Иммуногенетические аспекты медленно прогрессирующего аутоимунного диабета у взрослых (LADA)

1/2011

Сахарный диабет
Вопросы патогенеза

Иммуногенетические аспекты медленно 
прогрессирующего аутоимунного диабета 
у взрослых (LADA)

Никонова Т.В.1, Апанович П.В.2, Пекарева Е.В.1, Горелышева В.А.1, Степанова С.М.1, Тишина Ю.В.1, Прокофьев С.А.1, 
Карпухин А.В.2

 1ФГУ Эндокринологический научный центр, Москва 
 (директор — академик РАН и РАМН И.И. Дедов )
 2Медико-генетический научный центр, Москва 
 (директор — академик РАМН Е.К. Гинтер)

Одним из вариантов течения аутоиммунного сахарного диабета является медленно прогрессирующий аутоиммунный диабет взрослых Latent autoimmune diabetes of adults (LADA). Он сопровождается клинической картиной, не типичной для классического сахарного 
диабета 1 типа (СД1). Несмотря на наличие положительных аутоантител характеризуется медленными темпами аутоиммунной 
деструкции, что не сразу приводит к развитию потребности в инсулине. Как и классический СД1, LADA связан с потерей иммунологической толерантности к собственным антигенам. Между тем, при LADA количественная и функциональная активность Тreg как центральных регуляторов иммунного ответа и главных носителей феномена иммунологической толерантности до сих пор остаются 
не изученными, как и их взаимосвязь с показателями апоптоза.
Цель . Определение количественных и функциональных изменений, происходящих на уровне регуляторного звена иммунитета у пациентов 
с различной длительностью LADA, их взаимосвязь с показателями апоптоза, иммунологическими и генетическими маркерами.
Материал .и .методы . В исследование были включены 74 больных (51 мужчина, 23 женщины) с различной длительностью заболевания, 
56 человек составили контрольную группу. У всех обследуемых было проведено HLA-генотипирование, определение аутоантител к глютаматдекарбаксилазе, инсулину, тирозинфосфатазе, антигенам островковых клеток, определение субпопуляционного состава лимфоцитов 
CD3+, CD4+, CD8+, CD38+, HLA DR+, CD25+, CD4+25+ ,CD95, CD95L, интенсивность экспрессии гена FoxP3, С-пептида, HbA1c.
Результаты . Начало заболевания LADA характеризуется показателями экспрессии гена FoxP3, не отличающимися от контрольных 
значений. При этом наблюдается достоверное повышение относительного количества CD4+25+high-Т-лимфоцитов. Снижение экспрессии 
гена FoxP3 при диабете LADA, в отличие от СД1, наблюдается через 6–12 мес от начала заболевания, при этом количество CD4+25+highТ-лимфоцитов нормализуется и при дальнейшем течении заболевания не отличается от контрольных значений. В период от 1 до 5 лет 
вновь наблюдается нормализация экспрессии гена FoxP3, при длительности болезни более 5 лет – достоверное снижение. Уровень экспрессии маркеров апоптоза (CD95 и CD95L на лимфоцитах, а также их растворимых форм) у пациентов с LADA во всех группах был 
сопоставим с контролем.
Заключение . Впервые определена интенсивность экспрессии гена Fox P3 и количество CD4+CD25+hight T-регуляторных лимфоцитов при 
различной длительности сахарного диабета LADA. Изменение экспрессии гена FoxP3 у пациентов с LADA носит волнообразный характер, а функциональный дефицит Тreg отсрочен. Возможно, увеличение численности Тreg компенсирует их функциональный дефицит. 
В этом случае увеличение численности популяции Тreg в период до 6 мес от начала болезни может отражать их регулирующую роль — 
в подавлении аутоиммунитета, что проявляется в более плавном начале заболевания.
Ключевые .слова: LADA, CD4+CD25+, Т-регуляторные клетки, ген FoxP3, апоптоз, CD95, CD95L
 
Immunogenetic characteristics of LADA
Nikonova T.V.1, Apanovich P.V.2, Pekareva E.V.1, Gorelysheva V.A.1, Stepanova S.M.1, Tishina Yu.V.1, Prokofiev S.A.1, Karpukhin A.V.2

1Endocrinological Research Centre, Moscow
2Medico-Genetic Research Centre, Moscow

Latent autoimmune diabetes of adults (LADA) is a variant of autoimmune diabetes mellitus. Its clinical feature not typical for classical DM1 despite 
the presence of positive autoantibodies is characterized by the low rate of autoimmune destruction that accounts for the late development of insulin 
dependence. Similar to classical DM1, LADA is associated with the loss of immune tolerance to autoantibodies. However, the quantitative and 
functional activity of Treg as key regulators of the immune response and main agents of immune tolerance remain as poorly known as their relationship 
with characteristics of apoptosis. 
Aim . To elucidate qualitative and functional changes at the level of immunity regulation in patients with LADA of different duration and their 
relationships with characteristics of apoptosis, immunological and genetic markers.
Materials .and .methods . The study included 64 patients (45 men and 19 women) with LADA and 56 control subjects. The methods included HLA 
genotyping, detection of autoantibodies against GAD, insulin, tyrosine phosphatase, islet cell antigens, composition of CD3+, CD4+, CD38+, HLA 
DR+, CD25+, CD+25+, CD95, CD95L lymphocyte subpopulations, FoxP3 and C-peptide expression, HbA1c levels.
Results . FoxP3 expression at the onset of LADA was similar to that in control subjects while the relative amount of CD425+high T-lymphocytes increased. 
In contrast to DM1, FoxP3 expression began to decrease 6–12 months after the onset of LADA when the amount of CD425+high T-lymphocytes lowered 
to become normal with the progress of the disease. Within 1–5 years after the onset of LADA, FoxP3 expression became normal again but significantly 
increased when its duration exceeded 5 years. Expression of apoptosis markers (CD95 and CD95L) on lymphocytes and of their soluble forms in all 
LADA patients was comparable with control. 
Conclusion . We for the first time determined intensity of FoxP3 expression and the amount of CD425+high T-lymphocytes in patients with different 
duration of LADA. FoxP3 expression varies periodically while functional deficit of Treg is delayed and appears to be compensated by a rise in their 
number. Increased population of Treg within 6 months after the onset of LADA may reflect their regulatory role (suppression of autoimmunity) 
accounting for the gradual development of the disease. 
Key .words: LADA, CD4+CD25+, regulatory T-cells, FoxP3 gene, apoptosis, CD95, CD95L