РЕГУЛЯЦИЯ АНГИОГЕНЕЗА В ЗОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИНФАРКТА МИОКАРДА ПУТЕМ ПРИМЕНЕНИЯ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

criteria for inclusion in the control group were: age 40-85 years, 
normal blood pressure, BMI within 18,5-25,0.
A survey was carried out with all research participants . The 
questionnaire 
presented 
questions 
on 
risk 
factors. 
After 
the 

questioning, all participants underwent the following survey methods: 
measurement of BMI, SBP, DBP, respiratory rate, heart rate, determining 
the 
level 
of 
glucose, 
glycosylated 
hemoglobin 
determination, 

investigation of blood coagulation  (PTI, the amount of fibrinogen, 
platelet 
aggregation, 
aPTT), 
biochemistry 
parameters 
of 
blood  

(cholesterol, 
triglycerides, 
ALT, 
AST, 
total 
bilirubin, 
direct 

bilirubin, urea, creatinine, total protein), ECG and Doppler sonography 
of the brachiocephalic trunk. Determination of the markers NSE, GFAP, 
MMP-9 was conducted at the Laboratory of Collective Use of the 
Karaganda State Medical University. The lysed samples were excluded 
from the study. To determine the markers, the following sets of 
reagents were used: Human GFAP ELISA (BioVendor), Human MMP-9 ELISA 
(Bender MedSystems). Enzyme immunoassay was performed on the robot 
Tecan Evolizer 100. The results were evaluated: for NSE in mg / l, for 
GFAP and MMP-9 ng / ml. Statistical processing of the obtained data 
included determination of the correlation coefficients and the 
development of a logistic regression model, describing the dependence 
of stroke and 35 studied parameters was developed.
Results. The obtained mathematical model allows: to determine the risk 
of stroke in a patient or a tendency of stroke rise in social groups,
to explore the character of change in the probability of occurrence of 
stroke according to operating factors, to assess the degree of 
influence of the studied factors on the probability, to predict the 
occurrence of stroke for given levels of the factors, to determine the 
optimal levels of factors to indicate required values of parameters. 
Processing of the results of laboratory studies with markers would 
change predictive model.
Conclusion. The development of predictive technique «InRisk» and the 
study of
markers NSE, GFAP and MMP-9 allowed to implement
early 

diagnostics of asymptomatic brain damage in patients with the metabolic 
syndrome. This prevents them from developing acute stroke.
REFERENCE:
1. Методика прогнозирования вероятности возникновения инсульта., Г. Т. 
ЕсенбаеваС. Б. Жаутикова  Ф. А. Миндубаева  И. А. Кадырова, Журнал 
неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова
2014; 3: 51-54

2. 
Microstructural 
Brain 
Tissue 
Damage 
in 
Metabolic 
Syndrome 

MichielSala, Albert de Roos, Annette van den Berg1, Irmhild AltmannSchneider1, P. ElineSlagboom, Rudi G. WestendorpDiabetes Care October 2, 
2013, doi: 10.2337/dc13-1160
DOI:10.12737/12421

РЕГУЛЯЦИЯ АНГИОГЕНЕЗА В ЗОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИНФАРКТА 
МИОКАРДА ПУТЕМ ПРИМЕНЕНИЯ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ 

СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

1В. Ю. Михайличенко, 1С.А. Самарин.

1Медицинская академия имени С. И. Георгиевского, ФГАОУ ВО «КФУ имени В. 

И. Вернадского» (Республика Крым, Российская Федерация)

pancreas1978@mail.ru

Направление использования стволовых клеток в кардиологии интенсивно 
разрабатывается в последние 5-10 лет благодаря тому, что в 1999 году 
появились работы, в которых описывается культивирование кардиомиоцитов 
(КМЦ) из мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток костного мозга 
(ММСК). В результате экспериментальных работ было доказано, что ММСК 
костного мозга человека обладают способностью стимулировать рост новых 
сосудов (ангиогенез) и усиливать перфузию ишемизированных участков 
миокарда [1]. Однако является ли этот эффект прямым действием ММСК или 
опосредованным, через продукцию цитокинов и ростовых факторов –
остается спорным. Клеточная терапия на основе стволовых клеток является 
одним из наиболее перспективных и инновационных направлений развития 
медицины и уже сегодня позволяет получить качественно новые клинические 
результаты в различных областях [2]. Целью нашей работы являлось
экспериментальное 
изучение 
возможности 
применения 
трансплантации 

мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток (ММСК) для коррекции 
эндотелиальной дисфункции и стимуляции неоангиогенеза при остром 
инфаркте миокарда (ИМ).
Материалы и методы. Исследования проводились на 90 половозрелых крысахсамках
линии Вистар-Кайота. Животные были разделены на 3 группы (по 30 

животных в каждой): 1-я группа – животные с ИМ не получали какого-либо 
лечения, 2-я группа –
животные, которым, после моделирования ИМ 

выполняли трансплантацию ММСК путем внутривенного введения, 3-я группа 

- животные, которым, после моделирования ИМ, выполняли трансплантацию 
комитированных 
ММСК 
(комитацию 
производили 
использованием 
5
азацитидина). 
Трансплантация 
выполнялась 
через 
1 
сутки 
после 

моделирования ИМ. Для мониторинга эндотелиальной дисфункции определяли 
NO
(суммарную 
концентрацию 
нитрат 
и 
нитрит 
ионов), 

концентрацию фактора 
роста 
эндотелия 
сосудов 
(VEGF), 
уровень 

эндотелина-1 и активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в плазме крови у 
крыс. Так же изучали показатели перекисного окисления липидов, 
аденозиндезаминазу эритроцитов. 
Результаты.
Кардиомиопластика 
сопровождалась 
снижением 
активности 

ферментов аденозиндезаминазы эритроцитов и ЛДГ крови, стабилизацией 
развития 
рубцовой 
деформации 
миоцитов. 
Торможение 
пероксидации 

мембранных 
липидов 
и 
напряжение 
не 
ферментативного 
звена 

антиоксидантной защиты является хорошим прогностическим критерием 
восстановления 
функциональной 
активности 
поврежденного 
миокарда. 

Эффективность ангиогенеза подтверждена возрастанием концентрации оксида 
азота (NO) в сроки от 1 часа до 7 суток по сравнению с группой 
животных, не получавших какого-либо лечения (максимальная концентрация 
наблюдалась на 1 сутки и составила 1,26±0,03 мкг/мл во второй 
экспериментальной группе против 1,12±0,05 мкг/мл в первой) и VEGF
(трансплантация во второй и третьей группах вызывала стойкое повышение 
данного показателя на протяжении всего периода наблюдений, оставаясь 
выше показателей первой группы даже на 30-е сутки эксперимента 132,74±19,87 пг/мл  и 131,22±18,45 пг/мл в 2 и 3 группах, против 

89,74±21,38 пг/мл в первой). Противоположная картина наблюдается при 
изучении 
содержания 
антагониста 
предыдущих 
биологически 
активных 

веществ – эндотелиина 1. Концентрация последнего возрастает и достигает 
максимума на 6 часу после моделирования ИМ во второй (12,8±0,6 моль/мл) 
и третьей (12,5±0,5 моль/мл)   группах соответственно, а затем 
постепенно снижается и нормализуется к 1 месяцу. В 1 группе наблюдается 
повышенное содержание эндотелина 1 до конца 1 суток после моделирования 
ИМ (12,9±0,4 моль/мл) и оно значительно выше до конца опыта по 
сравнению как со 2-й так и с 3-й группами.
Особенно впечатляющие результаты получены при исследовании удельного 
количества сосудов на 100 тыс. мкм2. Так у крыс без лечения данный 
показатель составил 10,21±1,26. После трансплантации изучение такой же 
площади препарата привело к обнаружению более чем шестикратного 
увеличения количества сосудов 68,2±4,64 и 59,35±4,11 во второй и 
третьей 
экспериментальной 
группе 
соответственно. 
Подтверждена 

эффективность 
применения 
комитованных 
ММСК 
и 
ММСК 
при 
лечении 

экспериментального инфаркта миокарда. 
ЛИТЕРАТУРА
1.
Михайличенко, В.Ю. Оценка влияния клеточной кардиомиопластики 

мезенхимальными стволовыми клетками (МСК) на показатели метаболической 
активности кардиомиоцитов при экспериментальном инфаркте миокарда
/ 

В.Ю.Михайличенко, С.А. Самарин // Фундаментальные исследования. –
2015. –
№ 1. –
С. 789-792. 

2.
D. Orlic. Stem cells for myocardial regeneration / D. Orlic, J. 

M. Hill, A. E. Arai // Circ. Res. - 2002. - Vol. 91. - P. 1092-1102.

REGULATION OF ANGIOGENESIS IN ISCHEMIC MYOCARDIUM USING 

MULTIPOTENT MESENCHYMAL STEM CELLS OF DIFFERENT PHENOTYPE 

DURING THE EXPERIMENT

1Michaylichenko V. Yu., 1Samarin S.A.

1Medical Academy named after S.I. Georgievskiy of the Federal Autonomous 
Educational Institution of Higher education, «Crimea Federal University 
named after V.I. Vernadsky» , The Ministry of Education and Science of 

the Russian Federation, Russia, Republic of Crimea.

pancreas1978@mail.ru

Background: Stem cells usage in cardioilogy has been investigated 
actively for the last 5 -10 years due to the works that appeared in 
1999 describing the cultivation of cardiomyocytes (CMC) from Mesechymal 
Stem Cells of the bone marrow (MSC). The result of experimental studies 
of the bone marrow MSC proved to have the ability to stimulate the 
growth of new vessels (angiogenesis) and increase the perfusion of 
ischemic areas of myocardium [1]. The question of whether this effect 
presents a direct or indirect action of the MSC, through the production 
of cytokines and growth factors, remains debatable. The concept of 
regenerative medicine based on usage of  own stem stells for repairing 
damaged tissues, vessels and organs, has been widely introduced into 
practical medicine. Cellular therapy based on the stem cells presents 

one of the most perspective and innovative directions of development in 
medicine
and allows to get new qualitative
clinical results in 

different areas [2]. The current experimental study aims at revealing 
the potential of the Mesenchymal Stem Cells (MSCs) transplantation 
practice for the correction of endothelial dysfunction and stimulation 
of neoangiogenesis in acute myocardial infarction.
Methods: Ninety adult female Wistar - Kayota rats (mean body weight 280
± 20 g) were divided into three groups (30 animals each). Animals with 
Myocardial Infarction (MI), which did not receive any treatment, 
represented group 1 (n=30). Group 2 contained animals which after MI 
modeling underwent MSC transplantation by intravenous injection (n=30). 
And Group 3, animals which after MI modeling underwent committed MSC 
transplantation by intravenous injection (n=30). The treatment methods 
were applied 1 day after MI modeling. The monitoring of endothelial 
dysfunction was determined by NO (total concentration of Nitrate and 
Nitrite ions), the concentration of VEGF (Vascular endothelial Growth 
Factor), levels of Endothelin 1 (ET -1) and Lactate dehydrogenase (LDH) 
in the blood plasma of rats. Lipid peroxidation and erythrocyte 
adenosine deaminase were examined, gas transmission function of the 
blood also estimated.
Results: The cardiomyoplasty was accompanied by a decrease in the 
activity of adenosine deaminase enzymes
of erythrocytes and blood 

lactate dehydrogenase, as well as by a decreased scar deformation of 
the myocytes. Inhibition of membrane lipid peroxidation and enzymatic 
voltage level of antioxidant defense are good predictors of the 
recovery of damaged myocardium functional activity.
The effectiveness of angiogenesis is confirmed by an increase in the 
concentration of Nitric oxide (NO) in the period from 1 hour to 7 days 
compared to animals not receiving any treatment
(the maximum 

concentration was observed at
1 day and was 1.26±0,03 µg/ml in the 

second experimental group against 1,12±0,05 mg/ml in the first) 
and VEGF (transplantation in the second and third groups caused a 
persistent increase in this indicator during the whole observation 
period, while remaining higher than in the first group, even on the 
30th day of the experiment - 132,74±19,87 PG/ml
and 131,22±18,45 PG/ml

in 2 and 3 groups, against 89,74±21,38 PG/ml
in the first). The 

situation is to the contrary when studying the content of antagonist of 
previous bioactive substances –
Endothelin 1. Its concentration 

increases till 6 hours after MI modeling in the 2nd (12,8±0,6 mol/ml) 
and 3rd
(12,5±0,5 mol/ml)   groups respectively, and then gradually 

decreased and normalized to 1 month. In the 1st group,
increased 

contents of endothelin 1 is observed till the end of the 1st day after 
MI (12,9±0,4 mol/ml) and it is much higher till the end of the 
experiment as compared with 2nd and 3rd group.  
The most remarkable results were obtained while investigating specific 
quantity of vessels on 100 thousand mkm2.  So, in rats without 
treatment, the ratio was 10,21±1,26. After transplantation, the study 
of the same area of the drug led to the discovery of more than a six 
fold increase in the number of vessels, 68,2±4.64 and 59,35±4,11 in the 
second and third experimental group, respectively.

LITERATURE
1.
Evaluation of the effect of cellular cardiomyoplasty mesenchymal 

stem cells (MSC) on the indicators of the metabolic activity of 
cardiomyocytes 
in 
experimental 
myocardial 
infarction/ 
Y. 
V. 

Michaylichenko, S. A. Samarin // Fundamental research. – 2015. – No. 1. 
– P. 789-792.
2.
Stem cells for myocardial regeneration / D. Orlic, J. M. Hill, A. 

E. Arai // Circ. Res. - 2002. - Vol. 91. - P. 1092-1102.
DOI:10.12737/12422

РОЛЬ ОЛИГОПЕПТИДАЗЫ В В МЕХАНИЗМАХ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА

А.Г. Михайлова, Л.Д. Румш

Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова 
Российской академии наук; 117997 Москва, ГСП-7, ул. Миклухо-Маклая, 

16/10

anna.mikhailova@ibch.ru

Ключевые слова: антимикробные пептиды, олигопептидаза В, Serratia 
рroteamaculans, мелиттин.
В настоящее время широкое распространение бактериальных патогенов, 
резистентных 
к 
большинству 
известных 
лекарственных 
средств, 

представляет серьезную угрозу глобального масштаба. Поэтому возросла 
необходимость 
поиска 
новых 
потенциальных 
антимикробных 
агентов. 

Антимикробные пептиды (АМП) представляются многообещающей альтернативой 
используемым в настоящее время антибиотикам. АМП являются частью 
системы 
врожденного 
иммунитета, 
защищающей 
организм 
хозяина 
от 

патогенных бактерий. Они широко распространены как среди позвоночных, 
так и беспозвоночных. 
Структура АМП высокое содержание остатков положительно заряженных 

аминокислот  и, в особенности, последовательностей из двух и более 
остатков Arg/Lys, а также последовательностей Arg(Lys)-Pro [2], делает 
их потенциальными субстратами  олигопептидазы В (OpdB). OpdB
–
это 

трипсиноподобная 
сериновая 
пептидаза, 
присутствующая 
в 

грамотрицательных патогенных бактериях, а также в одноклеточных 
эукариотах: трипаносомах и лейшманиях. OpdB являются важными факторами 
вирулентности 
при 
трипаносомных 
инфекциях 
и 
лейшманиозах 
[3].  

Физиологическая роль OpdB бактерий до сих пор остается невыясненной; ее 
природные субстраты не обнаружены [3].
Цель исследования: изучение роли
олигопептидазы В
в механизмах 

нарушения 
врожденного 
иммунитета 
грамотрицательными 
патогенными 

микроорганизмами. 
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Рекомбинантный фермент PSP получен по разработанной нами методике [4]. 
Мониторинг гидролиза 
мелиттина 
проводили с использованием ВЭЖХ. 

Инкубировали мелиттин (50–90 мкМ) с PSP (5–30 нМ) в 0,1 М Tris-HClбуфере, pH 8,0; при 25°, собирая аликвоты инкубационной смеси вплоть до 
полного гидролиза субстрата. Анализ инкубационных смесей с помощью ВЭЖХ 
(колонка Luna C8, 2 x 250 мм; «Phenomenex», США); 0,1%-ный раствор ТФУ