ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОЛИМОРФИЗМА A-105C (RS549908) ГЕНА IL18 У БОЛЬНЫХ ДИССЕМИНИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

29,4%, β-2-glycoprotein 29.0% Annexin-V to 20.0% (р<0,05),  prothrombin 
33.6% (р<0,05), APTT 
(Lupus - test) by 19.0% (р<0,05), clotting time 

(lebetoks test) by 18.1% (р<0,05).

Thus, Our research shows, that as the criteria indicators to form 

a risk of reproductive disorders It should be considered indicators of 
APR markers with a positive deviation from the average regional values. 
At the same time, observed features of dynamics of  indicators APR 
markers at women of different ethnic groups.
Literature.
1. Russkova, AN, Kosynkin, TM.,  //  Applied and fundamental research. 
- 2012. - № 1. - P - 69.
2. Sel'kov, SA, Sokolov DI . //  Obstetrics and gynecological diseases. 
- 2010 - Vol. 1. -T. LIX. - P. 6-9.
3. Khalimova FT,, Nevzorova EV., Shukurov FA., AV Gulin  // Bulletin of 
Lipetsk State Pedagogical University. - 2013  - Vol. 14. - P. 113-116.
3. Artim-Esen B., Diz-Kucukkaya R., Inanc M.. // Curr. Rheumatol.Rep. 2015. - Vol. 17 (3). - P. 494.
4. Findeklee S., Costa SD, Tchaikovski SN // Z. Geburtshilfe. Neonatol. 
- 2015. - Vol. 219 (1). - P. 45-51.
5. Lin DY, Tao R., Kalsbeek WD, Zeng D., Gonzalez F., Fernández-Rhodes 
L., Graff M., Koch GG, North KE, Heiss G.. // Am. J. Hum. Genet. 2014. - Vol. 95 (6). - P. 675-688.
DOI:10.12737/12483

ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПОЛИМОРФИЗМА A-105C (RS549908)

ГЕНА IL18

У БОЛЬНЫХ ДИССЕМИНИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Р.Р. Хасанова1,2, О.И. Уразова1, В.В. Новицкий1,3

1ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России

2Национальный исследовательский Томский политехнический университет, 

Томск, Россия

3Национальный исследовательский Томский государственный университет, 

Томск, Россия

hasanova_rezeda@mail.ru

Реферат. Проведено исследование полиморфизма
A-105C
(rs549908)
гена 

IL18
у 157 больных диссеминированным туберкулезом легких (ДТЛ). 

Выявлено 
достоверное 
повышение 
частоты 
встречаемости 
мутантного 

генотипа AC
(χ2=27,77 (p1<0,0001)) и аллеля C
(χ2=21,20 (p1<0,0001)) 

данного полиморфизма и их ассоциация с развитием ДТЛ. При этом у 
больных 
ДТЛ 
зарегистрировано 
повышение 
уровня 
продукции 
IL-18

миелоидными дендритными клетками (mDC) in vitro, что свидетельствует об 
отсутствии связи данного полиморфизма с дизрегуляцией IL-18-секреторной 
активности mDC.
Ключевые слова: туберкулез, генетический полиморфизм, IL-18, дендритные 
клетки
Введение. С позиций иммунопатологии диссеминированный туберкулез легких 
(ДТЛ) относят к ареактивной форме, особенностью которой является 

угнетение 
функциональной 
активности 
Т-лимфоцитов 
и 

антигенпрезентирующих клеток [1]. При этом в основе ареактивности 
иммунокомпетентных 
клеток 
лежит 
снижение 
продукции 
ими 

иммунорегуляторных цитокинов, что способствует нарушению формирования 
антимикобактериального 
ответа. 
Клинико-генетические 
исследования 

выявили генетически детерминированный характер развития туберкулеза, 
как 
мультифакториального 
заболевания. 
В 
этой 
связи 
изучение 

молекулярно-генетических основ туберкулезной инфекции в контексте 
выявления причин и условий ее возникновения и прогрессирования является 
перспективным направлением развития фундаментальной и практической 
медицины.
Материал и методы. Обследовано 157 больных с впервые выявленным ДТЛ до 
начала 
противотуберкулезной 
терапии. 
Исследование 
выполнено 
в 

лаборатории кафедры патофизиологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России. 
Экстракцию 
ДНК 
из 
венозной 
крови 
проводили 
стандартным 
фенол
хлороформным 
методом. 
Идентификацию 
полиморфного 
участка 
A-105C

(rs549908)
гена IL18
осуществляли с использованием рестрикционного

анализа 
продуктов 
амплификации 
специфических 
участков 
генома. 

Амплификат гена подвергали рестрикции эндонуклеазой TaqI
(«Сибэнзим», 

Россия). Результат реакции оценивали электрофорезом: образцы длиной 148 
п.н. содержали аллель A, гомозиготы CC – 123 и 25 п.н, гетерозиготы –
148, 123 и 25 п.н. Маркером размера ДНК служила плазмида pUC19, 
расщепленная рестриктазой MspI («Сибэнзим). Содержание IL-18 оценивали 
твердофазным иммуноферментным «сэндвичевым» методом
по инструкции 

«Biosource». Статистическая обработка данных проводилась общепринятыми 
методами; различия в независимых выборках оценили критерием Манна-Уитни 
(р<0,05).
Результаты. Анализ частоты встречаемости аллелей полиморфного региона 
A-105C (rs549908) гена IL18 показал, что у здоровых доноров аллель A
выявлялся в 2,8 раза чаще аллеля C, в то время как у больных ДТЛ 
обнаруживалось достоверное повышение встречаемости генотипа AC (χ2=27,77 
(p1<0,0001)) и аллеля C (χ2=21,20 (p1<0,0001)). Обнаружена положительная 
ассоциация (OR2=2,70 (1,72-4,25); OR2=1,97 (1,43-2,72)) носительства 
генотипа AC
и аллеля C
полиморфизма A-105C
(rs549908) гена IL18
с 

развитием диссеминированной формы заболевания. Следовательно, генотип 
AC и аллель C являются факторами, предрасполагающими к развитию ДТЛ, а 
носительство генотипа АА
и аллеля A
имеет протективное значение в 

отношении 
развития 
туберкулезной 
инфекции 
(OR1=0,31 
(0,20-0,49); 

OR1=0,47 (0,34-0,65)). Для анализа связи данного полиморфизма с 
функциональной активностью клеток-продуцентов цитокина у пациентов с 
ДТЛ оценивалась  секреция IL-18 in
vitro
миелоидными дендритными 

клетками (mDC). Известно, что носительство аллеля C
полиморфного 

региона A-105C
(rs549908)
гена IL18 ассоциировано со снижением 

продукции IL-18 in vitro. Однако у больных с ДТЛ нами, напротив, было 
выявлено повышение (р1<0,001) продукции IL-18 mDC относительно значений 
у здоровых доноров. Это подтверждает, что носительство полиморфизма 
105A/C
гена IL18
не является фактором, модулирующим уровень секреции 

IL-18
mDC, а, по-видимому, ассоциировано со снижением его
продукции 

клетками других субпопуляций. Возможно, что с гиперсекрецией IL-18 mDC
при ДТЛ ассоциированы другие полиморфизмы данного гена [2].

Таким образом, у больных ДТЛ генотип AC и аллель C полиморфизма 105A/C
(rs549908) гена IL18 встречаются чаще, а «дикий» генотип AA – напротив, 
реже, чем у здоровых доноров. Ввиду сочетания носительства аллеля C
полиморфизма A-105C гена IL18 с повышением секреции IL-18 mDC in vitro
у больных ДТЛ, можно полагать, что этот полиморфизм не вносит вклад в 
дизрегуляцию начального этапа иммунного ответа при данной клинической 
форме заболевания.
Литература.
1. Цветков, 
В.В. 
// 
Российский 
медико-биологический 
вестник 
им. 

академика И.П. Павлова. – 2014. – №3. – С. 68-74.
2. T. Worchol, M. Lianeri, P.P. Jagodzinski et al. // Rheumatology. –
2009. – Vol. 2 (№30). – P. 187-191.

STUDY OF THE IL-18 105 A>C (RS549908) POLYMORPHISM IN 

PATIENTS WITH DISSEMINATED TB

R.R.Khasanova1,2, O.I.Urazova1, V.V.Novitsky1,3

1Siberian State Medical University, Tomsk, Russia

2National research Tomsk Polytechnic University, Tomsk, Russia

3National research Tomsk State University, Tomsk, Russia

hasanova_rezeda@mail.ru

The study of IL-18 105 A>C (rs549908) polymorphism was carried out in 
157 patients with disseminated TB (DTB). Statistically significant 
increase in mutant AC genotype (χ2=27.77 (p1<0.0001)) and C allele 
(χ2=21.20 (p1<0.0001)) frequency has been revealed along with their 
association with DTB development. In the meantime patients with DTB 
exhibited higher production of IL-18 by myeloid dendritic cells (mDC) 
in vitro, which speaks of the absence of association of this 
polymorphism with dysregulated IL-18 secretion in mDC.
Key words: tuberculosis, genetic polymorphism, IL-18, dendritic cells
In terms of immunopathology disseminated TB (DTB) refers to an 
areactive type of TB which is characterized by suppression of the 
functional activity of T-lymphocytes and antigen-presenting cells [1]. 
Nonresponsiveness of immunocompetent cells is explained by decline in 
their production of immunoregulatory cytokines, which results in 
impaired antimycobacterial response. Clinical genetic research has 
identified the genetically determined nature of TB development as a 
multifactorial disease. Due to this fact studying the molecular and 
genetic basis of TB infection by identifying the reasons and conditions 
of its emergence and progression is a promising trend in development of 
fundamental and practical medicine.
Methods 157 patients with primarily detected DTB were examined prior to 
anti-TB treatment. The study was carried out in the laboratory of the 
Pathophysiology Department of Siberian State Medical University. DNA 
was extracted from venous blood by the standard phenol-chloroform 
method. IL-18 105 A>C (rs549908) polymorphic variants were identified 
using PCR followed by TaqI restriction digestion (“Sibenzyme”, Russia). 
The resulting digestion products were separated by gel electrophoresis: 
wild-type allele remained uncut (148 bp), homozygous CC allele was 
cleaved into 123 bp and 25 bp fragments and heterozygous AC allele was 

cleaved into 148 bp, 123 bp and 25 bp fragments. DNA size marker was 
pUC19
plasmid digested with MspI restriction enzyme (“Sibenzyme”, 

Russia). The concentration of IL-18 in the supernatants of dendritic 
cell suspensions generated in vitro from blood monocytes was measured 
using sandwich ELISA kits according to the manufacturer’s instructions 
(“Biosource”, USA). Statistical data processing was carried out by 
conventional methods; differences in independent samples was evaluated 
by the Mann-Whitney test (p<0.05).
Results  Analysis of IL-18 105 A>C (rs549908) allele frequency showed 
that in healthy donors A allele was detected 2.8 times more frequently 
than C allele, whereas in DTB patients a statistically significant 
increase in the AC genotype (χ2=27.77 (p1<0.0001)) and C allele 
(χ2=21.20 (p1<0.0001)) frequency was observed. Significant association 
was identified (OR2=2.70 (1.72-4.25); OR2=1.97 (1.43-2.72)) between IL18 105 A>C (rs549908)
AC genotype and C allele and
disseminated TB 

development. Consequently, AC genotype and C allele are risk factors 
for DTB development, whereas carrier ship of AA genotype and A allele 
has protective effect with respect to TB development (OR1=0.31 (0.200.49); OR1=0.47 (0.34-0.65)). To analyze the association of this
polymorphism with the functional activity of cytokine producing cells 
in DTB patients, IL-18 secretion in vitro by myeloid dendritic cells 
(mDC) was evaluated. It is known that carrying IL-18 105 A>C (rs549908)
C allele is associated with a decrease in IL-18 production in vitro. 
However, DTB patients exhibited a rise in IL-18
production by mDC

(р1<0,001) as opposed to healthy donors. It proves that carrying IL18 105 A>C (rs549908) polymorphism does not model IL-18 secretion by 
mDC, but it is apparently associated with a fall in its production by 
cells of other subpopulations. It is possible that IL-18
hyper 

secretion by mDC in DTB is associated with other polymorphisms of this 
gene. [2].  
Thus,
in DTB patients AC genotype and C allele of IL-18 105 A>C 

(rs549908)
polymorphism are more frequently observed than in healthy 

individuals, whereas wild-type AA genotype is, on the contrary, 
encountered more rarely than in the control group. Due to association 
of IL-18 105 A>C (rs549908)
C allele carriership with a rise in  IL-18

secretion by mDC in vitro in DTB patients,  it may be supposed that 
this polymorphism does not contribute to dysregulation of the early 
stage of the immune response in this clinical form of TB. 
References
1.Tsvetkov, V.V..// Russian Bulletin of Medical Biology n.a. Pavlov 
I.A..- 2014. – No. 3 – P. 68-74. 
2. T. Worchol, M. Lianeri, P.P. Jagodzinski et al. // Rheumatology. –
2009. – Vol. 2 (№30). – P. 187-191.
DOI:10.12737/12484