Вестник ветеринарии, 2013, том 66, № 3

Российская Федерация

Îñíîâàí â 1996 ãîäó

66

    3/2013

ISSN 2071-3096

ИТОГИ КОНФЕРЕНЦИЙ И КРАТКОСРОЧНЫЕ ПЕРСПЕКТИВЫ
Уважаемый читатель, статьями этого выпуска журнала мы заканчиваем почти трехлетний цикл публикаций материалов многоэтапной перманентной конференции, проведенной нашим журналом совместно с факультетом ветеринарной медицины Ставропольского ГАУ.
Каждый этап имел свои собственное наименование и сроки проведения
как отдельная конференция, что не мешает нам рассмотреть и проанализировать результаты их всех в едином блоке, сформировавшемся вследствие принудительной интенсификации во времени и ограниченном информационном пространстве нашего журнала.
Подробная статистическая информация с указанием количества поступивших для участия в конференциях работ, количества опубликованных статей, количества авторов и пр. приведена в справках, предваряющих публикации материалов конференции как в предыдущих, так и в этом выпусках
журнала.
Более значимы, на наш взгляд, результаты субъективного анализа самого процесса конференций с выявлением его движущих сил, причин, обусловливающих количественные и качественные показатели опубликованных и
неопубликованных материалов, с созданием образа современного среднестатистического ученого нашей отрасли.
Основной силой, подвигающей наших маститых и начинающих ученых к
началу работы по продвижению своих статей в печать (хотелось бы написать  «к сожалению», но поскольку это официально формализованное требование, напишу – «по-прежнему») является не безудержное желание поведать миру о своих открытиях и изобретениях (с достовернейшими, воспроизводимыми результатами, подтвержденными многократными повторениями опытов в течение многих лет), а банальное требование основного принципа существования – выживания в избранной экологической нише: если в
течение определенного (очень малого) периода времени с твоим именем не
опубликована ни одна статья, ни одна книга, твои шансы на защиту диссертации, на повышение в должности или звании, на представительство в
общественных научных собраниях и организациях катастрофически снижаются.... «И какое мне дело до того, кто будет читать мои статьи (использование в практике моих рекомендаций – это, вообще, уже проблемы и
личная ответственность незадачливого, наивного и излишне доверчивого читателя!), или кто будет на них ссылаться в своих работах, или кто на основе моих разработок попытается построить собственные исследования –
основная задача этого периода моего существования выполнена: к очередному отчету вышла еще одна статья (или две!)»,– вот лейтмотив и оправдание даже для высокопорядочного и потенциально честного «ученого».
 Бытие (необходимость выживания!), как известно, определяет и сознание: в ход идут любые дозволенные Законом или даже недозволенные способы и методы – от мелкого мошенничества: публикации одной и той же статьи в разных журналах под слегка (или сильно) измененным названием; изготовления  из одной  когда-то опубликованной работы путем произвольного
фрагментирования нескольких «новых»; составления «новой» статьи простой заменой объекта исследований в своей (или чужой) статье, но при
обязательном сохранении уже одобренных в опубликованной статье-исходнике результатов – до хищений научных материалов или научных публикаций с последующим их легким «тюнингом»...
Как понимаете, уважаемый читатель, всё описанное выше – это лишь единичные случаи (сотые доли процентов) – тень нашей науки и пародия на современных ученых, абсолютное большинство которых представляет к публикации (особенно в нашем журнале!) только строго достоверную научную информацию. И плановое превалирование в очередных выпусках нашего журнала не
столько научной, сколько законодательной информации, мы расцениваем как
вынужденную необходимость исполнения обещанного нашим подписчикам...
июнь, 2013
Главный редактор                                                                  В.М. Сахно

Ежеквартальный
научно-производственный журнал
«Вестник ветеринарии»
Key title: Vestnik veteri arii
Abbreviated key title: Vestn. vet.

№ 66
(3/2013)
Основан в 1996 году
Учредитель ООО «Энтропос»
Зарегистрирован в Комитете
Российской Федерации по печати
(свидетельство о регистрации
средства массовой информации
№ 015903 от 26 марта 1997 года)

ISSN 2071-3096
Подписные индексы:
1. В Каталоге российской прессы
«Почта России»  - 80188;
2. В Объединённом каталоге
«Пресса России» - 15121.
Редакционная коллегия:

Гулюкин М.И. (ВИЭВ, г. Москва)
Заерко В.И. (Ставропольская биофабрика)
Клименко А.И. (СКНИВИ, г. Новочеркасск)
Колычев Н.М. (Омский ГАУ)
Неустроев М.П. (Якутский НИИСХ)
Самуйленко А.Я. (ВНИТИБП РАСХН, г. Москва)
Сидорчук А.А. (МГАВМиБ, г. Москва)
Трухачев В.И. (Ставропольский ГАУ)
Тяпугин Е.А. (Северо-Западный НИИМЛПХ РАСХН)

Главный редактор Сахно   В.М.

При частичном или полном цитировании ссылка на «Вестник ветеринарии»
обязательна.

Ответственность за достоверность
результатов и эффективность предлагаемых
мероприятий несут авторы статей,
а за содержание и достоверность рекламы –
рекламодатели.

Адреса редакции:
для писем: 355012, Ставрополь-12, а.я.1465
e-mail: entropos2005@yandex.ru
web-страница: vestvet.ru
Тел/факс  8-(865-2)-95-01-66
                 8-(865-2)-29-19-80

Верстка ООО «Энтропос»
Сдано в печать 28.06.2013
Формат 70х108/16. Усл. печ. л. 7,17.
Гарнитура Times New Roman.
Бумага офсетная. Тираж 125 экз. Заказ № 55.
Цена 550 руб.

Отпечатано с готового оригинал-макета
в типографии ООО «Альфа Принт»
Адрес: ул. Морозова, 30, оф. 33, г. Ставрополь,
355017. Тел/факс (8652)-94-16-51

©  ООО «Энтропос», информация
©  ООО «Энтропос», оформление

СОДЕРЖАНИЕ

Материалы
Международной научно-практической
интернет-конференции
«Научный поиск – животноводству России»

Современные аспекты диагностики, лечения
и профилактики при паразитарных и инфекционных
заболеваниях животных
Власенко В.С., Морозова О.В., Дудоладова Т.С.
Взаимосвязь уровня циркулирующих иммунных
комплексов и функционального состояния
лейкоцитов при лейкозе крупного рогатого скота
Насибуллин И.Р., Викторов Д.А., Васильев Д.А.,
Нафеев А.А., Швиденко И.Г. Выделение фагов
бактерий Aeromonas hydrophila и изучение и
биологически свойств.........................................
Рябинин С.В. Тест-система для диагностики  реовирусной инфекции кур......................................
Туркова М.В., Бьядовская О.П., Прунтова О.В.,
Перевозчикова Н.А., Жбанова Т.В. Ретроспективная серодиагностика орнитобактериоза птиц
Зубаирова М.М., Атаев А.М., Карсаков Н.Т.
Динамика сезонной активности зоофильных мух
в равнинном Дагестане........................................
Беспалова Н.С., Возгорькова Е.О. Опыт применения
фитопрепаратов в комплексном лечении собак
при демодекозе.....................................................
Зимарева С.С., Тайгузин Р.Ш., Пантелеев А.П.
Распространение постодиплостомоза на территории Оренбургской области.............................
Дроздова Е.А., Щербакова Н.В. Резистентность
пробиотических штаммов микроорганизмов
к антибиотикам.....................................................
Бердова А.К., Герунов В.И. Действие инсектицида
Аверсект-2 на эндокринные железы крыс.........
Сафоновская Е.В., Дегтяренко А.В., Беляев В.А,
Дорохина А.А.Токсичность дезинфектанта
"Биопаг-Д" для млекопитающих..........................
Тарасова Е.Ю., Тремасов М.Я. Средства лечения
при Т-2-микотоксикозе........................................
Морфофункциональные системы животных в норме
и при патологии
Кочуева Н.А., Воронина Т.Ю.  Динамика активности
ферментов белкового обмена у телят костромской
породы..................................................................
Гречко В.В., Хонин Г.А. Сравнительная гистологическая характеристика мышц пальцев кур
Дерхо М.А., Середа Т.И., Горелик Л.Ш. Индикаторы
оценки и прогнозирования массы пищевых яиц
Кошкина Н.А. Морфологические особенности
лимфатических узлов норок...............................
Кудачева Н.А. Структура эпидермиса при
папилломавирусной инфекции крупного
рогатого скота.......................................................
Оробец В.А., Севостьянова О.И. Влияние препарата
"Экстраселен-Е+Vmin" на продуктивность
кур-несушек.......................................................

4

5

8

11

14

16

19

22

25

27

30

32

35

38

40

43

47

49

Информация о втором этапе конференции

«Exceptis excipiendis
- за исключением того, что должно быть исключено»
Латинское изречение

Решетов В.Б., Пузач Л.В. Частотные диаграммы биохимических показателей крови для оценки
состояния животных.................................................................................................................
Семенов Э.И., Матросова Л.Е., Тарасова Е.Ю., Валиев А.Р., Егоров В.И. Антитоксическая
эффективность иммуномодулятора “Тималин”...........................................................................
Топурия Г.М., Бибикова Д.Р. Коррекция иммунного статуса поросят-отъёмышей....................
Тремасова А.М. Ветеринарно-санитарная оценка качества мяса телят после применения шунгита
Ханхасыков С.П., Косинская В.О. Лечение некроза, вызванного препаратом Винкристин............
Шахова В.Н., Беляев В.А., Сафоновская Е.В., Михайленко В.В. Изменения биохимических
показателей крови при экспериментальной офтальмопатологии...............................................
Эшбуриев Б.М., Эшбуриев С.Б. Профилактика микроэлементозов у стельных коров
в фермерских хозяйствах Узбекистана..........................................................................................
Современная ветеринарная фармакология: анализ и перспективы
Ивонин А.Г., Пименов Е.В., Копылов С.Н., Оборин В.А. Оценка возможности включения
антибиотиков в эритроциты животных.........................................................................................
Киреев И.В., Оробец В.А., Беляев В.А., Скрипкин В.С., Чернова Т.С. Влияние мебисела
на динамику диеновых конъюгатов и малонового диальдегида в крови телят..........................
Лыско С.Б., Задорожная М.В., Красиков А.П. Оценка острой токсичности препарата "Бетулин
в углеродной микросфере"............................................................................................................
Оробец В.А., Момотова Е.А. Влияние нового железосодержащего препарата на состав крови
поросят..............................................................................................................................................

За пределами конференции

...а может и не шутка
Зюзин П.И., Андреева А. Г. Инкапсулированные космоэмбрионы пояса астероидов.................

Новая продукция издательства “Энтропос”.........................................................................

52

55
58
62
64

66

68

71

75

77

80

83

86

Quarterly
theoretical and practical journal
«Vestnik veterinarii»
Abbreviated key title: Vestn. vet.

№ 66
(3/2013)

Founded in 1996
The founder is Entropos Co Ltd.
Journal is registered in Committee of the
Russian Federation on press (Certificate
on registration of mass media
N 015903 from March 26, 1997).

ISSN 2071-3096

Subscription index:

80188 - in Catalogue of the Russian press
«Pochta of Russia»;

15121-in Union Catalogue
«Pressa of Russia»

Editorial staff:
Gulyukin M.I. (VIEV, Moscow)
Klimenko A.I. (SKZNIVI, Novocherkassk)
Kolychev N.M. (Omsk GAU, Omsk)
Neustroyev M.P. (Yakut NIISKH, Yakutsk)
Samuylenko A.Ya.(VNITIBP RASKHN, Moscow)
Sidorchuk A.A. (МGАVМB, Moscow)
Trukhachev V.I. (StGAU, Stavropol)
Tyapugin E.A.(SZNIIMLPKH RASKHN, Vologda)
Zaerko V.I. (St. biofactory, Stavropol)
Chief editor Sakhno Vladimir M.

The indicating on «Vestnik veterinarii» is
obligatory at particulate or complete
citation.

The authors of articles bear responsibility
for reliability of results and efficacy of
offered measures. The advertizers bear
responsibility for the contents and
reliability of advertising.

Address: POB 1465, Stavropol, Russia, 355012
e-mail: entropos2005@yandex.ru
website: vestvet.ru
Phone/fax +7(8652)-95-01-66
              +7(8652)-29-19-80

Make-up of Entropos Co Ltd.
The journal is handed over to the press of
June, 28, 2013
Format 70x108/16. Offset paper.
Type Times New Roman. Sheets 7,17.
 Number of copies 125. Booking 55.
The price is RUR 550.00

Printed in Alfa Print CoLtd Printing house
Address: of. 33, 30, Morozov Str., Stavropol,
Russia, 355017. Tel/fax – +7-865-2-94-16-51.

©
© Entropos Co Ltd, information
Entropos Co Ltd, design

Contents

Materials
of the International Theoretical and Practical
Internet Conference
 «SCIENTIFIC RESEARCH
FOR RUSSIAN ANIMAL HUSBANDRY»

Conference resolution................................................
Vlasenko V.S., Morozova O.V., Dudoladova T.S.
Relationship between the levels of circulating
immune complexes and functional state of leukocytes
in cattle by leukemia..............................................
Nasibullin I.R., Viktorov D.А., Vasilyev D.A., Nafeev
A.A., Shvidenko I.G. Isolation of bacteriophages
active against aeromonas hydrophila and their
biological properties...............................................
Ryabinin S.V. Test system for reovirus infection
diagnostics..............................................................
Turkova M.V., Byadovskaya O.P., Pruntova O.V.,
Perevozchikova N.A., Zhbanova T.V. Retrospective
serodiagnosis of avian ornithobacteriosis.................
Zubairova M.M., Ataev A.M., Karsakov N.T.,
Dynamics of zoophilous fly seasonal activity  in
the flat Daghestan...................................................
Bespalova N.S., Vozgorkova E.O. Phytopreparations
for complex treatment of dogs by demodectic mange
Zimareva S.S., Tayguzin R.Sh., Panteleev A.P. Spread
of postodiplostomos on Orenburg region's territory
Drozdova E.A., Shcherbakova N.V. Antibiotic resistance
of probiotic strains.................................................
Berdova A.K., Gerunov V.I. Effect of the insecticide
Aversect-2  on the endocrine glands in rats............
Safonovskaya E.V., Degtyarenko A.V., Belayev V.A.,
Dorokhina A.A. Toxicity of the Biopag-D disinfectant
for mammal.............................................................
Tarasova E.Yu., Tremasov M.Ya. Medicamentous
therapy by T-2 mycotoxicosis................................

Kochueva N.A., Voronina T.Yu. Dynamics of the protein
metabolism enzymes activity in Kostroma calves....
Grechko V.V., Honin G.A. Comparative histological
characteristics of dactyl muscles in hens................
Derkho M.A., Sereda T.I., Gorelik L.Sh. The rating
indicators and prognosis for weight of eggs............
Koshkina N.A. Morphological characteristics of the
lymph nodes in minks............................................
Kudacheva N.A. Epidermis structure by bovine
papillomavirus infection.........................................
Orobets V.A., Sevostyanova O.I. Influence of
Extraselen-E+Vmin the drug on laying hen productivity
Reshetov V.B., Puzach L.V. Frequency diagram of blood
biochemical measurements for evaluation of animals
condition.................................................................
Semenov E.I., Matrosova L.E., Tarasova E.Yu.,
Valiev A.R., Egorov V.I. The antitoxic action of the
immunomodulator Thymalinum...............................

4

5

8

11

14

16

19

22

25

27

30

32

35

38

40

43

47

49

52

55

«Exceptis excipiendis»
Latin saying

Научный поиск – животноводству России: материалы Международной научно-практической интернет-конференции, Ставрополь, 11.02.2013-24.03.2013 г. Часть 2. // Вестник
ветеринарии. 2013. Вып. 66. № 3. С. 5 - 82.

В этом выпуске журнала опубликованы 28 статей, одобренных оргкомитетом
конференции на рабочем  заседании 30 апреля 2013 года.
В статьях предложены пути решения актуальных проблем ветеринарной науки по
диагностике, лечению и профилактике заболеваний животных.

Оргкомитет  конференции:
Беляев Валерий Анатольевич – доктор ветеринарных наук, профессор, декан факультета
ветеринарной медицины Ставропольского ГАУ – председатель,
Луцук Светлана Николаевна – доктор ветеринарных наук, профессор, заведующая
кафедрой паразитологии и ВСЭ, анатомии и патанатомии Ставропольского ГАУ –
заместитель председателя,
Сахно Владимир Михайлович – доктор ветеринарных наук, доцент, главный редактор
журнала «Вестник ветеринарии».

Спонсор конференции  –  ООО «Энтропос» (e-mail: entropos2005@yandex.ru,
интернет-страница  www.vestvet.ru).
ООО «Энтропос»  в течение  19 лет  неизменно осуществляет принятую при его
основании в 1993 году генеральную концепцию «Информационная поддержка
отечественного животноводства».

© ООО «Энтропос», 2013

Topuriya G.M., Bibikova D.R. Correction of the immune status in weanling piglets........................
Tremasova A.M. Veterinary and sanitary assessment of the meat quality from calves after use of
schungite...............................................................................................................................................
Khankhasykov S.P., Kosinskaya V.O. Vincristine-challenged necrosis healing...................................
Shakhova V.N., Belayev V.A., Safonovskaya E.V., Mikchailenko V.V. Changes in biochemical blood
indicators by experimental ophthalmopathology.................................................................................
Eshburiev B.M., Eshburiev S.B. The prophylaxis of microelementoses in incalvers from farms
of Uzbekistan.......................................................................................................................................
Ivonin A.G., Pimenov E.V., Oborin V.A. Evaluation of the incorporation of antibiotics into erythrocytes
of animals..............................................................................................................................................
Kireev I.V., Orobets V.A., Belayev V.A., Skripkin V.S., Chernova T.S. Influence of mebisel on dynamics
of diene conjugate and malonic dialdehyde in blood of calves..............................................................
Lysko S.B., Zadorozhnaya M.V., Krasikov A.P. Assessment of acute toxicity of the medicine "Betulin
in carbon microsphere"........................................................................................................................
Orobets V.A., Momotova E.A. Influence of a new iron preparation on hematological parameters in piglets

 Science-fiction story
Zuzin P.V., Andreeva A.G. Encapsulated cosmic embryos from the asteroid belt..............................

New Entropos’s production........................................................................................................

The Public Contract – 3 and 4 pages of cover

58

62
64

66

68

71

75

77
80

83

86

Материалы международной научно-практической конференции (11.02.2013 - 24.03.2013 г.).Ч. 2

Современные аспекты
диагностики, лечения и профилактики
при паразитарных и инфекционных заболеваниях животных

УДК 619:612.017.1:616-006.446:636.22/.28

ВЗАИМОСВЯЗЬ УРОВНЯ
ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ
И ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ
ПРИ ЛЕЙКОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

В.С. ВЛАСЕНКО, О.В. МОРОЗОВА, Т.С. ДУДОЛАДОВА

Ключевые слова: лейкоз, крупный рогатый скот, циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК),
НСТ-тест, животные-вирусоносители.

В работе приведены данные о взаимосвязи между уровнем циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и функциональным состоянием
лейкоцитов при лейкозе крупного рогатого скота. Библ. 7.
Образование иммунных комплексов в циркуляции - физиологическое защитное явление, цель которого – удаление из организма антигенов, как образующихся в организме,
так и проникающих в организм через желудочно-кишечный тракт и дыхательные пути.
В норме эти комплексы обычно быстро подвергаются фагоцитозу и разрушению. Патологический их характер проявляется в тех случаях, когда возникают недостаточность
фагоцитоза или первичное ослабление фагоцитирующей способности клеток, или
образуется избыточное количество иммунных комплексов [3].
До настоящего времени остаются недостаточно изученными некоторые механизмы
лейкозного процесса. Имеющиеся немногочисленные данные, касающиеся исследований циркулирующих иммунных комплексов у животных при лейкозе, носят противоречивый характер. С одной стороны, резкой разницы между содержанием циркулирующих
иммунных комплексов у больных лейкозом и здоровых коров не установлено [7], однако
Р.Т. Маннапова с соавт. [4] приводят данные, свидетельствующие о том, что концентрация
циркулирующих иммунных комплексов у больных лейкозом животных значительно
повышена. По мнению С.И. Логинова [2], концентрация иммунных комплексов в крови
животных увеличивается в зависимости от стадии лейкоза, однако при значительном
лимфоцитозе (25,0 х109/л и более) может снижаться.
Также в научной литературе недостаточно сведений о функциональном состоянии
лейкоцитов крови при лейкозе крупного рогатого скота.
Цель работы - выявить связь между функциональным состоянием нейтрофилов и
уровнем ЦИК при лейкозе крупного рогатого скота.

ВЛАСЕНКО Василий Сергеевич - старший научный сотрудник лаборатории эпизоотологии и мер борьбы с туберкулезом ГНУ Всероссийский НИИ бруцеллеза и туберкулеза животных Россельхозакадемии, доктор биологических наук, доцент
МОРОЗОВА Ольга Владимировна - аспирант ГНУ Всероссийский НИИ бруцеллеза и
туберкулеза животных Россельхозакадемии
ДУДОЛАДОВА Татьяна Сергеевна - младший научный сотрудник лаборатории диагностических методов исследований ГНУ Всероссийский НИИ бруцеллеза и туберкулеза
животных Россельхозакадемии, кандидат биологических наук
Адрес: ул. Лермонтова, 93, г. Омск, РФ, 644001. Тел. (3812)56-32-60. E-mail: vniibtg@rambler.ru

Вестник ветеринарии № 66 (3/2013)
6

Для выполнения цели были поставлены задачи:
1. Определить концентрацию ЦИК в сыворотке крови крупного рогатого скота с разной степенью компрометации к лейкозу;
2. Оценить функциональную активность лейкоцитов в НСТ-тесте у крупного рогатого
скота с разной степенью компрометации к лейкозу.
Материал и методы. Объектом исследования служил крупный рогатый скот чернопестрой и симментальской породы в возрасте 3-4 лет с разной степенью компрометации
к лейкозу.
Для выявления серопозитивных животных - носителей вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) применяли реакцию иммунодиффузии (РИД). Для выявления больных лейкозом животных применяли гематологический метод исследования. Лейкоформулу определяли при помощи микроскопии мазков крови. Показатель абсолютного
количества лимфоцитов оценивали по "лейкозному ключу" [5].
Функциональное состояние нейтрофилов оценивали в тесте с нитросиним тетразолием (НСТ) фотометрическим методом в спонтанном (без нагрузки) варианте с последующей фиксацией реакции с помощью многоканального иммунохимического
анализатора. Оценку концентрации образовавшегося диформазана в нейтрофилах
определяли при λ=630 нм [6]. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК)
определяли методом осаждения полиэтиленглюколем (ПЭГ-6000) с последующим
фотометрическим определением оптической плотности образовавшегося преципитата
на проточном фотометре 5010v5+ при λ=450 нм [1].
Математическая обработка цифровых данных включала определение средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (m). Для оценки существенности различий
между двумя средними величинами Мх и Му использовали t-критерий по Стьюденту.
Результаты исследований. Отобрали 40 голов крупного рогатого скота, которых
разделили на 3 группы: 1-ю группу составили 16 коров, положительно реагирующих в
РИД с гликопротеидным антигеном вируса лейкоза крупного рогатого скота (носители
ВЛКРС); 2-ю группу - 9 положительно реагирующих в РИД с гликопротеидным
антигеном ВЛКРС, больных, по результатам гематологических исследований, согласно
"лейкозному ключу" - лейкоцитоз, лимфоцитоз; 3-ю  – 15 отрицательно реагирующих в
РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС (интактные).
В периферической крови определили функциональную активность нейтрофилов в
тесте с нитросиним тетразолием (НСТ-тест) в спонтанном варианте в единицах оптической плотности (ед. оп. пл.) и в сыворотке крови – количество циркулирующих иммунных
комплексов (ЦИК) в условных единицах (у.е.).
У носителей ВЛКРС и у больных лейкозом животных по сравнению с интактными
животными наблюдается достоверное ( Р>0,05) увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови  и усиление функциональной активности нейтрофилов (таблица).
Затем мы провели анализ индивидуальных показателей ЦИК и НСТ-теста носителей
ВЛКРС и больных животных в сравнении со средними значениями интактных животных.
В результате было установлено, что у 31,25% носителей ВЛКРС повышению уровня
ЦИК в сыворотке крови соответствует повышение показателей НСТ-теста. Еще в 37,5%
случаев нормальное содержание ЦИК сопровождается повышенной функциональной
активностью нейтрофилов.
У больных лейкозом в
гематологической стадии у
44,44% накопление концентрации ЦИК в сыворотке крови также сопровождается
усилением функциональной
активности нейтрофилов в
НСТ-тесте, в тоже время у
33,33%  -  угнетением.
Выводы: Повышенный
уровень ЦИК сочетается с
усиленной функциональной активностью лейкоцитов в НСТ-тесте у 31,25% носителей
ВЛКРС и 44,44% больных лейкозом животных.
Снижение числа гранулоцитов, способных восстанавливать НСТ, у третьей части больных животных при одновременном увеличении ЦИК, возможно, за счет угнетения гранулопоэза лейкозным процессом.

Таблица - Средние значения ЦИК
в сыворотке крови животных
с разной степенью компрометации к лейкозу, М±m

Показатели
РИДотрицательные
Носители 
ВЛКРС
Больные

ЦИК
84,93±9,40 
98,25±9,61
108,87±25,33

НСТ-тест
0,52±0,01
0,54±0,009
0,54±0,02

Материалы международной научно-практической конференции (11.02.2013 - 24.03.2013 г.).Ч. 2

Случаи повышенной функциональной активности нейтрофилов у носителей ВЛКРС
и больных лейкозом с нормальным содержанием ЦИК указывают на роль и других механизмов, участвующих в активации нейтрофилов.

ЛИТЕРАТУРА. 1. Гриневич Ю.А., Алферов А.Н. Определение иммунных комплексов в крови
онкологически больных // Лаб. дело. 1981. № 8. С. 493-496. 2. Логинов С.И. Системный экологоэпизоотологический анализ совокупного риска развития лейкоза крупного рогатого скота: автореф. дис. … д-ра биол. наук. Новосибирск, 2005. 45 с. 3. Ляшенко В.А., Дроженников В.А.,
Молотковская И.М. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток. М.: Медицина, 1988.
240 с. 4. Маннапова Р.Т., Якупов Р.Р., Рашитов А.В. Реакция ЦИК и иммуноглобулинов в организме больных лейкозом коров // Повышение эффективности и устойчивости развития агропромышленного комплекса: материалы Всерос. науч.- практ. конф. Часть III. Уфа, 2005. С. 219-220. 5.
Методические указания по диагностике лейкоза крупного скота / Департамент ветеринарии,
Минсельхоз России. 2000. №13-7-2/2130. 6. Пат. 2218567 Российская Федерация, МПК7 G 01 N
33/52. Способ диагностики функционального состояния нейтрофилов человека / М.А. Годков,
В.Ю. Зинкин; заявитель и патентообладатель науч.- исслед. ин-т скорой помощи им. Н.В. Склифосовского. № 2001132646/14; заявл. 05.12.01; опубл. 10.12.03. 7. Пешкус Ю.К., Жилайтис В.И.,
Тамошюнас В.И. Иммунные комплексы сыворотки крови крупного рогатого скота при лейкозе
// Проблемы ветеринарной иммунологии. М.: Агропромиздат, 1985. С. 67-70.

UDC 619:612.017.1:616-006.446:636.22/.28

RELATIONSHIP    BETWEEN   THE  LEVELS   OF   CIRCULATING   IMMUNE
COMPLEXES   AND   FUNCTIONAL   STATE   OF   LEUKOCYTES
 IN   CATTLE   BY   LEUKEMIA
VLASENKO, Vasily S., senior researcher, the All-Russia Research Institute for Brucellosis
and Tuberculosis of Animals, Doctor of Biology, Docent
MOROZOVA, Olga V., postgraduate student, the All-Russia Research Institute for Brucellosis
and Tuberculosis of Animal
DUDOLADOVA, Tatyana S.,  junior researcher, the All-Russia Research Institute for Brucellosis
and Tuberculosis of Animals, Candidate of Biology
Address: 93, Lermontov Street, Omsk, Russia, 644001. Tel. +7 (3812) 56-32-60.
E-mail: vniibtg@rambler.ru

Keywords: leukemia, cattle, circulating immune complexes (CIC), NBT-test, virus carrier

Summary. In this paper we present data on the relationship between the level of circulating
immune complexes (CIC) and the functional state of leukocytes in leukemia in cattle. Ref. 7.

BIBLIOGRAPHIC REFERENCES. 1. Grinevich Yu.A., Alferov A.N. Opredelenie immunnykh kompleksov
v krovi onkologicheski bol'nykh // Lab. delo. 1981. N 8. P. 493-496. 2. Loginov S.I. Sistemny ekologoepizootologichesky analiz sovokupnogo riska razvitiya leykoza krupnogo rogatogo skota: Author's abstract
of Doctoral dissertation. Novosibirsk, 2005. 45 p. 3. Lyashenko V.A., Drozhennikov V.A., Molotkovskaya
I.M. Mekhanizmy aktivatsii immunokompetentnykh kletok. M. Meditsina, 1988. 240 p. 4. Mannapova R.T.,
Yakupov R.R., Rashitov A.V. Reaktsiya TsIK i immunoglobulinov v organizme bol'nykh leykozom korov //
Povyshenie effektivnosti i ustoychivosti razvitiya agropromyshlennogo kompleksa: Materials of an All-Russia
Conference. Part III. Ufa, 2005. P. 219-220. 5. Metodicheskie ukazaniya po diagnostike leykoza krupnogo
skota / Departament veterinarii, Minsel'khoz Rossii. 2000. №13-7-2/2130. 6. Pat. 2218567 Rossiyskaya
Federatsiya, MPK7 G 01 N 33/52. Sposob diagnostiki funktsional'nogo sostoyaniya neytrofilov cheloveka /
M.A. Godkov, V.Yu. Zinkin;  N 2001132646/14. 7. Peshkus Yu.K., Zhilaytis V.I., Tamoshyunas V.I. Immunnye
kompleksy syvorotki krovi krupnogo rogatogo skota pri leykoze // Problemy veterinarnoy immunologii. M.:
Agropromizdat, 1985. P. 67-70.

Вестник ветеринарии № 66 (3/2013)
8

УДК 619:579

ВЫДЕЛЕНИЕ ФАГОВ БАКТЕРИЙ AEROMONAS HYDROPHILA
И ИЗУЧЕНИЕ ИХ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ

И.Р. НАСИБУЛЛИН, Д.А. ВИКТОРОВ, Д.А. ВАСИЛЬЕВ, А.А. НАФЕЕВ, И.Г. ШВИДЕНКО

Ключевые слова: бактериофаги, Aeromonas hydrophila, литическая активность, диагностика, специфичность.

В статье представлены результаты работы по выделению бактериофагов, активных в отношении бактерий Aeromonas hydrophila, и изучению
основных биологических свойств. Табл. 1. Библ. 11.

История изучения бактерий рода Aeromonas насчитывает более ста лет. Долгое время
их считали сапрофитами, но научные исследования последних лет позволяют отнести их
к факультативным патогенам, вызывающим, при определенных условиях, заболевания
животных и людей [10,11]. Аэромонады широко распространены в окружающей среде: их
выделяют из речной воды, сточных вод, почвы, от гидробионтов, растений, теплокровных
животных [9,10].
Ранняя и надежная идентификация микроорганизма является важным фактором в
лечении и профилактике заболеваний. Существующие методики лабораторной идентификации аэромонадной инфекции требуют больших затрат времени, средств и высокой
квалификации работников [2,7].
Метод фагодиагностики является быстрым, менее трудоемким и доступным для лабораторий любого уровня [3,6]. Строгая специфичность бактериофагов позволяет дифференцировать не только отдельные виды, но и серологически неотличимые штаммы в пределах
одного вида. Отсутствие наборов тест-систем на основе бактериофагов для диагностики
аэромонадных инфекций в лабораториях явилось поводом для наших исследований.
Целью наших исследований явилось выделение фагов, активных в отношении бактерий вида Aeromonas hydrophila, и изучение их основных биологических свойств.
Материалы и методы исследования. В качестве исходного материала при выделении
бактериофагов были исследованы пробы воды из рек, озер и рыбоводческих прудов Ульяновской области, пробы сточных вод животноводческих комплексов, птицефабрик, больниц. В качестве индикаторных бактериальных культур были использованы следующие
штаммы: референс-штамм Aeromonas hydrophila 43, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Ульяновской ГСХА, а также 14 полевых
штаммов, выделенных нами из объектов внешней среды.
Исследуемый материал предварительно фильтровали через бумажный фильтр для удаления механических примесей. Затем в колбу с концентрированным стерильным мясопептонным бульоном вносили пробы материала из расчета, чтобы после смешивания получить обычную по составу среду. Туда же добавляли по 1,0 мл 18-24-часовых бульонных
индикаторных культур Aeromonas hydrophila. Колбу с содержимым инкубировали в термостате при 30 оС (оптимальные условия для Aeromonas hydrophila) в течение 24-48 часов.

НАСИБУЛЛИН Ильдар Равильевич - соискатель кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО "Ульяновская
ГСХА им. П.А. Столыпина"
ВИКТОРОВ Денис Александрович - старший научный сотрудник ФГБОУ ВПО "Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина", кандидат биологических наук
ВАСИЛЬЕВ Дмитрий Аркадьевич - профессор кафедры микробиологии, вирусологии,
эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО "Ульяновская ГСХА
им. П.А. Столыпина", доктор биологических наук
НАФЕЕВ Александр Анатольевич - заведующий отделом особо опасных инфекций
Федерального государственного бюджетного учреждения "Центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора", доктор медицинских наук
ШВИДЕНКО Инна Григорьевна - профессор кафедры микробиологии, вирусологии и
иммунологии Саратовского государственного медицинского университета им. В.И. Разумовского, доктор медицинских наук
Адрес: бульвар Новый Венец, д. 1, г. Ульяновск, РФ, 432017. Тел. 8-908-477-55-73.
E-mail: viktorov_da@mail.ru

Материалы международной научно-практической конференции (11.02.2013 - 24.03.2013 г.).Ч. 2

Затем содержимое колбы в количестве 10,0 мл переносили в стерильные пробирки (по
2 от каждой пробы). С целью инактивации посторонней микрофлоры материал центрифугировали при 3000 об./мин. в течение 40 минут. Надосадочную жидкость обрабатывали хлороформом, прогревали в водяной бане при температуре 58-60 оС в течение 30
минут, фильтровали на установке вакуумной фильтрации. Наличие бактериофагов в полученных субстратах определяли по методу агаровых слоев по Грациа, а также с помощью спот-теста. Наличие зон лизиса или негативных колоний на газоне индикаторной
культуры указывало на присутствие бактериофага в исследуемом материале [3-5,8]. Селекцию бактериофагов и повышение их литической активности проводили пассированием фагов на индикаторных культурах с периодическим пересевом типичных для данного
изолята негативных колоний [3-5]. Основные биологические свойства выделенных бактериофагов изучались по общепринятым методикам [1,3,5].
Результаты исследования и выводы. В ходе проведенной работы нами было выделено 5 изолятов бактериофагов, активных в отношении бактерий Aeromonas hydrophila.
Выделенные бактериофаги на газоне индикаторной культуры имели округлые, прозрачные, негативные колонии диаметром 0,5-1,0 мм. Литическая активность селекционированных фагов по методу Аппельмана составила от 10-5 до 10-8, по методу Грациа – от
3,0(±0,2) х105 до 2,0(±0,1) х108 фаговых корпускул в 1 мл среды.
Для изучения спектра литической активности выделенных нами фагов мы использовали 15 имеющихся у нас штаммов бактерий Aeromonas hydrophila. Для этого исследуемые бактериофаги в концентрации 107-109 БОЕ/мл наносили на газон изучаемой бактериальной культуры [3]. По результатам исследований, спектр литической активности
выделенных нами бактериофагов составил от 13,3 до 86,7% из 15 имеющихся у нас штаммов бактерий вида Aeromonas hydrophila.
Для изучения температурной устойчивости пробирки с фаголизатом прогревали в
ультратермостате при температуре от 58 оС до 66 оС с интервалом 2 оС в течение 30 минут
[3,6]. По результатам проведённых исследований, все изучаемые бактериофаги являлись термолабильными.
Для определения устойчивости выделенных
бактериофагов к воздействию хлороформа, разведения фагов обрабатывали
хлороформом в соотношении 1:10 в течение 15, 30,
45 минут с обязательной
постановкой контроля и
определения количества
негативных колоний методом агаровых слоев по
Грациа  [3,6].
Исходя из результатов,
отраженных в таблице,
выделенные бактериофаги являются устойчивыми
к воздействию хлороформа в соотношении 1:10 до 45 минут.
Для определения видовой специфичности выделенных бактериофагов были использованы гетерологичные штаммы бактерий родов Yersinia, Pseudomonas, Streptococcus,
Klebsiella, Enterococcus, Citrobacter, Enterobacter, Proteus, Bacillus, полученные из музея
кафедры. Видовую специфичность определяли методом нанесения бактериофагов в концентрации 108-109 БОЕ/мл на газон исследуемой культуры [3,6]. Отсутствие лизиса на
газоне бактерий гетерологичных родов свидетельствовало о видовой специфичности
выделенных бактериофагов по отношению к Aeromonas hydrophila.
Заключение. В ходе проведенной работы были выделены и селекционированы бактериофаги, активные в отношении бактерий Aeromonas hydrophila.
На основе анализа результатов изучения морфологии негативных колоний, литической активности, спектра литической активности, специфичности были отобраны фаги
43-УГСХА и AhD-УГСХА для дальнейшего конструирования диагностического биопрепарата с целью его использования при индикации и идентификации бактерий
Aeromonas hydrophila.

Таблица - Результаты оценки устойчивости бактериофагов

15
30
45

1
Фаг43-УГСХА
2,0х10-8
4,0х10-8 3,0х10-8 1,0х10-8

2
Фаг1п-УГСХА
4,0х10-6
5,0х10-6 4,0х10-6 4,0х10-6

3
Фаг43г-УГСХА
3,0х10-7
5,0х10-7 4,0х10-7 3,0х10-7

4
Фаг13-УГСХА
5,0х10-5
7,0х10-5 6,0х10-5 6,0х10-5

5
ФагAhD-УГСХА
1,0х10-8
3,0х10-8 3,0х10-8 1,0х10-8

№
 
п.п.

Штаммы 
бактериофагов

Титр исследуемых бактериофагов 
по Грациа, БОЕ/мл

Контроль
Время обработки 
хлороформом, мин.

Вестник ветеринарии № 66 (3/2013)
10

ЛИТЕРАТУРА. 1. Адамс М. Бактериофаги; пер. с англ. М., 1961. 521 с. 2. Блинов А.И., Глушанова
Н.А. Аэромонады: выделение, идентификация и дифференциация: уч.-метод. рекомендации. Новокузнецк, 1997. 3. Васильев Д.А., Викторов Д.А., Богданов И.И. Выделение бактериофагов бактерий
Pseudomonas putida и их селекция в целях создания биопрепарата для диагностики псевдомоноза рыб
// Естественные и технические науки. 2011. № 2 (52). С. 79-82. 4. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги
сальмонелл и их применение в ветеринарии: учебное пособие. Ульяновск, 1988. С. 45. 5. Гольдфарб
Д.М. Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. С. 297. 6. Золотухин С.Н. Создание и разработка схем
применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий: автореф. дис. ... д-ра биол. наук. Ульяновск, 2007. 39 с. 7. Методические указания по
санитарно-бактериологической оценке рыбохозяйственных водоемов. Министерство здравоохранения РФ. 27 сентября 1999г. № 13-4-2/1742. 8. Ревенко И.П. Бактериофаги и их использование в
ветеринарной практике. Киев: Урожай, 1978. С. 20-21. 9. Бактерии рода Aeromonas как возбудители
сапронозной инфекции / Н.П. Погорелов [и др.] // Микробиология. 1995. № 4. С. 9-12. 10. Michael
Janda, Sharon L. Abbot. The Genus Aeromonas: Taxonomy, Pathogenicity, and Infection // Clinical
Microbiology Reviews, Jan. 2010. P. 35-73. 11. Mitchell S. Chow, Rouf M. A.. Isolation and Partial
Characterization of Two Aeromonas hydrophila Bacteriophages // Applied Environmental Microbiology,
May 1983. P. 1670-1676.

UDC 619:579

ISOLATION   OF   BACTERIOPHAGES   ACTIVE   AGAINST   AEROMONAS
HYDROPHILA   AND   THEIR   BIOLOGICAL   PROPERTIES
NASIBULLIN, Ildar R., applicant, the Ulyanovsk State Agricultural Academy
VIKTOROV, Denis А., senior research fellow, the Ulyanovsk State Agricultural Academy,
Candidate of Biology
VASILYEV, Dmitry A., Professor of the subdepartment, the Ulyanovsk State Agricultural
Academy, Doctor of Biology
NAFEEV, Alexander A., head of division, the Center of State Sanitary and Epidemiological
Surveillance, Doctor of Medicine
SHVIDENKO, Inna G., professor, the Razumovsky Saratov State Medical University, Doctor of
Medicine
Address: 1, Novy Venets, Ulyanovsk, Ulyanovsk Oblast, Russia, 432063. Tel. +7-908-477-55-73.
E-mail: viktorov_da@mail.ru

Keywords: bacteriophages, Aeromonas hydrophila, lytic activity, diagnosis, specificity.

Summary. This article presents the results of the bacteriophage isolation and study of
basic biological properties of bacteriophage active against bacteria the species Aeromonas
hydrophila. Tabl. 1. Ref. 11.

BIBLIOGRAPHIC REFERENCES. 1. Adams M. Bakteriofagi. Translated from English. M., 1961. 521 p.
2. Blinov A.I., Glushanova N.A. Aeromonady: vydelenie, identifikatsiya i differentsiatsiya: Guidelines.
Novokuznetsk, 1997. 3. Vasilev D.A., Viktorov D.A., Bogdanov I.I. Vydelenie bakteriofagov bakteriy
Pseudomonas putida i ikh selektsiya v tselyakh sozdaniya biopreparata dlya diagnostiki psevdomonoza ryb
// Estestvennye i tekhnicheskie nauki. 2011. Iss. 2 (52). P. 79-82. 4. Ganyushkin V.Ya. Bakteriofagi sal'monell
i ikh primenenie v veterinarii: uchebnoe posobie. Ulyanovsk, 1988. P. 45. 5. Goldfarb D.M. Bakteriofagiya.
M.: Medgiz, 1961. P. 297. 6. Zolotukhin S.N. Sozdanie i razrabotka skhem primeneniya diagnosticheskikh
biopreparatov na osnove vydelennykh i izuchennykh bakteriofagov enterobakteriy: Author's Abstract of
Dis. ... Doctor of Biol. Ulyanovsk, 2007. 39 p. 7. Metodicheskie ukazaniya po sanitarno-bakteriologicheskoy
otsenke rybokhozyaystvennykh vodoemov. Ministry of Public Health. The Russian Federation. 09/27/
1999.. No 13-4-2/1742. 8. Revenko I.P. Bakteriofagi i ikh ispol'zovanie v veterinarnoy praktike. Kiev:
Urozhay, 1978. P. 20-21. 9. Bakterii roda Aeromonas kak vozbuditeli sapronoznoy infektsii / N.P. Pogorelov
[et al.] // Mikrobiologiya. 1995. Iss. 4. P. 9-12. 10. Michael Janda, Sharon L. Abbot. The Genus Aeromonas:
Taxonomy, Pathogenicity, and Infection // Clinical Microbiology Reviews, Jan. 2010. P. 35-73. 11. Mitchell
S. Chow, Rouf M. A.. Isolation and Partial Characterization of Two Aeromonas hydrophila Bacteriophages
// Applied Environmental Microbiology, May 1983. P. 1670-1676.

Материалы международной научно-практической конференции (11.02.2013 - 24.03.2013 г.).Ч. 2

УДК: 619:616.34-002:636.598
ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ
РЕОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ КУР

С.В. РЯБИНИН
Ключевые слова: ИФА-диагностикум, антитела, куры, реовирус, инфекция, эпизоотологический мониторинг.

В статье приведены результаты разработки ИФА-диагностикума для
контроля реовирусной инфекции кур в птицеводческих хозяйствах Украины и его диагностической ценности. Библ. 6. Рис. 2.
Реовирусная инфекция (АРВИ – авиреовирусная инфекция, или АВРІ, или теносиновит
кур) регистрируется во всех странах мира с развитым птицеводством и наносит ощутимые
экономические убытки, которые связаны с гибелью птицы (от 5 до 50%) или повышенной
выбраковкой (от 2 до 20%), снижением массы тела на 30 % и яйценоскости – на 15 - 30%.
Заболевание впервые было зарегистрировано в США. На сегодняшний день оно наблюдается во всех птицеводческих хозяйствах мира среди птицы мясной продуктивности,
в том числе и в предприятиях Украины [1,4,5].
В связи с этим, необходимы обеспечение отрасли птицеводства высококачественными биопрепаратами и разработка новых методов контроля за эпизоотической
ситуацией в хозяйствах [4]. Для ретроспективной диагностики реовирусной инфекции
(теносиновита кур) используют реакцию нейтрализации (РН), реакцию диффузной
преципитации (РДП) и иммуноферментный анализ (ИФА) [2,3]. Что касается последнего
диагностикума, то в Украине широко распространены тест-системы производства фирм
Голландии, Германии, Франции, США, России и других стран мира [6]. Отечественные
же тест-системы, к сожалению, отсутствуют или их очень незначительное количество.
Поэтому, на сегодняшний день разработка данной тест-системы остается актуальной.
Цель исследования - разработать тест-систему на основе непрямого метода иммуноферментного анализа для определения антител к реовирусу в сыворотках крови
кур и провести ее производственную проверку на активность и специфичность.
В связи с этим, необходимо было решить такие задачи:
 1. Получить очищенный антиген реовируса птицы для ИФА тест-системы и специфическую гипериммунную сыворотку кур.
 2. Определить чистоту полученного вирусного материала.
 3. Выбрать оптимальное рабочее разведение сыворотки и определить коэффициент
уравнения линейной регрессии.
 4. Провести производственную проверку разработанной тест-системы и установить
ее диагностическую ценность.
Материалы и методы исследования. В исследованиях был использован местный
штамм "Br-06" реовируса, который был выделен от клинически больных цыплят-бройлеров в 2006 году в одном из фермерских хозяйств Харьковской обл., идентифицирован в
ФГУ ВНИИЗЖ (г. Владимир). Штамм депонирован в Государственном научно-контрольном институте биотехнологии и штаммов микроорганизмов (ГНКИБШМ) (г. Киев).
При очистке вируса использовали: центрифугу РС-6 и ультрацентрифугу МSE; диспергатор УЗДН-А – для проведения ультразвуковой обработки вирусного материала.
Электронную микроскопию полученных образцов проводили с помощью электронного микроскопа ПЕМ-125К при ускорительном напряжении 75 kV.
Исследуемые сыворотки кур получали из птицеводческих хозяйств. Измерение их
оптической плотности проводили на ридере Star Fax-2100.
Результаты исследования и выводы. Предварительную очистку реовируса проводили 7%-ным полиэтиленгликолем (ПЕГ 6000) и обработкой ультразвуком (22 кГц).
На завершающем этапе вирус осаждали через раствор 30%-ной сахарозы при 70000 g
на ультрацентрифуге в течение 3 час., полученный осадок ресуспензировали в
трисульфатном (TSE) буфере.

РЯБИНИН Сергей Викторович - младший научный сотрудник лаборатории профилактики
заболеваний птиц и молекулярной дигностики Института животноводства НААН Украины,
аспирант
Адрес: ул. Ленина, 20, п. Борки, Змиевского р-на, Харьковской обл., Украина, 63421.
Тел. 097-269-92-74. Е-mail: vet-doctor@ukr.net

Вестник ветеринарии № 66 (3/2013)
12

Полученный реовирусный антиген сенсибилизировали в планшетах в концентрации
0,02-0,05 мг/мл и проводили непрямой вариант ИФА с положительными референтными
сыворотками, титр которых составлял не менее 1:3200, что указывало на достаточную
активность антигена.
В специфичных гетерологичных сыворотках, которые входят в состав коммерческих
наборов для определения антител к инфекционному бронхиту кур, синдрому снижения
яйценоскости, микоплазмозу, ньюкаслской болезни, болезни Гамборо, не выявлено положительных и сомнительных титров к возбудителю реовирусной инфекции, что
указывает на специфичность полученного антигена.
Полученный таким методом очищенный и концентрированный антиген реовируса
кур был использован нами для разработки тест-системы.
Для получения специфичных гипериммунных сывороток к шт."Br-06" мы проводили
иммунизацию цыплят 30-дневного возраста очищенным антигеном реовируса внутримышечно в объеме 0,5 см3. Интервал между иммунизациями составлял 14 дней. Последнюю иммунизацию цыплят проводили очищенным антигеном реовируса в сочетании с
Монтанидом ІSA-70. Через 14 дней после заключительной иммунизации титр в ИФА
методом последовательных разведений составил 1:3200.
Отрицательную сыворотку крови получали от цыплят из благополучных по инфекционным заболеваниям (пастереллезу, сальмонеллезу) птицеводческих хозяйств, в которых не проводили вакцинацию против реовирусной инфекции кур.
Выбор рабочего разведения сыворотки и определение коэффициента уравнения линейной регрессии проводили согласно Методическим указаниям ФГУ "ВНИИЗЖ" [3].
Наиболее приемлемым (дающим стабильно достоверные результаты)  для постановки
реакции в одном разведении сыворотки составило разведение 1:400.
Используя математически выраженную линейную зависимость для lg T и lg S/Р, которая имеет вид lg T=А+В хlg S/Р, было выведено уравнение линейной регрессии для
выбранного нами разведения 1:400 - lg T=3,5135+1,0377хlg S/Р.
Для объективной оценки иммунного статуса кур установлен положительно-негативный порог (ПНП). Исследованные сыворотки вначале прошли тестирование с помощью
ИФА-набора фирмы "BioChek" (Нидерланды), у которой ПНП соответствует 1352, для
нашего набора ("ИП НААН") - 465 (рисунок 1).

   Разработанный нами диагностикум на основе ИФА был использован для обследования племенных и товарных птицеводческих хозяйств Харьковской и Донецкой областей в отношении реовирусной инфекции кур и цыплят-бройлеров.
Антигенную активность вакцины, напряженность и продолжительность поствакцинального иммунитета изучали на поголовье ремонтного молодняка кур кросса "Ломанн
белый"  возраста 100 дней и породы борковская цветная возраста 120 дней, вакцинированном инактивированной вакциной против АРВИ.
С помощью тест-системы ИФА "ИП НААН" до вакцинации у исследованной птицы
антител к реовирусу не было выявлено, а после вакцинации  титры антител у кур колебались от 1020 до 3955 и держались на высоком уровне на протяжении 11-12 месяцев продуктивного периода, после чего постепенно снизились до 1278 - 987 (рисунок 2).
На разработанный нами "Способ очистки и концентрирования реовируса" получен
Патент Украины (№73381). Диагностикум прошел комиссионные испытания в Государственном научно-контрольном институте биотехнологии и штаммов микроорганизмов

0

2000

4000

6000

8000

10000

титры антител, ИФА

30
60
90
120
150
180
   дни наблюдений

ПНП
BioChek

0

500

1000
1500

2000

2500
3000

3500

титры антител, ИФА

30
60
90
120
150
180
дни наблюдений

ПНП
ИП НААН

Рисунок 1 - Иммуномониторинг привитых кур против АРВИ,
проведенный двумя тест-системами ИФА