ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТВОРА РИБОФЛАВИНА С ХИТОЗАНОМ ДЛЯ УФ-СШИВАНИЯ КОЛЛАГЕНА РОГОВИЦЫ

3.75±1,65% (p<0.05), ventricular - 8.4±1,73% (p<0.01). Methoxamine (10-6

M) increased the contractility of the myocardium of the Atria at 
4±2.9%, and ventricles by 7.87±2,87% (p<0.05). Methoxamine at a 
concentration of 10-5 M increased inotropy ventricular on 7,83±3,66%, 
myocardial fibrillation 2.3±2%. At 1-week rat pups methoxamine at a 
concentration of 10-9 M increased force of contraction of the 
myocardium of the Atria to 4,92±1,81% (p<0.05), ventricular on 
2,23±0,95% (p<0.05). Methoxamine (10-8
M) reduced the force of 

contraction of the myocardium of the Atria 3.7 ą 1.3% (p<0.05), 
ventricular 11.1±2.7% (p<0.01). When adding the agonist at a 
concentration of 10-7 M in the Atria significant changes were observed, 
the force of contraction of the myocardium of the ventricles decreased 
by 4.3±1,11% (p<0.01). Methoxamine (10-6
M) increased force of 

contraction of the myocardium of the Atria and 6±1,43% (p<0.01), 
ventricular 10.8±3% (p<0.01). Agonist of α1-AR (10-5 M) increased force 
of contraction of the myocardium of the Atria on 8,76±2,2% (p<0.01), 
ventricular 15.9±5,2% (p<0.05). Thus, the age differences inotropic 
response of the myocardium of the Atria and ventricles of 1-and 20-week 
rats to stimulation of α1-AR methoxamine. 1 week-old rats methoxamine 
has both positive negative inotropic effects. The 20-week animals 
methoxamine has a dose-dependent positive inotropic effect.

REFERENCES

1.
Jensen B.C., O’Connell T.D., Simpson P.C. // J Mol Cell Cardiol. 

2011. Vol. 51(4). P: 518 – 28. 
2.
Jensen B.C., Swigart P.M., Laden M.E., DeMarco T., Hoopes C., 

Simpson P.C. // J Am Coll Cardiol.  2009. Vol. 54(13). P: 1137 – 45. 
3.
Shannon R., Chaudhry M. Effect of alpha1-adrenergic receptors in 

cardiac pathophysiology. // Am Heart J. 2006. Vol.152, N 5. P: 842-850.
4.
Ziyatdinova N.I., Dementieva R.E., Fashutdinov L.I., Zefirov T.L. 

Blockade of different subtypes of α(1)-adrenoceptors produces opposite 
effect on heart chronotropy in newborn rats. // Bull. Exp Biol. Med. 
2012. Vol.154, N 2. P: 184-185.
DOI:10.12737/12481

ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАСТВОРА РИБОФЛАВИНА С ХИТОЗАНОМ

ДЛЯ УФ-СШИВАНИЯ КОЛЛАГЕНА РОГОВИЦЫ

А.Р. Халимов, М.М. Бикбов, В.А. Катаев*, Г.А. Дроздова**

ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней АН РБ»; * ГБОУ ВПО «Башкирский 
государственный медицинский университет», г. Уфа; ** кафедра общей 

патологии и патологической физиологии Российского университета дружбы 

народов,
Москва

azrakhal@yandex.ru

Ключевые слова: кросслинкинг, рибофлавин, УФ излучение, хитозан, 

роговица.
В настоящее время с целью укрепления роговой оболочки глаза при 
хронических 
дегенеративных 
процессах 
успешно 
применяется 

ультрафиолетовый (УФ) кросслинкинг роговичного коллагена, основанный на 

УФ-А 
облучении 
роговицы 
длиной 
волны 
370 
нм 
в 
присутствии 

светочувствительного 
рибофлавина 
[3]. 
Кросслинкинг 
(перекрестное 

«связывание», 
или 
«сшивание») 
коллагеновых 
волокон 
способствует 

биомеханической 
стабилизации 
роговицы 
посредством 
усиливающейся 

межфибриллярной 
адгезии, 
вследствие 
рибофлавин-УФ-А 
инициируемых 

фотохимических реакций [1, 3]. Стандартная 
процедура 
сшивания 

корнеального коллагена предполагает предварительное насыщение стромы 
фотосенсибилизатором в течение 15 мин, которая обеспечивается за счет 
деэпителизации роговицы в зоне эктазии с последующей диффузией 0,1% 
раствора рибофлавина с декстраном и УФ облучение при длине волны 370 
нм. Для предупреждения нежелательного УФ воздействия на роговичный 
эндотелий кросслинкинг противопоказан при толщине роговицы менее 400 
мкм. Кроме этого, фактором, ограничивающим сшивание тонких роговиц 
может служить обезвоживающее действие декстрана, которое приводит к 
дополнительному, на фоне деэпителизации, снижению корнеальной толщины 
[2]. Цель исследования –
разработать средство для кросслинкинга 

корнеального коллагена и изучить его эффективность. 
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
Для решения поставленной задачи нами предложен раствор для УФ 
кросслинкинга, содержащий 0,1% рибофлавин и 1,0% хитозана сукцинат на 
буферной изотонической основе. Эксперименты ex vivo проводились в 2-х 
группах на 30 энуклеированных свиных глазах (по 15 глаз в каждой): в 
опытной 
группе 
проводили 
насыщение 
предлагаемым 
раствором, 
в 

контрольной – 0,1% рибофлавином с 20% декстраном (м.м. ~ 500 кДа). Из 
глазного яблока получали корнеосклеральный лоскут, который после 
деэпителизации (7-9 мм) насыщали исследуемыми растворами посредством 
инстилляций в течение 30 минут с дискретным интервалом 5 минут. 
Эффективность корнеального насыщения оценивали по величине остаточного 
излучения после абсорбции роговицей проходящего УФ светового потока (3 
мВт/см2, 370 нм), генерируемого устройством для УФ облучения роговицы 
глаза «УФалинк» (Россия). Интенсивность облучения определяли с помощью 
«УФ-тестера» 
(Россия). 
Измерения 
толщины 
роговицы 
проводили 
с 

использованием микрометра EG-100 (Япония). Статистическую обработку 
результатов 
проводили 
по 
стандартным 
методам 
параметрической 
и 

непараметрической статистики с помощью программы Statistika 6.0.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исходное УФ излучение мощностью 3 мВт/см2
после абсорбции в слоях 

интактной деэпителизированной роговицы снизилось на 80% (до 0,61±0,04 
мВт/см2). 
По 
мере 
насыщения 
роговиц 
растворами 
с 
рибофлавином 

интенсивность проникающего УФ света уменьшалась. Так, через 5 мин 
диффузии рибофлавина УФ излучение в опытной группе было ниже исходного 
на 89% (0,35±0,04 мВт/см2), а в контроле – на 84% (0,47±0,05 мВт/см2); 
через 10 мин – на 93% (0,22±0,05 мВт/см2) и 87 % (0,37±0,05 мВт/см2), 
соответственно. В последующий период наблюдений тенденция к снижению 
светопропускающей 
способности 
роговицы 
в 
исследуемых 
группах 

сохранялась, при этом раствор рибофлавина с хитозаном оказывал 
значительно более выраженный эффект. Одновременно с корнеальным 
насыщением проводили измерения толщины роговиц, которая в опытной 
группе осталась без изменений, тогда как в контроле уменьшилась на 22% 
– с 1,23±0,04 мм до 0,96±0,04 мм (через 30 мин). 
Следует 
отметить, 

что присутствие полимера в составе раствора необходимо для образования 

стабильной прекорнеальной рибофлавиновой пленки, которая защищает 
интраокулярные 
ткани 
от 
ультрафиолета 
и 
улучшает 
диффузию 

фотосенсибилизатора [4].
Более высокая УФ-адсорбирующая способность 

роговиц в опытной группе обусловлена, прежде всего, сохранением 
исходной корнеальной толщины. Снижение последней, которое мы наблюдаем 
в контроле, влечет за собой, соответственно, уменьшение корнеальной 
емкости для диффундирующего в строму рибофлавина. 
Таким 
образом, 

офтальмологическое 
средство 
для 
роговичного 
УФ 
кросслинкинга, 

содержащее 0,1% рибофлавин и 1,0% хитозана сукцинат, способствует 
эффективному насыщению стромы фотосенсибилизатором, оказывает более 
выраженную УФ протекцию корнеальных тканей за счет сохранения исходной 
толщины роговицы. 
ЛИТЕРАТУРА
1. 
Бикбов 
М.М., 
Бикбова 
Г.М. 
Эктазии 
роговицы 
(патогенез, 

патоморфология, клиника, диагностика, лечение). - М., 2011.
2. Mazzotta C., Caragiuli S. // Am. J. Ophthalmol. 2014. - Vol. 157, N
6. - P. 1156-1162.
3. Wollensak G., Spoerl E., Seiler T. // Am. J. Ophthalmol. 2003. Vol. 135, N 5. - P. 620-627.
4. Wollensak G., Aurich H., Wirbelauer C., Sel S. // J. Cataract. Refr. 
Surg. 2010. - Vol. 1, N 36. - Р. 114-120. 

EFFECTIVENESS OF RIBOFLAVIN / CHITOSAN SOLUTION FOR UV 

CORNEAL COLLAGEN CROSSLINKING

A.R. Khalimov, M.M. Bikbov, V.A. Kataev*, G.A. Drozdova**

Ufa Eye Research Institute; *Bashkir State Medical University, Ufa;

**Academic department of general pathology and pathophysiology

of Peoples' Friendship University of Russia, Moscow

azrakhal@yandex.ru

Abstract. In ex vivo experiment we analyzed riboflavin/chitosan 

solution which was designed for cornea saturation. It provides higher 
UV absorption by “cornea-riboflavin” system without any changes of 
corneal thickness.

Key words:
crosslinking, riboflavin, UV radiation, chitosan, 

cornea. 
Corneal collagen crosslinking (CXL) based on UVA radiation with 370 nm 
wave length and photosensitive riboflavin coating is successfully used 
for strengthening the cornea in chronic degenerative process [3]. 
Corneal collagen crosslinking contributes biomechanical stabilization 
of the cornea by interfibrillar adhesion. It is a result of riboflavinUVA activated photochemical reactions involving reactive oxygen 
intermediates. [1, 3]. 

The standard procedure of corneal collagen crosslinking supposes 

preliminary stroma saturation by photosensitiser for 15 minutes which 
is achieved via corneal deepithalization in ectasia zones with 
following diffusion of 0.1% dextran/riboflavin solution and UV 
radiation with 370 nm wave length. Crosslinking is contraindicated in 

cornea thickness less than 400 nm to prevent undesirable  UV exposure 
on corneal endothelium. The dehydrating effect of dextran may become a 
limiting factor of CXL for the thin cornea. It leads to additional 
reduction of corneal thickness [2]. 

Purpose – to develop and examine the drag for UV corneal collagen

crosslinking
MATERIALS AND METHODS 
We have proposed a solution for UV crosslinking containing 0.1% 
riboflavin, 1.0% chitosan succinate and isotonic buffer.
Ex vivo 

experiments were conducted in 2 groups of 30 enucleated porcine eyes 
(15 eyes in each group): experimental group was saturated with 0.1% 
riboflavin/ 1.0% chitosan succinate solution, control group – with 0.1% 
riboflavin/20% dextran solution (m.w. ~ 500 kDa). We obtained a 
corneoscleral flap, performed deepithelialization (7-9 mm), saturated 
cornea with test solutions by instillation for 30 minutes every 5 
minutes. The effectiveness of corneal saturation was estimated by the 
amount of radiation after absorption of UV light flow (3 mW / cm2, 370 
nm) by cornea. UV radiation was generated by ophthalmic solution for 
corneal crosslinking “UFalink”. The intensity of UV radiation was 
measured by “UV tester” (Russia). Corneal thickness measurements were 
performed by a digital micrometer EG-100 (Japan).

Statistical analysis was performed using «Statistika 6.0».

RESULTS
Initial UV radiation power of 3 mW / cm2 after absorption in the intact 
cornea  decreased by 80% (up to 0.61 ± 0.04 mW / cm2). So far as cornea 
had been saturated with riboflavin solutions penetrating intensity of 
UV light decreased. Thus, in 5 minutes of riboflavin diffusion UV 
radiation in the test group was lower than the initial by 89% (0.35 ± 
0.04 mW / cm2), and in the control group - by 84% (0.47 ± 0.05 mW / cm2) 
; in 10 min - by 93% (0.22 ± 0.05 mW / cm2) and 87% (0.37 ± 0.05 mW / 
cm2), respectively. In the follow-up period the light-transmitting 
ability of the cornea kept being reduced, and chitosan/riboflavin 
solution proved to have much more pronounced effect.
Simultaneously 

with corneal saturation we  measured corneal thickness which in the 
test group remained unchanged, where as in the control group decreased 
by 22% - from 1.23 ± 0.04 mm to 0.96 ± 0.04 mm (after 30 minutes).

It should be noted that the presence of polymer in the solution is 

necessary to form a stable precorneal riboflavin coating, which 
protects intraocular tissues against UV radiation and improves the 
diffusion of a photosensitizer [4]. Higher UV absorption capacity of 
corneas in the test group is caused by maintaining initial corneal 
thickness. Its reduction which is observed in control group entails, 
respectively, reduction of corneal capacity for riboflavin.

Thus, the solution for corneal UV crosslinking containing 0.1% 

riboflavin and 1.0% chitosan succinate promotes effective saturation of 
stroma by riboflavin, has a more pronounced UV protection of corneal 
tissues due to preservation of the initial corneal thickness.
REFERENCES
1.
Bikbov 
M.M., 
Bikbova 
G.M. 
Corneal 
Ectasias 
(pathogenesis, 

pathomorphology, clinical findings, diagnostics and treatment). –
Moscow, 2011.

2.
Mazzotta C., Caragiuli S. // Am. J. Ophthalmol. 2014. - Vol. 157, 

N 6. - P. 1156-1162.
3.
Wollensak G., Spoerl E., Seiler T. // Am. J. Ophthalmol. 2003. 
Vol. 135, N 5. - P. 620-627.
4.
Wollensak G., Aurich H., Wirbelauer C., Sel S. // J. Cataract. 

Refract. Surg. 2010. - Vol. 1, N 36. - Р. 114-120. 
DOI:10.12737/12482

ПОКАЗАТЕЛИ МАРКЕРОВ АНТИФОСФОЛИПИДНОЙ РЕАКЦИИ  У ЖЕНЩИН 

РАЗЛИЧНЫХ ЭТНИЧЕСКИХ ГРУПП

Халимова Ф.Т.

Таджикский государственный медицинский университет им. Абуали ибни 

Сино, Душанбе, Таджикистан
farizakhalimova@gmail.com

Ключевые слова:
маркеры антифосфолипидной реакции, климато
геогафические условия, репродуктивная функция.

Известно, 
что 
одной 
из 
иммунологических 
причин 
нарушения 

фертильности 
могут 
являться 
антифосфолипидные 
антитела, 
которые 

вызывают тромбоз плацентарных сосудов и могут оказывать прямое 
повреждающее действие на плод [1;3;4;6]. Антифосфолипидные антитела 
(АФА), образующиеся под воздействием эндогенных стимулов, связаны с 
нарушением 
эндотелиального 
гемостаза 
и 
вызывают 
различные 

тромбоэмболические нарушения. Волчаночный антикоагулянт (ВА) имеет
большое значение в акушерской практике и выявления  его в крови 
является 
качественным 
проявлением 
действия 
определенных 
уровней 

аутоантител к фосфолипидам на систему гемостаза [2;5]  По-прежнему 
остаются спорными вопросы воздействия АФА на процесс имплантации. Целью 
нашего 
исследования 
явилось
изучение 
распространенности 

антифосфолипидной реакции (АФР) у женщин, проживающих в регионах, 
которые различались климато-географическими условиями, национальным и 
этническим составом

Материалы и методы исследования.
Концентрацию суммарных антител  

класса IgG к кардиолипину –
КЛ+ФС+ФИ+ФК, к β2-гликопротеину-I, к 

протромбину и к аннексину-V в сыворотке крови (Ед/мл) определяли на 
анализаторе 
для 
иммунного 
анализа 
BioRad, 
производства 

SanofiDiagnosticsPasteur, (Франция –
США) с помощью набора реактивов 

фирмы «Orgentec» с использованием тест-систем фирм «Monobind», «DRG» и 
«DSL». Определение в плазме крови антикоагулянтов волчаночного типа: 
люпус-чувствительное АПТВ (ВА+) и протромбинового теста (либетоксовый) 
производили с помощью набора реактивов «Технология –
стандарт». На 

основании совокупности полученных результатов из числа обследуемых была 
определена группа риска развития нарушений репродуктивной функции: 
группа риска №1 женщины, проживающие в Липецкой области, Россия; 

группа риска №2 - женщины, проживающие в Файзабаде, Таджикистан. Анализ 
исследований проведён с определением основных статистических параметров 
(М  m) и достоверности их различий по параметрическому критерию