Книжная полка Сохранить
Размер шрифта:
А
А
А
|  Шрифт:
Arial
Times
|  Интервал:
Стандартный
Средний
Большой
|  Цвет сайта:
Ц
Ц
Ц
Ц
Ц

НЕЙРОГЕНЕЗ В ЗРЕЛОМ МОЗГЕ МЫШЕЙ C57BL/6: СРАВНИТЕЛЬНОЕ РЕГИОНАЛЬНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ СИНТЕЗА ДНК BrdU И EdU

Бесплатно
Основная коллекция
Артикул: 626619.01.99
Шерстнев, В. В. НЕЙРОГЕНЕЗ В ЗРЕЛОМ МОЗГЕ МЫШЕЙ C57BL/6: СРАВНИТЕЛЬНОЕ РЕГИОНАЛЬНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ СИНТЕЗА ДНК BrdU И EdU / В. В. Шерстнев, А. К. Нанаев, М. А. Грудень. - Текст : электронный // Znanium.com. - 2017. - №1-12. - URL: https://znanium.com/catalog/product/535054 (дата обращения: 24.07.2024)
Фрагмент текстового слоя документа размещен для индексирующих роботов. Для полноценной работы с документом, пожалуйста, перейдите в ридер.
НЕЙРОГЕНЕЗ В ЗРЕЛОМ МОЗГЕ МЫШЕЙ C57BL/6: СРАВНИТЕЛЬНОЕ 

РЕГИОНАЛЬНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ СИНТЕЗА ДНК BrdU И EdU

В.В.Шерстнев, А.К. Нанаев, М.А. , Грудень

ФГБНУ« НИИ нормальной физиологии  им.П.К. Анохина»

m.gruden@nphys.ru

Проведено 
сравнительное 
исследование 
региональных 
особенностей 

нейрогенеза на срезах зрелого мозга методами иммунофлюоресценции и/или 
химической детекции 2-х аналогов тимидина BrdU и EdU при их раздельном 
и 
совместном 
внутрибрюшинном 
введении 
мышам
C57BL/6. 
Получены 

результаты, свидетельствующие об эффективности использования EdU
для 

экспериментального изучения постнатального нейрогенеза.
Ключевые слова:
зрелый мозг, нейрогенез, маркеры пролиферации, BrdU, 

EdU, мыши.
В 
современных 
исследованиях 
постнатального 
нейрогенеза 
широко 

используютсинтетический аналог тимидина -5-bromo-2'-deoxyuridine, BrdU, 
применение которого имеет ряд существенных ограничений [2]. В этой 
связи, особый интерес вызывает использование другого аналога тимидина5ethynyl-2'-deoxyuridine, 
EdU, 
обладающего 
более 
высокой 

чувствительностью, а также выявления метки с помощью быстро протекающей 
химической 
реакции, 
не 
требующей 
применения 
моноклональных 
или 

поликлональных антител, что существенно повышает эффективность детекции 
и количественной оценки пролиферирующих клеток в зрелом мозге [3]. 
Однако, 
сравнительного 
исследования 
по 
количественной 
оценке 

пролиферирующих клеток в структурах зрелого мозга помимо зубчатой 
извилины гиппокампа с помощью BrdU и/или EdU не проводилось. Целью 
работы 
явилось 
проведение 
сравнительного 
количественного 
анализа 

распределения маркеров синтеза ДНК BrdU
и EdU
в пролиферирующих 

клетках различных структур зрелого мозге в условиях раздельного и 
совместного системного введения маркеров мышам.
МЕТОДИКА  ИССЛЕДОВАНИЯ 
Эксперименты выполнены на половозрелых мышах-самцах линии C57BL/6 весом 
26 -28 г (n=40) с соблюдением этических норм работы с лабораторными 
животными
в  соответствии с принципами гуманности,  изложенными в 

директиве Европейского сообщества (86/600 ЕС). Для оценки выявляемости 
BrdU
(Sigma, USA) и EdU
(Invitrogen, USA) использовали подобранную 

экспериментально (n=10) оптимальную дозу маркеров (150 мг/кг/в 50 мкл 
0,9 % NaCl)
при их индивидуальном (n=20) или совместном (n=10) 

внутрибрюшинном введении. Контрольным животным (n=3) вводили 0,9 % 
NaCl. Через 1 или 7 суток мышей декапитировали, мозг замораживали в 
жидком азоте, хранили при -85°C. BrdU выявляли как описано ранее [1]. 
Химическую детекцию EdU
проводили по протоколу Click-iT™ EdU
Imaging

Kit (Invitrogen, USA). Подсчёт BrdU- и EdU- положительных клеток (BrdU+ 
и EdU+) проводили на 117 серийных срезах у каждого животного в отделах 
гиппокампа, коре мозга, черной субстанции, сосудистом
сплетении, 

стенках желудочков мозга и мозговой оболочке
(от-2.12 до -6.04 mm 

относительно Bregma). Визуализацию окрашенных срезов проводили на 
микроскопе OLYMPUS BX51 Reflected fluorescence system (Olympus,USA) и