Оксид азота и диабетические ангиопатии

Патофизиология сахарного диабета 

О
к
с
и
д 
а з о т а 
и 
д и а б е т и ч е с к и е 
а н г и о п а т и и 

И.А.Бондарь, В.В.Климентов, И.А.Поршенников 

Кафедра внутренних болезней (зав. - акад. РАМН Л.Д. Сидорова) I 

лечебного факультета Новосибирской медицинской академии I 

П

атогенез сосудистых осложнений сахарного диабета (СД) является до конца нерешенной проблемой. Важную роль в развитии диабетических ангиопатии (ДА) отводят дисфункции эндотелия и нарушениям регуляции сосудистого тонуса. Особый интерес вызывает оксид 
азота NO - свободный радикал, вызывающий эндотелийзависимую вазодилатацию (другое название эндотелиальный фактор релаксации), ингибирующий агрегацию тромбоцитов, адгезию лейкоцитов к 
эндотелию и пролиферацию гладкомышечных клеток сосудистой стенки |8]. 

Образование NO происходит из L-аргинина под действием 
NO-синтаз (NOS). В эндотелии и тромбоцитах функционирует 
конституционально 
экспрессируемая 
изоформа 
фермента 
(eNOS), катализирующая образование сравнительно небольших 
количеств нитрооксида. В макрофагах, нейтрофилах, гепатоцитах, мезангиальных и гладкомышечных клетках синтез NO определяет индуцибельная NO-синтаза (iNOS), при стимуляции которой продукция оксида азота может возрастать в десятки раз, при 
этом N0 приобретает цитотоксические свойства [3|. Генерация 
оксида азота iNOS в р-клетках поджелудочной железы в рамках 
аутоиммунного процесса участвует в деструкции клеток и развитии СД 1 типа [1, 3]. 

При определении роли N 0 в патогенезе ДА получены противоречивые данные, что связано как с 
различиями клинических характеристик больных, 
так и с разными методическими подходами к оценке синтеза NO. В некоторых работах о продукции 
оксида азота судили по активности eNOS клеток, в 
частности, тромбоцитов; одни авторы выявили ее 
снижение [14, 17, 18], другие зафиксировали повышение [4|. 

Иной подход основан на интегральной оценке 
уровня N 0 по содержанию в крови или моче стабильных продуктов его окисления - нитратов и нитритов. В плазме крови больных СД были обнаружены как нормальные [6], так и повышенные [9] 
показатели метаболитов оксида азота. 

Цель нашего исследования состояла в изучении 
уровня эндогенного N 0 на основании экскреции 
нитратов с мочой у больных СД 1 типа в зависимости от выраженности ДА и повреждения сосудистого эндотелия. 

О б ъ е м и с с л е д о в а н и й и м е т о д ы 

Обследовано 40 больных СД 1 типа (20 мужчин и 20 женщин) 
в возрасте 15-48 лет с длительностью заболевания от 2 мес. до 23 
лет;. 32 пациента находились в состоянии декомпенсации углеводного обмена. У 12 больных не выявлено признаков ДА (1-я 
группа), у 12 - выраженные стадии ДА (3-я группа). Артериальная гипертензия (АГ) имела место у 13 пациентов с диабетической нефропатией. В обследование не включались пациенты с инфекциями мочеполовой системы, а также получавшие препараты-донаторы N0 (нитраты, нитропруссид натрия и др.). Контрольную группу составили 24 здоровых человека. 

Уровень гликированного гемоглобина (HbAlc) определяли 
иммунотурбидиметрическим методом на аппарате COBAS MIRA 
фирмы Roche Diagnostika. Нормальный уровень HbAlc при определении данным методом не превышает 6%. 

С целью верификации повреждения эндотелия сосудов исследовали содержание антигена фактора Виллебрандта (ФВ) в плазме венозной крови ELISA-методом с использованием наборов 
фирмы Boehringer Mannheim. 

Для оценки уровня эндогенного NO определяли экскрецию 
нитритов в утренней порции мочи с помощью реакции Griess; 
Использовался раствор реактива Griess в 12%-ной уксусной кислоте, дающий в присутствии нитритов пригодную для спектрофотометрического определения красную окраску. К образцам 
мочи раствор Griess добавляли в соотношении 5:1, инкубировали 
в течение 1 ч при комнатной температуре и спектрофотометрировали при 7=538 нм. Концентрацию нитритов в пробах рассчитывали по калибровочной кривой, в качестве которой использовали последовательные разведения 20 мкмоль раствора NaN02. 
Результат приводили к величине экскретируемого креатинина и 
выражали в мкмоль нитритов на 100 мкмоль креатинина. 

Статистическая обработка проведена с использованием стандартных методов вариационной статистики (М±т). 

Р е з у л ь т а т ы и и х о б с у ж д е н и е 

Клинико-лабораторная характеристика больных 
СД представлена в таблице; группы обследованных 
сопоставимы по возрасту, показателям углеводного 
обмена и различались по длительности заболевания 
и уровню среднего артериального давления (АД). 

При исследовании экскреции нитритов с мочой 
не установлено различий показателей у больных СД 
без сосудистых осложнений и лиц контрольной группы (рис. 1). У пациентов с ДА (группы 2-я и 3-я) обнаружено почти двукратное в сравнении с контролем 
повышение уровня экскреции. Наиболее высокие 
показатели регистрировались у больных с начальными стадиями ДА, с увеличением тяжести ангиопатии