HLA-маркеры сахарного диабета 1 типа в Тувинской популяции

Проблемы генетики и патогенеза 

H
L
A
м
а
р
к
е
р
ы 
с
а
х
а
р
н
о
г
о 
д и а б е т а 
1 
т и п а 

в 
Т у в и н с к о й 
п о п у л я ц и и 

*И.В. Осокина, М.Н. Болдырева, **Р.К. Ширшина, И.А. Гуськова, 
| О.В. Богатова, Е.Г. Грудакова, Д.О. Кабдулова, Л.П. Алексеев 

Гэсударственный научный центр - Институт иммунологии (дир. - акад. РАМН Р. М. Хаитов) МЗ РФ, Москва, 
*Институт медицинских проблем Севера (дир. - проф. В. Т. Манчук) СО РАМН, Красноярск, 

**Окружная больница, Кызыл 

С

ахарный диабет 1 типа (СД 1) — аутоиммунное заболевание, существенная роль в развитии которого принадлежит 
наследственной 
предрасположенности. Установление 
генетических 
факторов предрасположенности к СД 1 и патогенетически значимых 
маркеров заболевания 
имеет 
большое значение для выявления лиц, входящих в 
группу повышенного риска развития болезни, для 
прогноза течения СД 1, а также для выяснения 
генетически обусловленных механизмов патогенеза 
заболевания. Последнее десятилетие ознаменовано 
новым качественным прорывом в изучении генетики СД 1: открыто большое число генов, имеющих 
значительную ассоциацию с заболеванием [4], однако ведущими по-прежнему являются гены главного 
комплекса гистосовместимости (HLA) [5]. 

Важная роль HLA-молекул класса II в обеспечении предрасположенности / устойчивости к СД 1 объясняется функцией этих 
молекул. Специфический иммунный ответ инициируется, когда 
Т(С04+)-лимфоцит «узнает» процессированный фрагмент антигена (пептид), связанный с молекулой класса II. Одна из гипотез 
предполагает, что высокий риск развития заболеваний, ассоцированный с определенными аллелями HLA, объясняется тем, что 
они представляют аутоантигенные пептиды с высокой аффинностью связывания [6]. Сила сродства между разнообразными 
молекулами класса II и гипотетическими диабетогенными пептидами может определять результат этого взаимодействия: «отбой» 
или запуск механизмов «диабетической аутоиммунное™». 

Предложенный в 1987 г. К. Mullis и F. Faloonaary [3] метод 
полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием термостабильной ДНК-полимеразы и применение его в ДНК-генотипировании аллелей HLA [2] открыл перспективы в повышении 
эффективности изучения генетической предрасположенности 
к СД1, позволил выявлять случаи более высокого относительного риска развития патологии, а также проводить обследование 
здоровых сибсов для прогноза развития заболевания [1]. 

Целью настоящего исследования явился анализ 
ассоциаций 
генетических маркеров 
предрасположенности и резистентности к СД 1, локализованных 
в системе HLA, с помощью ДНК-генотипирования 
полиморфных аллелей этой системы в тувинской 
популяции. 

О б ъ е м и м е т о д ы и с с л е д о в а н и я 
Республика Тува расположена на юге Сибири, на границе 
с Монголией. Коренное тувинское население (монголоиды) 
составляет 210 тыс. Среди тувинцев больные СД 1 встречаются 
с частотой 0.01%, т.е. в 5 раз реже, чем у русских, проживающих 
в той же географической зоне. 

Обследованы 15 тувинцев, больных СД 1. Средняя продолжительность диабета равнялась 7.8±4.3 года. Все пациенты получали инсулинотерапию. Контрольную группу составили 164 произвольно набранных доноров-тувинцев без аутоиммунных заболеваний и отягощенной наследственности по ним. 

HLA-типирование больных СД1 и здоровых представителей 
тувинской национальности выполнялось по трем генам: 
DRB1 (13 специфичностей на уровне «низкого разрешения» — 
01,03,04,07,08,09,10,11,12,13,14,15,16; 
DQA1 (8 аллелей 
0101,0102,0103,0201,0301,0401,0501,0601) и DQB1 (13 аллелей 0201,0301,0302,0303,0304,0305,04,0501,0502/4,0503,0601,0602-8) 
методом мультипраймерной полимеразной цепной реакции [1]. 
Идентификацию продуктов амплификации проводили после 
электрофореза в 3% агарозном геле и окрашивания продуктов 
амплификации бромистым этидием. 

Частоту аллелей и расчет 3 локусных гаплотипов выполняли 
при помощи компьютерной программы «Арлекин» (Excoffer, 
Schneider и Kuffer). Относительный риск (ОР) заболеваемости 
вычисляли по методу Woolf. Статистическую достоверность 
отличия ОР от 1 (р) определяли по точному двустороннему 
критерию Фишера с поправкой Бонферрони на количество 
исследованных аллелей. 

Р е з у л ь т а т ы и и х о б с у ж д е н и е 

При исследовании DRB1-специфичностей установлено (табл. 1), что наиболее частотным у лиц с 
СД1 был DRBP03 (26.7% у больных СД 1 против 6.1% 
в 
контрольной 
группе, 
относительный 
риск, 
ОР=6.3, р<0.05). Другие различия частот оказались 
недостоверными. 

При исследовании 
DQA1 аллелей в тувинской 
популяции (контрольная группа) и в группе больных 
диабетом наблюдались значительные отличия (табл. 2) 
в частоте аллелей DQA 1*0501 (50% против 24.4%). Для 
этого аллеля характерен и самый высокий показатель 
относительного риска (ОР=5.11, р<0,05), т.е. данный 
ген может рассматриваться как маркер предрасположенности к СД 1 в тувинской популяции. Реже у 
больных СД 1 по сравнению со здоровыми тувинцами обнаруживали аллели DQA1*0102 и DQA1*0101, 
эти различия недостоверны. 

8