Анализ ассоциаций полиморфизма С1159А гена интерлейкина 12В с сахарным диабетом 1 типа в этнических группах Башкортостана

4/2007

Анализ ассоциаций полиморфизма С1159А
гена интерлейкина 12В с сахарным диабетом
1 типа в этнических группах Башкортостана

Ж.Р. Балхиярова, Т.В. Моругова*, Д.Ш. Авзалетдинова*, О.Е. Мустафина

Институт биохимии и генетики УНЦ РАН;
*Башкирский государственный медицинский университет, Уфа

Генетика

СС

ахарный диабет 1 типа (СД 1) – одна из наиболее
острых научных и медико-социальных проблем.
Существуют различные точки зрения на этиологию и патогенез заболевания. Известно, что СД 1 развивается при воздействии факторов окружающей
среды на генетически предрасположенный организм,
при этом вклад наследственности в развитие заболевания составляет 60–80% [1]. Заболевание развивается в
результате аутоиммунной деструкции β-клеток поджелудочной железы. Критическую роль в инициации их
гибели играют цитокины. При СД 1 происходит увеличение выработки интерлейкина 12 (ИЛ-12) активированными макрофагами. Этот процесс провоцирует
дифференцировку Т0-хелперов в Т1-хелперы, которые
посредством цитокинов активируют макрофаги и цитотоксические Т-лимфоциты, а последние, в свою очередь, способствуют гибели β-клеток и развитию абсолютного дефицита инсулина. 
На лабораторных животных была показана роль
ИЛ-12 в развитии СД 1. В исследованиях, которые проводили на изолированной поджелудочной железе
крыс и мышей, выявлено, что ИЛ-12 подавляет выработку инсулина у здоровых животных [2]. A. DavoodiSemiromi  и соавт. продемонстрировали взаимосвязь
между уровнем экспрессии гена ИЛ12 и степенью
деструкции инсулинпродуцирующих клеток у NODмышей (non-obese diabetic mice – экспериментальная
модель аутоиммунного диабета) [3]. 
ИЛ-12 состоит из двух полипептидных цепей, со единенных между собой дисульфидными связями:
тяжелая цепь р40 (40кДа) и легкая цепь 35р (35кДа).
Ген, кодирующий субъединицу р40 (ИЛ12B), локализован на хромосоме 5q31.1–q33.1 и ограничен регионом
30 кб, а ген субъединицы р35 (ИЛ12А) – на хромосоме
3 (3р12–q13.2). 
При обследовании семей больных СД 1 показано
строгое неравновесие по сцеплению для аллеля А
полиморфизма С1159А. Однако выявлена взаимосвязь аллеля С и генотипа AC с поздним началом
заболевания [4, 5]. Согласно результатам отдельных
работ, аллель А ассоциирован с более высоким уровнем экспрессии мРНК гена ИЛ12 [6, 7, 8]. В частности,

уровень экспрессии мРНК клеточной линии с генотипом АА выше, чем линии с генотипом СС [6]. В связи
с этим полагают, что полиморфизм С1159А гена
ИЛ12B имеет функциональное значение. Однако
такая точка зрения не подтверждается результатами
другого исследования [9]. 
Цель настоящего исследования заключалась в анализе ассоциаций полиморфизма С1159А гена ИЛ12B c
развитием СД 1 в трех этнически однородных группах
(русские, башкиры, татары), проживающих на территории республики Башкортостан. 

Объект и методы исследования

В исследовании приняли участие 313 пациентов в
возрасте от 7 до 71 года (татар – 127, русских – 110, башкир – 66), в том числе мужчин – 155, женщин – 158.
Возраст начала заболевания варьировал от 2 до 61 года.
Выборка была сформирована из больных СД 1, находящихся на диспансерном учете в поликлиниках города
Уфы и районов республики Башкортостан. В группу
сравнения были включены практически здоровые
лица, не родственные между собой и не имеющие родственников больных СД. 
ДНК выделяли методом фенольно-хлороформной экстракции [10]. У всех пациентов, включенных
в исследование, а также у всех лиц группы сравнения
был исследован полиморфизм С1159А гена ИЛ12B.
Анализ полиморфизма С1159А гена ИЛ12B осуществляли методом полимеразной цепной реакции,
последовательности праймеров, условия ПЦР и процедура анализа продуктов амплификации соответствовали приведенным ранее [11]. Статистическую
обработку материалов проводили с использованием
программ Microsoft Excel 2000, Statistica (v 5.5).
Соответствия эмпирического распределения частот
генотипов теоретически ожидаемому распределению оценивали по критерию χ2 [12, 13]. Сравнение
групп по частотом аллелей и генотипов проводили с
использованием точного двустороннего критерия
Фишера. Относительный риск заболевания рассчитывали как отношение шансов (OR – odds ratio) [14].