA / 
J.W. Gordon, G.A. Scangos, D.J. Plotkin et al. // Proc . Natl. Acad. Sci. USA. — 1980. — 
V. 77. — P. 7380–7384.
12. Hammer, R.E. Production of transgenic rabbits, sheep and pigs by microinjection/ R.E. Hammer, V.G. Pursel, C.E. Rexroad et al. // Nature. — 1985. — V. 315. — P. 680–683.

13. Hasler, J.F. Non-electrophoretic PCR-sexing of bovine embryos in a commercial environment / J.F. Hasler, E. Cardey, J.E. Stokes, P. Bredbaska // Theriogenology. — 2002. — 
V. 58. — P. 1457–1469.
14. Hasler J.F. Embryo Transfer and In Vitro Fertilization. In Comparative Reproductive Biology /
J.F. Hasler. — Ed. by H. Schatten, Gh. M. Constantinescu, 2007. — P. 171–211.
15. Itagaki, Y. Sexing of bovine embryos with malt-specific repetetives DNA by polymerase chain
reaction sexing of bovine embryos and the production of calves with predicted sex/ Y. Itagaki,
S. Sato, Y. Shitanaka et al. // J. Reprod. Devel. — 1993. — V. 39. — P. 65–72.
16. Jaenisch, R. Infection of mouse blastocysts with SV 40 DNA: normal development of infected embryos and persistence SV 40-specific DNA sequences in the adult animals / R. Jaenisch
// Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. — 1974. — V. 39. — Р. 375–380.
17. Kameyama, K. Direct transfer of bovine frozen-thawed embryos sexed with a rapid Y-chromosome detection assay/ K. Kameyama, T. Numabe, F. Sekizawa et al. // Theriogenology. —
1996. — V. 45. — P. 227.
18. Lai, L. Animal Cloning. In Comparative Reproductive Biology. / L. Lai, R.S. Prather. — Ed. by
H. Schatten, Gh. M. Constantinescu, 2007. — P. 237–262.
19. Puglisi, R. In vitro fertilization with frozen-thawed bovine sperm sexed by flow cytometry and
validated for accuracy by realtime PCR / R. Puglisi, R. Vanni, A. Galli et al. // Reproduction. —
2006. — V. 132. — P. 519–526.
20. Saiki, R.K. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with thermostable DNA polymerase / R.K. Saiki, D.H. Gelfand, S. Stoffel et al. // Science. — 1988. — V. 239. — P. 487–491.
21. Seidel, G.E.Jr. Uterine horn insemination of heifers with very low numbers of nonfrozen and
sexed spermatozoa / G.E.Jr. Seidel, Allen C.H., Johnson L.A. et al. // Theriogenology. — 
1997. — V. 48. — P. 1255–1264.
22. Shea, B.F. Determining the sex of bovine embryos using polymerase chain reaction results: 
a six-year retrospective study / B.F. Shea // Theriogenology. — 1999. — V. 51. — P. 841–854.
23. Tubman, L.M. Characteristics of calves produced with sperm sexed by flow cytometry cell sorting / L.M. Tubman, Z. Brink, Suh T.K., Seidel, G.E. // J. Anim. Sci. — 2004. — V. 82. — 
P. 1029–1036.
24. Utsumi, K. Sexing of bovine embryos by polymerase chain reaction using Y-specific DNA as
primer / K. Utsumi, T. Kawamoto, J.H. Kim, H. Takeda, A. Iritani // Proc. 12th Intern. Congr. on
Anim. Reprod., 1992. — P. 757–759.
25. Wall, R.J. Making transgenic livestock: genetic engineering on a large scale / R.J. Wall, 
H.W. Hawk, N. Nel // J. Cell. Biochem. — 1992. — V. 49. — P.113–120.
26. Willadsen S.M. Nuclear transplantation in sheep embryos / S.M. Willadsen // Nature. —
1986. — V. 320. — P. 63–65.
27. Willadsen, S.M. A method for culture of micromanipulated sheep embryos and its use 
to produce monozygotic twins / S.M. Willadsen // Nature. — 1979. — V. 277. — P. 298–300.
28. Williams, T.J. Production of interspecies chimeric calves by aggregation of Bos taurus and
Bos indicus demi-embryos / T.J. Williams, R.K. Munro, J.N. Shelton // Reprod. Fertil. Dev. —
1990. — V. 2. — N.4. — P. 385.

РВЖ • СХЖ • № 4/2014
9

Рис. 4. Схема получения трансгенных животных посредством микроинъекции
ДНК в пронуклеус зиготы

Конструирование трансгена

Получение и отбор зигот с пронуклеусами

Микроинъекция ДНК (трансгена) в мужской пронуклеус

Отбор, подбор и спаривание родительских пар

Культивирование реконструированных зигот в условиях 
in vitro до стадии преимплантационных зародышей

Подсадка зародышей в половые органы самокреципиентов 
для их дальнейшего вынашивания

Диагностика беременности, роды, получение приплода

Идентификация особей, экспрессирующих трансген и их выращивание

SUMMARY
G.P. Dyulger1, V.V. Khramtsov1, A.G. Nezhdanov2

1 Russian State University of Agriculture — MAA named after K.A. Timiryazev (Moscow).

2 AllRussian Research Veterinary Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy

(Voronezh).

Assisted Reproductive Techniques in Breeding of Cattle.
The scientific basis, achievements and perspective to use
of assisted reproductive techniques in cattle breeding are
described in this article. These include using sexed sperm
and embryos, animal cloning, creating chimeras and transgenic animals.

РВЖ • СХЖ • № 4/2014

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ Кормление УДК 636.085/.087/.084.523

Ключевые слова: азотистый обмен, белковый концентрат, качество молока, минеральные вещества,
молочные коровы, продуктивность
Сокращения: А/Г — альбумин/глобулин, ВБСКК — высокобелковый сухой кормовой концентрат, ЕС — Евросоюз, МДж — мегаджоуль, ОР — основной рацион, ОЭ —
обменная энергия, ПП— переваримый протеин, СП — сырой протеин, ЭКЕ — энергетическая кормовая единица

Введение
Обеспечение населения экологически безопасными продуктами питания представляет собой одно из приоритетных направлений в экологии человека. В настоящее время во многих странах мира формируется рынок экологической (альтернативной) продукции сельского хозяйства,
которая гарантирует потребителю более высокое качество, что обеспечивается выполнением определенных требований в кормлении и системе содержания животных
[1, 4]. В ЕС принят регламент об экологическом производстве и маркировке экологической продукции, в основе которого лежит выработка продукции с использованием природных веществ и естественных процессов.
Современное молочное скотоводство — это высокоиндустриальное производство, в котором используют коров
с высоким генетически обусловленным потенциалом продуктивности. Чтобы поддержать физиологические и биохимические процессы в организме коров, им необходимо балансировать рационы как по пластическим, так 
и по биологически активным веществам. Однако количественное потребление кормов не всегда адекватно обеспечению потребностей организма. Как правило, это наблюдают у высокопродуктивных коров в транзитный 
период лактации, в связи с чем они часто переболевают
ацидозами, кетозами, маститами и другими заболеваниями, что отражается и на качестве молока. Важную
роль в решении данной проблемы играют высокопитательные концентрированные корма, методы их технологической обработки и применение веществ с высокой доступностью и усвояемостью [2, 5].

Цель исследования
Изучить эффективность повышения концентрации питательных веществ комбикормовой части рациона высокопродуктивных коров в послеотельный период путем
внесения в рацион ВБСКК и биоэлементного комплекса в мицеллярной форме, что позволяет обогатить рацион незаменимыми аминокислотами и биоэлементами.

Материалы и методы
Исследования проведены на ф. «Дубровицы» ФГУП Э/х
«Кленово-Чегодаево» ВИЖа на трех группах коров черно-пестрой породы с удоем 7000…8000 кг молока за 305
дней лактации согласно следующей схеме (табл. 1).

ОР состоял из кормосмеси, комбикорма, жмыха подсолнечного и патоки; содержал 24,9 ЭКЕ, 249,8 МДж
ОЭ, 3964 г СП, 3096 г ПП. ВБСКК включает в себя
44,7 % СП и все незаменимые аминокислоты, в том
числе метионин — 0,7 %, лизин — 1,14 %, валин —
2,07 %; ВБСКК вносили в ОР вместо 1 кг комбикорма
ОР. Биоэлементный комплекс содержит в ионной форме
Ca2+, Mg2+, ∑Fe2+Fe3+, Zn2+, Cr2+, I1–Si2+, Cu2+.
В исследованиях определяли молочную продуктивность по ГОСТ 51481-99, химический состав молока и
количество соматических клеток на анализаторе молока «Bently-150», показатели азотистого обмена в сыворотке крови на анализаторе Chem Well (Awareness Technology, США), макро- и микроэлементы химическими,
вольт-амперометрическими методами и на спектрометре КВАНТ-Z.ЭТА («КОРТЭК»). Статистическую обработку данных проводили с определением критерия достоверности Стьюдента-Фишера; использовали программу Microsoft Office Excel, 2010.

Результаты и обсуждение
Внесение в рацион коров в транзитный период ВБСКК
и биоэлементного комплекса оказало положительное
влияние на среднесуточный удой, азотистый и минеральный метаболизм.
Среднесуточный удой в первые 100 дней после отела
у 1-й и 2-й опытных групп коров был выше, чем у контрольной на 9,2 и 16,1 %, соответственно. Однако при этом
наблюдали тенденцию к снижению содержания сухого
вещества в молоке, в частности: жира — на 0,12 и 0,14 %,
белка — на 0,10 и 0,02 %, лактозы — на 0,03 и 0,3 %, соответственно, у коров 1-й и 2-й группы по отношению
к контролю.
В последующие 110 дней лактации среднесуточный
удой у коров опытных групп сохранился на более высо
Экологические аспекты 
производства коровьего молока

1. Схема опыта

Группы 
коров

Число животных 
в группе
Варианты кормления

Контрольная
10
ОР

Опытные:
1я
2я

10
5

ОР +ВБСКК по 1 кг/гол/день
ОР + ВБСКК по 1 кг/гол/день + 
Биоэлементный комплекс по 2,5 мл/гол/день

Ю.П. Фомичев1, кандидат биологических наук (urij.fomichev@yandex.ru), И.В. Гусев1, кандидат биологических наук,
Н.Н. Сулима1, кандидат сельскохозяйственных наук, Б.Д. Шайахметов1, аспирант, И.П. Пьянзина2, кандидат
биологических наук (slavirina@mail.ru)

1 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Всероссийский научноисследовательский институт животноводства имени

академика Л.К. Эрнста» (МО, п. Дубровицы).

2 ООО «Созидатель» (Москва).
В статье изложены результаты исследования обогащения рациона молочных коров в транзитный период
лактации аминокислотами и микроэлементами путем применения ВБСКК и биоэлементного комплекса в
мицеллярной форме и их влияния на продуктивность, азотистый и минеральный обмен.

Экологические аспекты производства коровьего молока

РВЖ • СХЖ • № 4/2014
11

ком уровне по отношению к контролю и был выше за 210
дней лактации на 11,4 и 13,2 % при равном содержании
массовой доли жира, но при сохранении различий по содержанию массовой доли белка в молоке (табл. 2).

Внесение в рацион коров ВБСКК значительно улучшило белковый и азотистый обмен. В течение первых 100 дней
лактации в сыворотке крови у коров опытных групп повысилось содержание общего белка при более высоком А/Г,
снизилось содержание остаточного азота на 25…34 % при
более высоком мочевинном индексе (Urea ratio) и возросло содержание свободного аминного азота на 17 % в первый месяц лактации и на 35 % на третьем месяце, что свидетельствует об улучшении протеинового и, в особенности, аминокислотного питания коров (табл. 3).

Обогащение рациона ВБСКК и биоэлементным комплексом повлияло на характер минерального обмена в организме коров. При стабилизации в сыворотке крови коров уровня кальция и относительно равном содержании
фосфора в течение первых 100 дней лактации увеличилось содержание Mg на 17,6…20,6 % и снизилось содержание Fe на 11,8 и 7,6 % на первом и третьем месяце лактации, что можно оценить как положительное явление,
поскольку Mg необходим в этот период для синтеза паратгормона, регулирующего обмен кальция, а Fe непосредственно связан с оксидативным стрессом в организме, в
результате у коров этой группы была самая низкая активность
щелочной фосфатазы, что свидетельствует о более низкой степени резорбции Ca из костной ткани (табл. 4).

Использование в питании коров ВБСКК в комплексе
с минеральными биоэлементами оказало также влияние
на минеральный состав молока. В молоке 2-й опытной
группы коров содержание Ca, Mg, P и Fe на первом месяце лактации было ниже на 13,0, 13,8, 10,4 и 41,5 %, соответственно, а содержание Zn и Cu выше на 12,6 и 23,6 %,
чем в молоке коров контрольной группы. Данные различия связаны с ролью (метаболитической спецификой)
этих элементов в организме, а также с повышением среднесуточного удоя, что, в частности, связано с выведением Ca с казеином и других элементов с молоком (табл. 5).

Выводы
Применение ВБСКК и биоэлементного комплекса в мицеллярной форме в питании молочных коров оказало положительное влияние на азотистый и минеральный обмен, улучшило обеспечение организма незаменимыми
аминокислотами, стабилизировало показатели минерального обмена благодаря биоэлементам минерального комплекса, находящимся в активной ионной форме, что обусловило повышение удоев молока как в период применения кормовой добавки, так и в последующие 100 дней
лактации, при улучшении его минерального состава и
санитарно-гигиенических свойств.

Б и б л и о г р а ф и я
1. Крюков, В.С. Влияние электролитного баланса на коров / В.С. Крюков, С.В. Попова // Эффективное животноводство. — 2012. — №9(83). — С. 40–43.
2. Крижан, И. Основы кормления животных на экологических фермах в Евросоюзе / И. Крижан / Eurofarmer. — 2007. — №9. — С. 6–9.
3. Регламент ЕС №834/2007 об экологическом производстве и маркировке экологической продукции от
28.06.07. — 21 с.
4. Фетисов, Е.П. Экологическое агропроизводство / Е.П. Фетисов, Ш. Розенов. — М.: Профиздат, 1997. — 339 с.
5. Ali, C.S. Supplementation of ruminally protected proteins and amino acids: feed consumption, digestion and performance of catle and sheep / C.S. Ali, Islam-Ud-Din, M. Sharif, M. Nisa, A. Javaid, N. Hashmi, M. Sarwar //
International journal of agriculture & biology. — 2009. — N. 11. — P. 477–482.
6. Perucchietti, P. Balanced trace element nutrition to neutralize oxidative stress / P. Perucchietti, W. Litjens //
All About Feed. net. — 2010. — V. 1. — N. 5. — P. 28–29.

2. Молочная продуктивность и качество молока коров

Показатель
Контрольная
группа

Опытные группы

1я
2я

За 100 дней лактации

Среднесуточный удой, кг
24,9±1,61
27,2±1,68
28,9±1,93

Удой за 100 дней, кг
2495
2719
2894

Массовая доля, %:
жира
белка
лактозы
сухого вещества

4,62±0,17
3,17±0,06
5,45±0,11
14,82±0,52

4,50±0,19
3,07±0,07
5,42±0,10
13,73±0,38

4,48±0,46
3,15±0,10
5,15±0,22
13,56±0,44

Термоустойчивость, класс
78,3±0,00
78,8±0,00
77,8±0,00

Кислотность, оТ
16,0±0,00
16,0±0,32
16,0±34

Содержание соматических клеток
912±329
378±175
503±272

За 210 дней лактации

Среднесуточный удой, кг
22,7±1,38
25,3±1,65
25,7±1,55

Удой за 210 дней, кг
4767
5322
5403

Массовая доля, %:
жира
белка

4,67±0,21
3,26±0,10

4,69±0,21
3,11±0,08

4,57±0,44
3,20±0,08

Содержание соматических клеток
941±304
338±162
542±245

3. Белковый и азотистый обмен у коров

Показатели
Группы коров

контрольная
1я опытная
2я опытная

1й месяц лактации

Общий белок, г/л
80,8±1,78
78,40±3,40
80,68±2,05

Альбумин, г/л
29,68±0,85
32,7±0,79***
30,91±2,22

Глобулин, г/л
51,12±2,34
45,55±3,11
49,96±3,60

А/Г
0,58±0,04
0,72±0,04****
0,64±0,07

Остаточный азот, мг %
53,10±0,07
39,91±0,35*
40,13±0,08*

Мочевина, мМ/л
2,74±0,20
3,01±0,29
4,08±0,36**

Urea ratio
15,48
22,62
30,52

Свободный аминный азот, мг %
3,21±0,005
3,77±0,07*
3,76±0,03*

Креатинин, мкМ/л
78,74±5,86
70,69±5,80
75,11±5,02

3й месяц лактации

Общий белок, г/л
81,45±2,30
85,08±5,61
80,78±1,55

Альбумин, г/л
29,74±0,86
30,83±1,84
29,21±1,42

Глобулин, г/л
51,76±3,00
54,25±6,73
51,57±2,97

А/Г
0,58±0,03
0,61±0,07
0,57±0,05

Остаточный азот, мг %
43,91±0,51
29,58±0,21*
29,85±0,21*

Мочевина, мМ/л
4,02±0,39
3,32±0,28
3,32±0,62

Urea ratio
27,48
33,63
33,33

Свободный аминный азот, мг %
2,82±0,04
3,86±0,05*
3,82±0,04*

Креатинин, мкМ/л
76,73±3,73
66,89±5,02
73,23±7,96

*P<0,001; **P<0,01;***P<0,02; ****P<0,05

4. Минеральный обмен у коров

Показатели
Группы коров

контрольная
1я опытная
2я опытная

1й месяц лактации

Кальций, мМ/л
2,58±0,05
2,45±0,05
2,50±0,07

Фосфор, мМ/л
2,13±0,20
2,17±0,05
2,06±0,16

Магний, мМ/л
1,03±0,03
1,07±0,02
1,08±0,07

Железо, мкМ/л
28,53±0,52
30,0±2,42
25,17±3,95

Щелочная фосфатаза, мЕ/л
54,87±3,63
81,79±9,90**
56,35±8,83

3й месяц лактации

Кальций, мМ/л
2,73±0,03
2,66±0,04
2,71±0,07

Фосфор, мМ/л
1,87±0,07
1,83±0,05
1,99±0,11

Магний, мМ/л
1,02±0,02
1,23±0,07*
1,12±0,05

Железо, мкМ/л
32,22±0,89
33,45±1,67
29,77±2,49

Щелочная фосфатаза, мЕ/л
82,44±5,26
114,6±15,07
63,87±8,68

*P<0,01; **P<0,02

5. Содержание минеральных веществ в молоке

Группы коров
Элементы:

Ca, г/кг
Mg, г/кг
P, г/кг
Fe, мг/кг
Zn, мг/кг
Cu, мкг/кг

Контрольная M±m 0,995±0,025
0,123±0,003
0,63±0,002
0,205±0,030
8,17±0,97
24,5±3,14

2я опытная, M±m
0,866±0,09
0,114±0,01
0,565±0,02* 0,12±0,006**
9,20±0,94
30,3±2,04

*P<0,01; **P<0,02

SUMMARY
U.P. Fomichev1, I.V. Gusev1, N.N. Sulima1, 
B.D. Shayakhmtov1, I.P. Pyanzina2

1 L. K. Ernst Institute of Animal Husbandry (MR, Dubrovicy).

2 Ltd. «Sozidatel» (Moscow).

Ecological Aspects of Dairy Production. In the article the
influence of high protein concentrate and bioelements complex in micellar form, as sourсe essential aminoacids and
macroand microelements, on milk yield and nitrogen and
mineral metabolism in organism dairy cows are described.