Диагностика нематод - возбудителей болезней сельскохозяйственных животных

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ

Государственное образовательное учреждение 
высшего профессионального образования

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ 
ПРИКЛАДНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ 
(МГУПБ)

Кафедра инфекционных и паразитарных болезней

ПАРАЗИТОЛОГИЯ

ДИАГНОСТИКА НЕМАТОД-ВОЗБУДИТЕЛЕЙ БОЛЕЗНЕЙ 
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕНННЫХ ж и в о т н ы х

Учебно-методическое пособие

для студентов специальностей 110501 -  Ветеринарно-санитарная 
экспертиза, 111201 -  Ветеринария и направления подготовки уровня
бакалавриата 
110500 -  Ветеринарно-санитарная экспертиза

МОСКВА 2009

Составитель: Н.Е. Косминков, проф.

В пособии предназначено для выполнения лабораторных работ студентами ветеринарно-санитарного факультета.
Пособие может быть использовано при выполнении курсовых, дипломных, научных исследований, а также при прохождении студентами производственной ветеринарной практики в животноводческих хозяйствах и на мясоперерабатывающих предприятиях.

Утверждено УМС МГУПБ.

© МГУПБ, 2009

ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ НЕМ АТОДЫ  
М орфология, биология развития нематод

Большое разнообразие организмов, относящихся к нематодам или круглым 
червям, представлены в природе как свободноживущими, так и паразитическими видами.
Свободноживущие нематоды являются обитателями почвы, водоемов с 
пресной и соленой водой.
Паразитические нематоды приспособились к обитанию в различных органах и тканях человека, животных и растений (рис. 1).
Нематоды в большинстве случаев являются раздельнополыми организмами, развивающимися как прямым путем, так и с участием промежуточных хозяев. Самцы обычно мельче самок, половой деморфизм четко выражен (рис. 2).
Характерной морфологической особенностью нематод является наличие 
первичной полости (схизоцель).
Форма тела нематод чаще нитевидная, веретенообразная, цилиндрическая, 
реже мешковидная или шаровидная. У некоторых нематод тело подразделяется 
на передний тонкий конец и задний утолщенный, или передний толстый, а задний тонкий и длинный. Нематоды могут быть скручены в спираль полностью 
или частично. Поперечный разрез тела имеет вид круга.
Тело нематод формируется кожно-мышечным мешком, образующим первичную полость (схизоцель), с расположенными в ней внутренними органами. 
Кожно-мышечный мешок состоит из трех слоев: кутикулы, гиподермы и мышц. 
Наружным и самым мощным слоем кожно-мышечного мешка является бескле- 
точная кутикула, которая выполняет защитную функцию, как от механического, так и от химического воздействия внешних факторов. Поверхность кутикулы может быть гладкой, с поперечной или продольной исчерченностью. В ряде 
случаев кутикула формирует лентовидные тяжи, зубчиковидные или бородавчатые и т.п. образования. Встречаются виды нематод, у которых кутикула приобретает вид как бы членистости (рис. 3).
Наибольшее разнообразие кутикулярных образований располагаются на 
головном и хвостовом концах нематод -  это головные и цервикальные крылья; 
хвостовые крьшья (половая бурса самцов); многочисленные сосочки, выполняющие функцию осязания. В кутикуле расположены также железы: шейные, 
хвостовые, терминально- хвостовые. Латеральные хвостовые (фазмиды) являются характерным признаком нематод подкласса фазмидиевых (Fasmidia) (рис. 
4, 9).
Толща кутикулы многослойна, число слоев у различных видов нематод колеблется в пределах 5-10. Основными слоями считаются -  внешний (кортикальный), промежуточный (матричный) и внутренний (базальный).
Гиподерма. Под кутикулой располагается гиподермический слой (субкутикула), состоящий из однослойного эпителия (синцитий), образующего в боковых, дорзальных и вентральных частях тела выпячивания в первичную полость, 
именуемые хордами. Основная функция гиподермы -  формирование кутикулы.

Мышцы. Третий слой кожно-мышечного мешка, прилегающий к гиподерме, 
представлен мышечными клетками. Учитывая количество мышечных клеток и 
их расположение на гиподермальном слое, нематоды подразделяют на меро- 
миарии (число мышечных клеток восемь), полимиарии (большое число мышечных клеток) и голомиарии (мышечные клетки покрывают гиподерму сплошным 
слоем) (рис. 5).
Схизоцель (первичная полость, псевдоцель, бластоцель), в которой располагаются внутренние органы нематод, заполнена «изоляционной тканью» и 
белковой жидкостью.
Пищеварительная система представлена у нематод ротовым отверстием, 
ротовой капсулой, пищеводом, средней кишкой, задней кишкой и анальным отверстием, располагающимся на вентральной стороне заднего конца тела. Ротовое отверстие в большинстве случаев расположено терминально, реже смешено 
на вентральную или дорзальную стороны тела. В одних случаях оно окружено 
различным количеством губ, или многочисленными кутикулярными лепестками.
У ряда нематод губы и лепестки отсутствуют. Ротовое отверстие может 
быть круглым, овальным, шестигранным и др. (рис. 10, 11, 18).
Ротовая капсула у нематод представляет собой полость различной величины и формы. На поверхности крупных ротовых капсул могут располагаться 
разнообразные хитинизированные образования в виде зубцов, крючков, пластинок. У ряда нематод ротовая капсула полностью отсутствует, и питательный субстрат через ротовое отверстие поступает сразу же в пищевод.
Ротовая капсула играет роль своеобразной присоски, а хитинизированные 
образования внутри нее разрушают слизистые оболочки, вызывая капельное 
кровотечение.
За ротовой капсулой следует пищевод -  мышечный орган нематод, выполняющий роль насоса, проталкивающего пищевой субстрат в среднюю кишку.
Пищевод может быть в виде прямой мышечной трубки (цилиндрический) 
или состоять из двух отделов -  мышечного -  переднего и железистого -  заднего; задний конец пищевода может иметь одно или два утолщения (бульбус и 
предбульбус) или пищевод делится на две равные части (в виде песочных часов) и т.д. У ряда нематод в конце пищевода имеются одно или два выроста 
железистого строения (желудочки).
Средняя кишка нематод представлена тонкостенной, в большинстве случаев прямой трубкой, которая переходит в заднюю прямую кишку. Передняя 
часть кишечника у некоторых нематод образует также слепые выросты, наподобие выростов пищевода. Средняя кишка отделяется от задней сфинктером. 
Анальное отверстие открывается поперечной щелью на заднем конце тела, несколько отступая от кончика хвоста. Стенка кишечника состоит из одного слоя 
эпителиальных клеток.
У самцов прямая кишка после впадения в нее семяпровода называется 
клоакой (рис. 20-25).
Выделительная система у большинства нематод представлена двумя экскреторными каналами, расположенными в боковых хордах. В головном конце

тела каналы сливаются, образуя экскреторный синус, открывающийся на вентральной поверхности тела экскреторной порой (рис. 6).
Нервная система нематод представлена нервным кольцом, расположенным 
вокруг пищевода. От нервного кольца отходят нервные стволы ко всем частям 
тела нематод, от которых идут нервные веточки к головным, шейным, половым 
сосочкам и всем внутренним органам (рис. 7, 8).
Половая система. Нематоды в большинстве случаев представлены раздельнополыми организмами и за редким исключением -  гермафродитами (рис. 12).
Половые органы самок обычно представлены двумя трубчатыми извивающимися яичниками, переходящими последовательно в два яйцевода, которые, в 
свою очередь, переходят в более крупные по диаметру трубки -  матки. Матки, 
сливаясь, образуют вагину, открывающуюся на вентральной поверхности тела 
половым отверстием -  вульвой. Вульва у различных нематод располагается на 
вентральной стороне тела, в любой его части от пищевода до анального отверстия. У ряда нематод вульва прикрывается выростом кутикулы в виде язычковидного образования -  подвульварным клапаном.
В ряде случаев у нематод встречаются виды с одинарным или множественным (4, 6 и более) набором яичников, яйцеводов и маток. У некоторых видов 
вагина представлена мощной мышечной трубкой, получившей наименование -  
яйцемёта (рис. 15).
Половые органы самцов чаще представлены одинарным нитевидным семенником и семяпроводом, который впадает в прямую кишку, образуя клоаку. 
Перед впадением в клоаку семяпровод, расширяясь, образует пузырек и короткий мышечный проток. В клоаке и рядом с ней у самцов располагаются вспомогательные органы: спикулы, рулек, теламон, половой конус, половые сосочки и бурса (рис. 13).
Спикулы у нематод чаще парные, реже одинарные, представляют собой 
хитиновые образования разнообразной длины и конфигурации, располагаются 
в специальном мышечном влагалище клоаки. Спикулы могут быть равными и 
разновеликими. С помощью мышц спикулы выдвигаются из клоаки и вводятся 
в половые органы самок. У некоторых видов нематод спикулы отсутствуют.
Рулек -  одинарный хитинизированный орган, расположенный дорзально 
или медиально от спикул, способствует направленному движению спикул, у 
некоторых нематод отсутствует.
Теламон -  уплотненная часть клоаки, располагается позади рулька на вентральной и латеральной сторонах клоаки, так же, как и рулек способствует направленному движению спикул.
Половой конус представляет собой каудальный выступ конусообразной 
формы, является одним из образований половой клоаки. В половой системе 
самцов могут быть и половые присоски, располагающиеся несколько впереди 
отверстия клоаки.
У многих самцов нематод на хвостовом конце имеются боковые кутику- 
лярные выросты, которые формируют половую бурсу (половые крылья). Каждая лопасть бурсы поддерживается сосочками или ребрами, подразделяющими

ся на вентральные, латеральные и дорзальные. Ребра бурсы снабжены волокнами, что позволяет самцам удерживать самку при оплодотворении (рис. 14).

РАЗВИТИЕ ПАРАЗИТИЧЕСКИХ НЕМАТОД

Большое количество видов нематод, паразитирующих у животных, отличаются между собой не только морфологическими особенностями, но и сложностью своего развития.
Развитие нематод начинается с оплодотворения самок. Самцы находят 
самок и обвиваются вокруг них. С помощью половых сосочков самцы отыскивают половое отверстие самки, вводя в них спикулы, которые расширяют ее, 
что способствует свободному проникновению сперматозоидов в матку, где и 
происходит оплодотворение яйцевой клетки с последующим формированием 
вокруг нее скорлуповых оболочек.
Величина и форма яиц у нематод весьма разнообразны. Размеры колеблются от 0,07-0,09 мм (стронгилюс, гемонхус) до 0,20-0,030 мм (нематодиру- 
сы). В мелких яйцах содержится небольшое количество питательных веществ, 
которых достаточно для развития только лишь личинки первой стадии, в более 
крупных -  питательных веществ хватает для развития личинок двух стадий. У 
нематод с очень крупными яйцами питательные вещества накоплены для развития личинок всех трех стадий (рис. 16).
Форма яйца у нематод, в большинстве случаев, овальная или округлая, 
симметричные, реже ассиметричные. Образование оболочек яиц у одних нематод происходит в яйцеводе, у других -  в матке.
Стенка или скорлупа яиц состоит из нескольких оболочек, каждая из которых выполняет специфические функции защиты яйцеклетки от различных 
факторов внешней среды.
После образования зиготы, вокруг нее начинает формироваться прозрачная «гомогенная» оболочка, которая и определяет форму и размер будущего 
яйца. Следующая, вторая оболочка, формируется между «гомогенной» и яйцеклеткой, именуемой «исчерченной».
После формирования второй оболочки, образовавшееся яйцо за счет маточного секрета окружает белковая оболочка.
Таким образом, скорлупа яиц нематод состоит из наружной белковой 
оболочки, образующейся из секрета матки, а под ней располагаются хитиноид- 
ная и липоидная оболочки, являющиеся производными собственно яйца.
Считается, что наружная и средняя оболочки обеспечивают защиту зародыша от механического воздействия, а внутренняя (липоидная) -  от влияния 
химических веществ. У некоторых нематод в яйце может отсутствовать белковая оболочка в тех случаях, когда сформированная в яйце личинка покидает 
свою скорлупу, будучи еще в матке (трихинелла). У других на полюсах яйца 
формируются «пробочки», или филименты, или подобие крышечек. Названные 
образования являются производными белковой оболочки.
Скорлупа яиц нематод в большинстве случаев бесцветная, но встречаются 
желтая, коричневая и др. Толстая скорлупа характерна для яиц, у которых дли