Показатели перекисного окисления липидов и активность антиоксидантных ферментов в лимфоцитах периферической крови в дебюте ИЗСД

Общие вопросы диабетологии 

Показатели перекисного 
окисления липидов и активность 
антиоксидантных ферментов в 
лимфоцитах периферической крови в 
дебюте ИЗСД 

О.М. Смирнова, В.А. Горелышева 

Эндокринологический научный центр 
I 
(дир. - акад. РАМН И.И. Дедов) РАМН, Москва 
I 

М

ногими 
исследователями 
установлена 
активация 
процессов 
перекисного 
окисления липидов (ПОЛ) при экспериментальном диабете и у больных сахарным диабетом. Изучение процессов ПОЛ и антиоксидантной зашиты у больных инсулинзависимым сахарным диабетом (ИЗСД) выявило значительные изменения в этих системах. Процессы ПОЛ значительно активируются при длительном течении заболевания и играют определенную роль в патогенезе поздних осложнений диабета | 1 , 6, 11]. У 
больных с впервые выявленным ИЗСД состояние 
ПОЛ и антиоксидантной зашиты изучено недостаточно. По данным ряда авторов, избыточное образование свободных интермедиатов кислорода, индуцированных цитокинами, играет важную роль в 
патогенезе ИЗСД. Такие цитокины, как интерлейкин-1 (ИЛ-1), фактор некроза опухолей (ФИО) и 
у-интерферон, могут влиять на секрецию инсулина и оказывать цитотоксическое действие на (3клетки in vitro [15]. 

Избыточное количество свободных радикалов 
кислорода выделяется активированными макрофагами и поврежденными Р-клетками [12, 13]. РКлетки необычайно чувствительны к токсическому действию свободных радикалов кислорода 
[8] и процессы ПОЛ наиболее выражены в клетках 
островков 
Лангерганса 
[4]. 
Островковые 
клетки имеют слабую антиоксидантную защиту и 
особенно уязвимы для свободных радикалов, что 
является одной из причин их лизиса при ИЗСД 
[7,14]. 

Целью настоящего исследования явилось изучение состояния ПОЛ и антиоксидантной ферментной защиты в лимфоцитах периферической крови у 
больных ИЗСД в дебюте заболевания. 

Материалы и методы 

Обследовано 22 больных с впервые выявленным ИЗСД в возрасте от 15 до 35 лет с длительностью заболевания от I мес до 1 
года. На момент обследования все пациенты были в состоянии 
декомпенсации (гликогемоглобин А1с составил 10,76+0,42%). 
Среднесуточная гликемия была 12,6+0,43 ммоль/л, доза инсулина — 0,50+0,04 ЕД/кг в сутки. Контрольную группу составили 16 
здоровых добровольцев в возрасте от 19 до 37 лет. 

Всем больным проведено исследование остаточной секреции 
инсулина по уровню С-пептида в пробе с изокалорийным завтраком (660 ккал). Уровень базального и стимулированного Спептида (нулевая и 60-я минута) определяли радиоиммунологическим методом с использованием наборов C-pep-CTRIA фирмы 
«CIS bio international* (Франция). 

Уровни гликированного гемоглобина А1с определяли методом ионообменной хроматографии на микроколонках (фирма 
Bio-Rad, Париж) (норма — до 6%). 

Для исследования ПОЛ использовали лизаты лимфоцитов, 
предварительно выделенные в градиенте плотности фиколл-верографина. Количество гидроперекисей (ГП) определяли методом 
В.Б. Гаврилова и М.И. Мишкорудной [2]. Уровни малонового 
диальдегида (МДА) определяли по изменению интенсивности 
окрашивания с тиобарбитуровой кислотой на спектрофотометре. 
Для оценки состояния антиоксидантной защиты клетки определяли активность супероксиддисмутазы (СОД), глутатионпероксидазы (ГЛП), каталазы (К). Активность СОД определяли методом 
сопряженной калориметрии по I. Fridovich [10], ГЛП — методом 
P. Emmerson в модификации В.З. Ланкина [5], каталазы (КТ) методом J. Ernst [9]. 

Количество р-лимфоцитов (СД2Г), Т-хелперов/индукторов 
(СД4
1) и Т-супрессоров/цитотоксических (СД8*) определяли с 
помощью моноклональных антител (ЛБ21, ЛТ4 и ЛТ8). Количество Т-лимфоцитов (СДЗ), NK-клеток, экспрессию HLA-DR — 
антигенов определяли с помощью коммерческих моноклональных антител фирмы Becton Dickinson (Lew 4, Lew 7, анти-HLADR). Анализ проводили методом проточной цитофлюориметрии 
на проточном цитометре EP1CS-C. Аутоантитела к микросомальному антигену тиреоцитов (АМАТ), тиреоглобулину (АТГ) человека, поверхностным антигенам клеток гипофиза (АА) и надпочечников (АН) крысы, фибробластам кожи (АФ) человека опре